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81.
纳米金生物条形码技术检测痕量二噁英类化合物 总被引:1,自引:0,他引:1
建立一种基于纳米金生物条形码技术的二噁英快速筛检方法.利用二噁英诱 导激活的芳香烃受体复合物,特异识别以纳米金为报告基团的二噁英反应探针,该 探针被释放后进行条形码放大,通过纳米金银染技术增强识别信号,并记录其吸光度值,从 而可以简单灵敏地快速筛检二噁英类化合物.在一定的反应时间和浓度范围内(10-14~10-10mol/L),溶液的吸光度值与2,3,7,8 四氯二苯并二噁英(2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin,TCDD)浓度之间呈正相关 ,方法检测限为0.01 pmol/L,变异系数为5%~8%.用纳米金生物条形码(Nano Barcod e,nanoparticle based bio barcode)方法和现有的生物分析方法(CALUX,chemical activated luciferase gene expression)分别测定TCDD标准品,并绘制剂量效应曲线.结 果表明,本方法灵敏度高,线性范围宽,重复性好.本研究纳米金生物条形码方法的检测灵 敏度高于CALUX将近5倍(EC50分别为 4×10-12 mol/L 和 2×10- 11 mol /L),检测限较CALUX降低了10倍(检测限分别为1×10-14 mol/L 和1×10 -13 mol/L),变异系数分别为5%~8%和15%~30%. 相似文献
82.
目的:利用稀土离子作为示踪剂,建立DON/ZEN双标记间接竞争时间分辨荧光免疫分析方法同时检测DON、ZEN。 方法:以DON BSA、ZEN-BSA共包被于固相微孔板,与DON/ZEN标准或样品中的DON、ZEN竞争结合抗DON多抗、抗ZEN单抗,然后分别用稀土离子Eu3+-羊抗兔IgG及Sm3+ 羊抗鼠IgG进行示踪检测,并对建立DON/ZEN-双标记TRFIA进行方法学的考核。结果:DON/ZEN-双标记TRFIA检测灵敏度,DON为0.2 ng/ml、ZEN为0.7 ng/ml,检测范围为:DON 0.2~100 ng/ml,ZEN 0.7~50 ng/ml,批内、批间变异率均小于10%。不同样品添加回收实验表明玉米、小麦样品中DON平均回收率分别为102.8%、98.8%,ZEN平均回收率分别为94.2%、95.7%。DON/ZEN-双标TRFIA检测时,DON与ZEN不相互干扰,该方法特异性好。玉米样品检测结果表明,DON/ZEN双标记TRFIA与单标记DON -TRFIA、ZEN-TRFIA试剂盒结果高度相关,具有较好的一致性,两者检测DON的结果相关系数为0.9760,检测ZEN结果的相关系数为0.9695,结论:DON/ZEN-双标记TRFIA灵敏度高,检测范围宽,重复性、稳定性好,一次检测可同时得到DON、ZEN两个结果,是一种简便、快速、经济、稳定、可进行大批量样品筛查的检测方法。 相似文献
83.
84.
云南红豆杉中紫杉醇和四种紫杉烷类化合物含量 总被引:7,自引:0,他引:7
云南红豆杉中紫杉醇和四种紫杉烷类化合物含量项伟张宏杰阮德春孙汉董(云南省林业科学院,昆明650204)(中国科学院昆明植物研究所,昆明650204)Contentsoftaxolandother4taxanediterpenoidsinTaxusyu... 相似文献
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86.
玉米赤霉烯酮是世界上污染最为广泛的一种镰刀菌(Fusarium)毒素,严重危害牲畜以及人类的健康。来源于粉红螺旋聚孢霉(Clonostachys rosea)的玉米赤霉烯酮水解酶(zearalenone hydrolase,ZHD)能有效降解饲料中的玉米赤霉烯酮,然而饲料加工中的高温环境限制了该酶的应用。基于结构特征的理性设计可为酶的热稳定性改造提供指导。本研究首先基于蛋白质结构比对(multiple structure alignment, MSTA)筛选ZHD的结构灵活区,随后基于序列保守性打分以及构象自由能计算设计突变文库,得到基于136号和220号残基的9个单点突变设计。结果表明,9个突变体的热熔融温度(Tm)提高了0.4–5.6℃,其中S220R和S220W热稳定性表现最好,Tm分别提高了5.6℃和4.0℃,45℃下的热半失活时间分别延长了15.4倍和3.1倍,相对酶活分别为野生型的70.6%和57.3%。分子动力学模拟分析表明突变位点及附近区域的作用力得到了增强,突变体S220R和S220W的220-K130氢键成键概率分别增加了37.1%和19.3%、K130-D223盐桥成键概率分别增加了30.1%和12.5%,为ZHD热稳定性的提高作出了贡献。这项工作表明结合天然酶的结构比对、序列分析及自由能计算的热稳定性改造策略的可行性,并获得了热稳定性增强的ZHD变体,为ZHD在工业上的应用打下基础。 相似文献
87.
用ZEN—BSA人工抗原免疫BALB/c鼠,经融合、筛选和克隆化得到可稳定分泌抗ZEN单克隆抗体的杂交瘤细胞株ZEN—lC6。zEN一lC6属IgG1,纯化腹水抗体效价为10-5,与5种衍生物的交叉反应系数为0.16~1.20%。用ZEN一1C6建立了检测食品(玉米、小麦、大米)中玉米赤霉烯酮的CIEIA法。该法检测纯毒素的线性范围为5~1000ng/ml,最低检出浓度为0.1ng/ml,平均回收率为84.0~105.5%。用该法测定了81份样品,均有ZEN毒素检出。 相似文献
88.
玉米赤霉烯酮(zearalenone, ZEN)是Stob等于1962年首先从玉米赤霉菌培养物中分离出的次生代谢产物,它具有动物雌性激素的作用,也能促进某些真菌形成子实体,被认为是真菌的一种性激素,80年代初发现亦存在于高等植物体内。多年的研究结果表明,ZEN与植物的许多发育过程,包括春化作用、光周期诱导以及授粉受精过程均有密切的关系,可能ZEN参与了小麦成花诱导过程的调控,但其调控机制不明。为进一步研究小麦春化过程中茎尖细胞超微结构的变化与ZEN的相关性,我们以春化过程中的冬小麦幼芽为材料,对茎尖细胞超微结构以及与之相应的ZEN含量变化进行了分析。 相似文献
89.
小麦开花及籽粒形成过程中玉米赤霉烯酮含量的变化(简报) 总被引:1,自引:0,他引:1
冬小麦品种燕大1817麦穗各部位小穗内源玉米赤霉烯酮含量随着发育进程而上升,开花当天达到最高值,中部高于基部,基部高于顶部,与各部位小稳籽粒的最终粒重顺序一致。各部位小花在开花前及开花当日,雄蕊中内源玉米赤霉烯酮含量总是高于雌蕊。在籽粒生长过程中,籽粒内源玉米赤霉烯酮含量迅速下降。 相似文献
90.