稀土离子对烟草RuBPcase的激活作用及EXFAS研究

研究了稀土离子（Ｌｎ３ ＋） 对烟草（Ｎｉｃｏｔｉａｎａ ｔａｂａｃｕｍ）１ ,５ － 二磷酸核酮糖羧化酶（ＲｕＢＰｃａｓｅ）活力的影响。结果表明,在该酶的反应体系中,用Ｌｎ３ ＋ 替代Ｍｇ２ ＋ ,烟草ＲｕＢＰｃａｓｅ 的活力随Ｌｎ３ ＋ 浓度的变化曲线呈双相效应, 即在高浓度时, Ｌｎ３ ＋ 抑制该酶活性; 低浓度的Ｌｎ３ ＋ 提高ＲｕＢＰｃａｓｅ 活性。其活化效应为轻稀土离子大于重稀土离子,但Ｌｎ３ ＋ 的活化效应低于Ｍｇ２ ＋ 。在有Ｍｇ２ ＋ 的反应体系中,Ｌｎ３ ＋ 在低浓度时也有提高ＲｕＢＰｃａｓｅ 活性的能力,提高幅度较低;而高浓度的Ｌｎ３ ＋ 显著地抑制酶活性。进一步对ＲｕＢＰｃａｓｅ － Ｌａ 二元复合物的ＥＸＦＡＳ 研究,证实Ｌａ３ ＋ 与ＲｕＢＰｃａｓｅ 氨基酸残基的Ｏ 原子键合,键长为２ ．５１?;Ｌａ３ ＋ 还与Ｓ 原子结合。最后对Ｌｎ３ ＋ 和ＲｕＢＰｃａｓｅ 相互作用的分子机制进行讨论     

镧对烟草愈伤组织和油菜幼根钙含量的影响

ＭＳ培养基中添加镧（Ｌａ）（０ ．０１ ～０ ．１０ｍ ｍｏｌ·Ｌ－ １） 培养烟草愈伤组织,其总Ｃａ２ ＋ 及原生质体Ｃａ２ ＋ 含量明显比对照（ 不加Ｌａ） 低;长时间（ 继代培养３０ｄ） 较短时间培养（ 悬浮培养２４ｈ） 低．低浓度（０ ．０１ ～０ ．０５１ｍｏｌ·Ｌ－ １）Ｌａ３ ＋ 使细胞壁中Ｃａ２ ＋ 含量高于对照并随浓度提高而增加,高浓度（０ ．１０１ｍｏｌ·Ｌ－ １） 则减少．与Ｃｅ２ ＋ 相比较,Ｌａ３ ＋ 的排Ｃａ２ ＋ 作用稍弱于Ｃｅ３ ＋ ．以不同浓度Ｌａ（ＮＯ３）３ 溶液浸种,油菜幼根总Ｃａ２ ＋ 及原生质体中Ｃａ２ ＋ 含量变化与上述类似．Ｌａ３ ＋ 使烟草愈伤组织褐化明显,生长量比对照低．     

烟草—TMV相互作用中质膜NADPH氧化酶的组装

比较 Ｎ Ｎ 烟草（与烟草花叶病毒（ Ｔ Ｍ Ｖ）发生非亲和相互作用）和普通烟草 ３００２ 品种（与 Ｔ Ｍ Ｖ 发生亲和相互作用）在烟草— Ｔ Ｍ Ｖ 的相互作用中质膜 Ｎ Ａ Ｄ Ｐ Ｈ 氧化酶的组装激活、产生活性氧的差异．用两相法制备密闭的正向型质膜（ Ｐ Ｍ）囊泡,以 Ｓ Ｏ Ｄ 敏感的 Ｎ Ａ Ｄ Ｐ Ｈ 依赖的 Ｃｙｔ ｃ 的还原表示 Ｎ Ａ Ｄ Ｐ Ｈ 氧化酶的活性,用人类噬中性白细胞 Ｎ Ａ Ｄ Ｐ Ｈ 氧化酶亚基 ｐ４７ ｐｈｏｘ 的抗体对烟草叶片蛋白进行免疫学检测．结果显示在两种烟草叶片胞质中均存在与 ｐ４７ ｐｈｏｘ 亚基的抗体发生免疫交叉反应的相同分子量的蛋白,该蛋白在 Ｔ Ｍ Ｖ 侵染 Ｎ Ｎ 基因烟草后可向质膜发生转移,且伴随有氧化酶活性的升高．而对于普通烟草则无氧化酶膜组分和酶活性的明显变化．以上结果表明,烟草叶片质膜上存在与哺乳动物 Ｎ Ａ Ｄ Ｐ Ｈ 氧化酶相类似的氧化酶,它的组装和激活可能是烟草— Ｔ Ｍ Ｖ 非亲和相互作用早期活性氧的主要来源．     

Phytophthora palmi分泌的10.6kD蛋白激发烟草的过敏反应

从疫霉菌Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ ｐａｌｍｉｖｏｒａ Ｂｕｔｌｅｒ的培养滤液中分离出分子量为１０．６ｋＤ的不含糖基的耐热蛋白．这种１０．６ｋ蛋白能诱导烟草（Ｎｉｃｏｔｉａｎａ ｔａｂａｃｕｍ Ｌ．）叶片发生过敏性坏死反应。而疫霉菌另一种Ｐ．ｍｅｌｏｎｉｓ Ｋａｔｓｕｒａ的培养滤液中不含这种类似蛋白,不能诱导烟草叶片发生过敏反应。利用共聚焦激光扫描显微镜,以荧光探剂ＦＤＡ（ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｉｎ ｄ     

烟草水浸提液对葡萄根瘤蚜侵染危害的控制效应

【目的】检疫害虫葡萄根瘤蚜Daktulosphaira vitifoliae已经在我国多个地区葡萄园发现为害, 直接影响葡萄生长; 前期实验发现烟草水浸提液可有效控制离体根上根瘤蚜的存活率, 本研究进一步开展盆栽验证, 探讨烟草水浸提液对葡萄根瘤蚜侵染的控制效应及葡萄植株生长抑制的缓解作用。【方法】以两年生温室盆栽‘巨峰’自根苗为实验材料, 接种根瘤蚜虫卵35 d后进行烟草水浸提液处理, 处理后测定供试植株的根结数、生长量、根系活力、叶片光合速率及叶绿素荧光等指标。【结果】20 mg/mL和50 mg/mL的烟草水浸提液对根瘤蚜均有一定程度的抑制作用, 施药21 d后, 葡萄根部的新增根结数分别比侵染对照下降了42.9%和52.8%。烟草水浸提液处理还在一定程度上缓解了根瘤蚜侵染对植株的光合能力和荧光的抑制作用。20 mg/mL和50 mg/mL烟草水浸提液处理的株高分别比侵染对照提高了57.1%和7.7%; 根瘤蚜侵染降低了土壤中真菌、细菌和放线菌的数量, 烟草水浸提液处理进一步降低了真菌和放线菌的数量, 降低了由微生物带来的次生侵染几率。【结论】烟草水浸提液对葡萄根瘤蚜的侵染具有控制效果, 并可对葡萄根瘤蚜侵染已造成的寄主危害有一定的缓解作用。     

江蓠琼胶酯组分的制备及其抗病毒活性

以20.0 g江蓠琼脂粉为原料,经DEAE-纤维素柱层析制得琼胶酯0.46 g,产率为2.30%。抑菌圈法测定表明,琼胶酯样品对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌无抗菌作用;采用半叶枯斑法测定,表明琼胶酯样品对烟草花叶病毒具明显的钝化作用,琼胶酯样品浓度0.05～2.0 mg·mL-1对烟草花叶病毒的抑制率为37.02%～81.51%,呈现出显著的浓度剂量效应。研究首次报道海洋红藻中的琼胶酯组分对植物病毒的抑制作用,对拓宽琼脂糖制备过程产生的副产物琼胶酯组分的用途有积极意义。     

盐胁迫下烟草愈伤组织内源活性氧及乙烯的产生与交替途径发生,？…

This paper reported firstly the dynamic changes of the alternative pathway and the cytochrome pathway in tobacco callus under different concentration of salt. The production rate of endogenous ethylene, the contents of active oxygen species (O2-., .OH and H2O2) and the activities of related enzyme (SOD and CAT) were also investigated simultaneously. The results indicated that the actual operation of the alternative pathway (rho Valt) increased gradually and reached the maxima at 0.75% salt concentration, then declined, while the capacity of the alternative pathway (Valt) didn't exhibit the same change pattern with rho Valt and the cytochrome pathway (rho' Vcyt) changed contrary to rho Valt. At the same time, H2O2 and O2-. accumulated rapidly and reached their peak value at about 0.5% and 0.75% salt concentration respectively, while the content of .OH increased consistently. The production rate of endogenous ethylene increased rapidly and reached its maxima at about 0.5% salt concentration. These data demonstrated that changes of Valt in tobacco callus were associated with a parallel production of H2O2 and endogenous ethylene and a opposite production of .OH, while rho Valt changed parally with the production of O2-.. On the basis of above results, it was deduced that the changes of the development and operation of the alternative pathway in tobacco callus under salt stress might be correlated with the production of endogenous ethylene and the active oxygen species. The possible participation of the alternative pathway in response to salt stress was also discussed.     

转金属硫蛋白突变体αα的烟草具有较高的重金属抗性

金属硫蛋白（ＭＴ）有α、β两个结构域,其中α结构域优先结合Ｃｄ＾２＋、Ｈｇ＾２＋以α结构域代替β结构域而得到的αα突变体在大肠杆菌构建及表达后,体外实验证明其具有同天然ＭＴ相似的稳定性,但结合重金属的能力稍强于天然ＭＴ。将αα突变体转入植物表达载体,以ＣａＭＶ３５Ｓ为启动子,利用根癌土壤杆菌（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｍｅｆａｃｉｅｎｓ（Ｓｍｉｔｈ ｅｔ Ｔｏｗｎｓｅｎｄ）Ｃｏｎｎ）介导的叶     

转石蒜凝集素基因烟草的抗蚜虫性

利用农杆菌介导法将质粒pBILRA转化烟草(Nicotianatabacum L.),该质粒含有由花椰菜花叶病毒35S启动子(CaMV35S)引导的筛选基因新霉素磷酸转移酶基因(nptⅡ)及石蒜凝集素基因(lra).通过卡那霉素筛选获得了25株独立转基因烟草植株.Western blot分析表明,石蒜凝集素蛋白在不同转基因植株中表达量不同.对转基因T1代植株的遗传分析表明,lra基因在大多数独立转基因植株后代中以孟德尔3:1的分离比方式遗传.抗虫试验表明,表达较高水平石蒜凝集素蛋白的转基因烟草对桃蚜种群的生长具有明显的抑制作用.首次报道了表达石蒜凝集素基因的烟草对蚜虫具有抗性.石蒜凝集素基因可用于植物抗虫基因工程研究及应用.     

基于植物重组蛋白产量提高的研究进展

重组蛋白为疾病治疗提供了新手段,同时创造了可观的经济效益。利用经济作物(主要是烟草)、谷类作物、豆科作物和蔬菜作物生产具有药用价值的重组蛋白是“分子农业”最热门的研究内容。尽管许多重组蛋白已在植物中表达,但只有一小部分已成功投入使用。为了极大地克服限制植物生产重组蛋白发展的问题,研究人员改进表达系统以增加重组蛋白的产量。本文从分析植物产生重组蛋白产量低和/或生物活性低等问题入手,综述了近些年来解决这些问题的优化策略,同时提出了提高植物生产重组蛋白产量的研究方向。