一种百合甾体皂苷纯度及糖链结构核磁共振法分析

采用多种NMR分析技术,首次对百合甾体皂苷(25R,26R)-26-甲氧基螺甾烷-5-烯-3β-α-L-鼠李糖-(1→2)-[β-D-葡萄糖-(1→6)]-β-D-葡萄糖苷的1H和13C NMR信号进行了全归属,特别是应用选择性的1D TOCSY和1D NOESY核磁共振分析技术,对该化合物1中的氢谱信号严重重叠的糖链进行了详细的分析,提出了一套对甾体皂苷糖链信号进行全归属的核磁共振法.在确认其结构的基础上,建立了核磁共振法(1H NMR)测定该化合物1的纯度,给出了完整的实验条件,线性回归系数为0.9998,重复性实验RSD为0.58％,稳定性实验RSD为0.24％,操作简单、快速准确,且不需要其它对照品,是中药化学对照品纯度研究的一个有益补充.     

经低温贮藏的兰州百合种球种植后的鳞茎生长过程中GA3和ABA含量变化

6℃下贮藏67和101d的兰州百合种球种植后,于花蕾伸出顶端2-3cm时将其摘除,以后定期取样,检测鳞茎膨大成熟过程中GA3和ABA含量的结果表明：6℃下处理101d的母鳞茎中GA3含量先上升后下降,而处理67d的则相反;新鳞茎中GA3含量呈升高趋势,处理101d的含量高于处理67d的。母鳞茎中ABA含量先下降后上升,处理67d的高于处理101d的,新鳞茎中则相反。母鳞茎中GA3／ABA比值先升高后下降,处理101d的高于处理67d的;新鳞茎中则显著下降。据此认为,在百合鳞茎膨大成熟过程中,GA3和ABA之间的含量和作用并不全是互为消长的关系。     

麝香百合LLGLO1基因的克隆和表达

用RACE方法克隆的麝香百合花发育的GLOBOSA（GLO）类B功能基因LLGLO1,与其他多种单子叶植物的GLO类基因高度同源,且C区具有典型的PI结构基序。通过RT—PCR检测,百合不同组织中的LLGLO1基因表达模式与郁金香的GLO类基因相似。即主要集中在百合第一、二、三轮花器官中表达,心皮和茎中有微量表达,而且随着心皮的成熟,其在心皮中的表达量逐渐增加,但在百合叶片中则未检测到LLGLO1的表达,因此认为LLGLO1在百合花器官中呈特异性表达。LLGLO1在百合第一轮花器官中的表达支持了van Tunen对ABC模型的修正。     

宜昌百合根尖染色体C-带分析

利用Giemsa C-带方法对宜昌百合（Lilium leucanthum(Baker) Baker）进行研究。结果表明：宜昌百合（L. leucanthum）的染色体数目为2n＝2x=24,单套染色体的条带总数目为21条。其带型公式为：2n＝24＝6C+2CI+2I+2CI⁺+2CI⁺+4I⁺+2I⁺+2T⁺+2I+S。宜昌百合（L. leucanthum）每条染色体上都显示出显著的特征带,且带纹的深浅差异明显。宜昌百合（L. leucanthum）的强带主要集中在着丝点及附近区域。通过Giemsa C-带方法可以将宜昌百合（L. leucanthum）的每条染色体区分开。     

毛百合根尖染色体Giemsa C-带分析

本研究利用Giemsa C-带方法对毛百合(Lilium dahuricum Ker-Gawl)根尖染色体进行了分析。研究结果表明毛百合试管苗的染色体倍性变异丰富,染色体倍性变异包括二倍体(2n=2×=24)、三倍体(2n=3×=36)、四倍体(2n=4×=48)到六倍体(2n=6×=72)。对二倍体毛百合的C-带结果进行分析,其带型公式为:2n=2×=24=2CI++2CI+T+T++6I+2I++2I++2I+T++2I+T++2I+T++2T++2T+。每条染色体上都显示出显著的特征带,而且带纹的深浅差异明显。强带主要集中在长短臂上。因此,GiemsaC-带方法可以将毛百合(L.dahuricum)的每条染色体区分开。     

RT-PCR 方法同步检测兰州百合(Lilium davidii var. unicolor )两种主要病毒

建立并优化了以18S rRNA为内参照的特异性检测兰州百合（Lilium davidii var.unicolor）两种主要病毒：黄瓜花叶病毒（Cucumber mosaic virus,CMV）和百合无症病毒（Lily symptomless virus,LSV）的三重RT-PCR体系。结果表明,52.5°C的退火温度、0.025 U/μL的Taq DNA聚合酶、0.6 mmol/L的dNTP浓度、4 mmol/L的Mg2＋浓度、0.4μmol/L的各引物浓度以及30个循环等是三重PCR体系扩增的最佳条件;同时用该优化体系检测了兰州百合不同取样部位的病毒差异,发现LSV在不同取样部位的特异扩增条带的强度比较一致,而CMV差距相对较大,外鳞片CMV相对含量在整个感病植株中最高。为兰州百合主要病毒检测、脱毒组培快繁提供了技术支撑。     

兰州百合鳞茎发育及低温解除休眠过程中内源激素的变化

以兰州百合为试材,研究了鳞茎发育过程中以及2、6、10℃条件下保湿贮藏101 d内母鳞茎与新鳞茎中内源激素的变化。结果表明：鳞茎发育过程中内源ABA含量以及母鳞茎的GA₃与ZR含量增加,而内源IAA含量以及新鳞茎的GA₃与ZR含量下降。低温贮藏期间,母鳞茎与新鳞茎的GA₃、IAA含量均有升高过程,而ABA含量呈下降趋势;新鳞茎的ZR含量呈下降趋势,母鳞茎的ZR含量也有升高过程。低温处理初期的34 d内,内源激素变化最为显著。不同贮藏温度相比较,ABA含量差异不大,GA₃含量随温度升高而下降。在富含淀粉的新鳞茎中,GA₃和ABA表现出极显著的负相关关系,而在淀粉含量较低的母鳞茎中GA₃和ABA无相关性。通径分析结果表明,母鳞茎与新鳞茎的物质代谢机制不同,母鳞茎的物质变化受内源GA₃的调控,新鳞茎主要是ABA作用的结果。     

百合花药壁层的发育及组织化学研究

对生长在陕西留坝的百合的花药壁层发育过程,特别是绒毡层的发育做了形态学观察。其结果是：百合花药壁层的发育方式为基本型。花药绒毡层属腺质绒毡层类型。在单细胞花粉阶段后期,部分花粉粒壁一侧凹陷时,绒毡层细胞内切向面上出现乌氏体。随着发育阶段的推移,乌氏体的数量有所增加。在光学显微镜下观察：每个乌氏体只有一个乌氏体芯。在乌氏体出现时,也可观察到花粉外壁外层的出现。到二细胞花粉时,花药开裂之前,绒毡层细胞     

兰州百合生殖器官中睾酮含量的变化

用直接竞争酶联免疫吸附分析法检测了兰州百合（ＬｉｌｉｕｍｄａｎｄｉｉＤｕｃｈ．）花粉、雄蕊、雌蕊及花瓣中甾类激素──睾酮的含量。雄蕊中睾酮的含量随发育进程上升,开花当天达到最高值。雌蕊和花瓣中的睾酮含量低,而且不伴随花的发育进程变化。生殖器官中睾酮含量以成熟花粉为最高。无论蕾期授粉（亲和）或自花授粉（不亲和）与不授粉的对照相比,雌蕊的睾酮含量无显著差别。百合花粉水合后睾酮含量略有下降。花粉在体外萌发过程中,花粉管中的睾酮含量随花粉管的生长而急剧下降,这时萌发介质中只出现极微量的睾酮,而且在整个萌发时期无明显变化。推测睾酮参与雄配子体的发育和成熟,并与花粉的萌发有一定关系,但无迹象表明与受精的选择性有关。     

百合叶片愈伤组织的诱导和植株再生

植物名称:百合(Lilium concolor)。材料类别:实生苗叶片切段。将百合种子(来源于日本TAKII种子公司)用水浸泡1d,经70％乙醇处理30s,0.1％升汞溶液灭菌15min,用无菌水淋洗5次后接种于MS培养基上。培养温度25±2℃,光周期12h光照/12h黑暗,光照度1500～2000lx。培养1月后种子萌发,40d后无菌苗高8～10cm,线形叶片宽度2～3mm,叶片淡绿色,于无菌条件下将叶片