渗透胁迫下脱水蛋白DHN1在猕猴桃细胞中表达及亚细胞分布的动态变化

以绿色荧光蛋白(GFP)为报告分子, 通过构建DHN1-mGFP4融合蛋白表达载体, 研究了渗透胁迫条件下脱水蛋白DHN1的表达及其亚细胞分布的动态变化. 采用PCR方法在脱水蛋白基因dhn1两端引入XbaⅠ和BamHⅠ限制性内切酶位点, 克隆到质粒pBIN-35S mGFP4, 构建DHN1-mGFP4融合蛋白表达载体, 并采用基因枪转化猕猴桃(A. delicisoa)悬浮细胞. 培养10 h后观察到高效表达的GFP绿色荧光, 绿色荧光只出现在细胞核内. 提高培养介质渗透势后, 可以诱导脱水蛋白向细胞质分布(主要集中在质膜周围), 并且增加介质渗透势可以明显缩短细胞质出现绿色荧光的时间. 蛋白合成抑制剂环己亚胺能够抑制细胞质绿色荧光的出现, 暗示细胞质出现的脱水蛋白是诱导产生的结果. ABA可以明显促进细胞质绿色荧光的出现, 并且随着介质渗透势的升高迅速缩短细胞质绿色荧光的出现时间.     

菜心和水稻绿叶中不同等电点的乙醇酸氧化酶

The proteins with glycolate oxidase activity from B.parachinensis Bailey and rice( Oryza sativa )green leaves were prepared respectively.From the second protein peak on DEAE\|Cellulose column,two glycolate oxidases,expressed as B.parachinensis Bailey GO Ⅲ(specific activity natove 13 2 U·mg -1 ·min -1 )and rice GOⅢ(specific activity 8 8 U·mg -1 ·min -1 ),could not migrate anywhere in 4%～20% native\|PAGE under a pH8.3 buffer system.GOⅢ's p I was about pH8.3. The protein containing B.parachinensis Bailey GOⅢ showed 67±2,43±2,and 38±2 kD in SDS PAGE,band 43±2 kD was the subunit of B.parachinensis Bailey GOⅢ.From the two proteins above,another group of glycolate oxidases,expressed as B.parachinensis Beiley GOⅠ(specific activity 5 U·mg -1 ·min -1 )and rice GOⅠ(specific activity 1 2 U·mg -1 ·min -1 ),showed only one 43±2 kD band in SDS\|PAGE,and was purified on the Sepharose\|6B column which migrated towards anode in the same native\|PAGE showing the M r about 420 kD,or 460 kD and 260 kD respectively.GOⅠ's p I was smaller than pH8.3.Antibody against B.parachinensis Bailey GOⅠ was prepared and its efficacy was about 1/1600 in ELISA.By native\|PAGE,Western blot and rocket immunoelectrophoresis,the third group of glycolate oxidases,expressed as B.parachinensis Bailey GOⅡ and rice G0Ⅱ,were confirmed in crude protein of green leaves and migrated towards cathode under the same native\|PAGE,so GOⅡ's p I was higher than pH8.3.The M r of B.parachinensis Bailey GOⅡ was about 669 kD determined by native\|PAGE Western blot.Rice GOⅠ,rice GOⅢ and rice GOⅡ showed different quantitation under different physiological conditions.Rice GOⅡ could be induced by glycolate.     

小麦阿拉伯木聚糖的益生功能及对肠道微生态的调节

病原体的耐药性日渐增大,替代抗生素的益生元成为近年来研究的热点问题。小麦阿拉伯木聚糖（AX）及水解产物阿拉伯低聚木糖（AXOS）作为一种新型益生元,对人和动物肠道益生菌有特异性增殖效果。此外,与菊粉等益生元相比,降解后的小麦AX显著提高小鼠结肠和盲肠短链脂肪酸的含量及其抗肿瘤免疫活性。最新研究表明,添加GH11木聚糖酶（50mg EP/kg）能够溶解和降解麦麸AX,并产生可通过盲肠微生物群发酵的低平均聚合度（avDP值为4~8）的AXOS,丁酸水平增加2mmol（P<0.05）,产丁酸的细菌属柔嫩梭菌和肠单胞球菌显著增加,而拟杆菌的水平显著降低,导致微生物群移位并对体外跨上皮耐药性有益。本文主要介绍近年来关于小麦AX、AXOS益生功能及对肠道微生态的研究,为小麦产品及饲粮的有效利用与开发提供科学依据。     

二噁的主要来源、排放量及相关环境和健康标准

二(口恶)(口英)类化合物是一类氯代三环芳烃类化合物(PCDD/F),二(口恶)(口英)具有致癌性和类似生物激素的作用,极小剂量的二(口恶)(口英)就可能造成激素分泌的紊乱,影响青春期发育和引起     

中国拉土蛛属一新种(蜘蛛目:(虫窒)(虫当)科)

记述了中国湖南省(虫窒)(虫当)科Ctenizidae拉土蛛属Latouchia 1新种:湖南拉土蛛 Latouchia hunanensis sp. nov..新种与Latouchia cornuta Song, Qiu et Zhang,1983相似,但两者的纳精囊形状明显不同.新种以模式产地而命名.模式标本保存于湖南师范大学生命科学学院.文中量度单位为mm.     

寻找微生物基因组中适合高通量药物筛选靶点的功能未知基因

开发有新作用机制的抗生素迫在眉睫。刚发现青霉素时 ,几乎所有的金黄色链球菌都是药物敏感型 ;异烟肼和链霉素刚用来治疗结核病时 ,效果几乎 1 0 0 % ,但 90年代中期 ,几乎 90 %的金黄色链球菌和 50 %以上的结核分枝杆菌都耐药 ,耐多药菌株也日益普遍。现有抗生素的作用机制比较单一 ,是细菌产生耐药性的一个主要原因。解决日益严重的细菌耐药性、交叉耐药性、毒性和难以根除条件致病菌感染最有效的途径是开发新作用机制的抗生素。1 .微生物基因组及其功能未知基因中蕴涵了开发新型抗生素的大量有用靶点抗生素开发首先往往需要鉴定靶点。靶…     

猪Ⅱ型圆环病毒豫A株的全基因组克隆与序列分析

参照国外发表的猪Ⅱ型圆环病毒(porcine circovirus type 2,PCV-2)全基因组序列,设计一对PCV-2特异性引物,用该室分离的PCV-2豫A株感染PK-15细胞,从中提取PCV-2复制型基因组DNA,并以之为模板进行PCR扩增.回收PCR产物,构建重组测序质粒T-PCV-2.测序结果表明,猪Ⅱ型圆环病毒豫A株的全基因组为1767bp,与GenBank收录的PCV-2国外分离株核苷酸的同源性可高达97%.序列分析表明,复制型豫A株的基因组包含10个读码框架,其中ORF1、ORF2是其两个最主要的读码框架,分别编码314、234个氨基酸.豫A株和PCV-1间的ORF1、ORF2的氨基酸序列同源性分别为85%、66%,与其它PCV-2毒株间的ORF1氨基酸同源性均在98%以上,而ORF2的氨基酸同源性为92%～97%.     

野鸦椿的植物化学成分研究

从野鸦椿 (EuscaphisjaponecaKantiz)枝叶的甲醇提取物分离得到 6个化合物 ,通过波谱分析鉴定为 5 ,7 dihydroxy 2 methyl benzopyran 4 one(Ⅰ ) ,3,4 ,5 trihydroxy benzoicacidmethylester(Ⅱ ) ,3,7 dihydroxy 5 octanolide(Ⅲ ) ,methyl 5 ,7 dihydroxy 2 (Z) octenoate(Ⅳ ) ,7 hydroxy 2 octen 5 olide(Ⅴ )和vomifoliol(Ⅵ )。     

农药的发展与人类的健康

农药与人类的健康密切相关,它是造成人类疾病增多的原因之一,也是人们谈论的热点话题之一,人们往往把“农药”视为“毒药”。本文通过介绍常用农药给环境和人类健康造成的危害,提出在“白色农业”的发展下,应大力开发和使用微生物农药,逐步消除农药产生的公害问题,以纠正人们对农药的片面认识。     

柽柳根际一株盐单胞菌Bachu 26的分离、鉴定及其盐胁迫下的促生作用研究

盐渍化是世界性的土壤问题,植物促生根际细菌(plant growth-promoting rhizobacteria,PGPR)在盐碱地改良和促进植物生长方面具有独特优势。柽柳是典型的盐生植物,筛选其根际微生物并研究其促生效果与促生机制,以此开发微生物菌肥,具有重要的应用价值。【目的】筛选耐盐碱植物柽柳的根际微生物,对其基本特性、耐盐碱能力、促生功能及促生效果进行评估。【方法】从新疆巴楚境内野生柽柳根际土壤中筛选出一株耐盐碱细菌菌株Bachu 26;通过形态学观察、生理生化特性测定和16S rRNA基因序列分析,对该菌株进行鉴定;利用不同盐浓度(0%–20%)和不同pH(7.0–13.0),对菌株Bachu 26的耐盐耐碱能力进行测定;采用多种功能鉴定培养基测定其促生功能,并对生长素吲哚乙酸(indole-3-acetic acid, IAA)进行定量测定;通过二分格培养皿实验验证菌株产生挥发性酸性物质的能力;在普通培养皿上将拟南芥幼苗与菌株Bachu 26共培养,分析菌株对拟南芥幼苗的促生作用;在二分格培养皿上将拟南芥与Bachu 26隔离培养,分析菌株产生的挥发性酸性物质对拟南芥幼...