蛇毒纤溶酶原激活剂TSV-PA在昆虫细胞中的表达

将蛇毒TSV PA基因插入昆虫杆状病毒供体质粒pFastBacHTa中 ,在粉纹夜蛾Tn 5B1 4细胞中进行表达。SDS PAGE分析结果表明 ,表达产物为分子量 33kD的TSV PA蛋白 ,Western印迹分析也证实了此结果。酶活力测定结果表明 ,昆虫细胞表达的TSV PA蛋白具有较高活性     

溶氧水平对红豆杉细胞悬浮培养的影响研究

紫杉醇 (Ｔａｘｏｌ)是源自红豆杉提取物的一种高度衍生化的二萜类化合物 ,临床实验结果表明紫杉醇对于卵巢癌、乳腺癌、胃肠道癌等具有明显的抗肿瘤活性[1] ,因而受到世界各国的广泛关注 ,并已被美国食品与药品管理局 (ＦＤＡ)批准用于卵巢癌与乳腺癌的治疗[2 ] 。到目前为止紫杉醇仍然主要从树皮中提取 ,但由于红豆杉生长缓慢 ,天然资源非常有限 ,加快其替代来源的研究势在必行。利用植物细胞悬浮培养生产紫杉醇作为一种可行的选择 ,近年来取得了较大的进展[3 ,4 ] 。本文研究了摇瓶及 2 0 Ｌ反应器培养过程的溶氧水平对细胞生长及紫杉醇…     

小麦族四个属模式种的醇溶蛋白分析

利用酸性聚丙烯酰胺凝胶电泳 (APAGE)对小麦族披碱草属、鹅观草属、猬草属和仲彬草属 4个属的模式种进行了醇溶蛋白电泳分析 ,结果表明 :(1 ) 4个模式种具有明显的醇溶蛋白遗传多样性 ,其种间醇溶蛋白多态性高达 92 .3 % ;(2 ) Elymus sibiricus和 H ystrix patula具有相似的醇溶蛋白带型 ,而 Roegneria caucasica和Kengyilia gobicola的带型基本相似 ,其醇溶蛋白图谱能够反映一定的系统关系 ;(3 )不同收集地的 E. sibiricus材料间也存在明显的醇溶蛋白遗传差异 ,新疆的 E. sibiricus具有较丰富的醇溶蛋白带纹 ,而甘肃的 E. sibiricus的醇溶蛋白带纹较少。     

新城疫病毒抗肿瘤研究进展

新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)为副黏病毒科,禽腮腺炎病毒属(Avulavirus)的禽副黏病毒Ⅰ型(APMV-Ⅰ),可对250多种禽类造成致死性感染,给世界范围内的家禽养殖造成了巨大损失。目前,研究发现NDV对人肿瘤细胞具有溶瘤作用,能够选择性地在癌细胞中复制。并且一些研究已经进行了人体临床试验,取得了良好的效果。因此,新城疫病毒是肿瘤治疗的潜在治疗剂。文中就NDV结构蛋白与毒力的关系、NDV直接溶瘤作用、NDV为载体的肿瘤基因治疗、NDV抗肿瘤与自噬等进行了综述。     

大剂量氨甲环酸对全膝关节置换患者术后纤溶活性与炎症因子的影响

目的:探讨大剂量氨甲环酸对全膝关节置换患者术后纤溶活性与炎症因子的影响。方法:回顾性分析在我院行初次全膝关节置换术的180例患者,按照给药方式分为对照组、常规组、大剂量组,每组各60例。对照组患者直接给予生理盐水,常规组给予10 mg/kg氨甲环酸,大剂量组给予15 mg/kg氨甲环酸。比较三组术后总失血量、隐形失血量、术前与术后3天三组凝血功能(纤维蛋白原、凝血酶原时间、活化部分凝血活酶时间)、纤溶活性[纤维蛋白(原)降解产物(FDP)、D-二聚体]以及炎性因子[C-反应蛋白(CRP)、白介素-6(IL-6)]水平变化及术后2周血栓事件的发生情况。结果:大剂量组与常规组的总失血量与隐形失血量均明显低于对照组,大剂量组总失血量与隐形失血量均低于常规组(P0.05);三组患者纤维蛋白原、凝血酶原时间以及活化部分凝血活酶时间相比差异均无统计学意义(P0.05);术后3天,大剂量组和常规组FDP与D-二聚体、CRP、IL-6水平均显著低于对照组,且与常规组相比,大剂量组水平较低(P0.05);术后2周,三组肌间静脉血栓发生率比较均无显著差异(P0.05)。结论:在全膝关节置换术后使用氨甲环酸可进一步减少术后隐形失血量,且不会增加血栓事件的风险,且随着药物剂量的增加,其止血效果越强,同时具有更为显著的抗纤溶作用与抗炎效果。     

蚯蚓纤溶酶的分离纯化及部分序列的测定

以新鲜蚯蚓为原料,经过保温抽提、乙醇沉淀、DEAE-SepharoseFastFlow离子交换层析、Lysine-Sepharose4B亲和层析以及SDS-PAGE制备电泳等纯化步聚,得到一种纯度达95％以上的蚯蚓纤溶酶．该酶具有强烈的溶解纤维蛋白的作用及蛋白酶活性,平板法测得其比活性为90OUK单位／毫克蛋白,TAME法测得其比活性为2500O单位／毫克蛋白．酶学性质研究表明其最适反应温度为65℃,最适反应PH值为8．5．该酶的分子量为33kD,等电点为pH3．5．还对该酶进行了氨基酸组成分析,并测定了其N端部分序列．     

蝮蛇抗栓酶对不稳定性心绞痛患者血中部分凝血及纤溶指标的影响

测定３８例不稳定性心绞痛（ＵＡＰ）患者血中纤维蛋白原（Ｆｇ）含量、组织型纤溶酶原激活物（ｔ－ＰＡ）活性、血管性假血友病因子（ｖＷＦ）活性和血小板聚集率水平（ＰＡｇＴ）并与２１名正常人对比。患者中１８例用蝮蛇抗栓酶治疗,２０例行常规治疗。结果显示：ＵＡＰ患者血中ＰＡＩ－１、ｖＷＦ以及ＰＡｇＴ水平明显增高,ｔ－ＰＡ水平明显降低;蝮蛇抗栓酶组治疗后血中Ｆｇ、ＰＡＩ－１、ＰＡｇＴ水平均明显下降,使ｔ－ＰＡ水平明显升高;常规治疗组治疗前后各项指标无明显变化。认为蝮蛇抗栓酶对ＵＡＰ有可靠疗效     

蚯蚓纤溶酶的分离纯化及部分序列的测定

以新鲜蚯蚓为原料,经过保温抽提、乙醇沉淀、ＤＥＡＥ－ＳｅｐｈａｒｏｓｅＦａｓｔＦｌｏｗ离子交换层析、Ｌｙｓｉｎｅ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ亲和层析以及ＳＤＳ－ＰＡＧＥ制备电泳等纯化步骤,得到一种纯度达９５％以上的蝗蚓纤溶酶,该酶具有强烈的溶解纤维蛋白折作用及蛋白酶活性,平板法测得其比活性为９００ＵＫ单位／毫克蛋白,ＴＡＭＥ法测得其比活性为２５０００单位／毫克蛋白,酶学性质研究表明其最适反应温度为６５     

人微小纤溶酶原基因在甲醇营养型酵母中的表达

用ＰＣＲ方法扩增人微小纤溶酶原（Ｍｉｃｒｏｐｌａｓｍｉｎｏｇｅｎ,ｍｐｌｇ）ｃＤＮＡ,与分泌型酵母表达载体ｐＨＩＬＤ８重组,构成受醇氧化酶基因（ＡＯＸ１）的启动子与转录终止区控制的酵母表达质粒,然后转化ＧＳ１１５酵母菌,经表型筛选、ＰＣＲ扩增筛选阳性克隆,然后以甲醇诱导表达,ｍｐｌｇ分泌至培液,以酪蛋白琼脂糖平板溶圈法、发色底物法检测,ｍｐｌｇ显示出纤溶活性。     

热水溶胡卢巴胶的流变性研究

主要对胡卢巴胶（热水溶部分）的流变性进行了研究。结果表明：浓度,剪切力,加热时间,pH,冻融等变化与胡卢巴胶的粘度有较大的关系。胡卢巴胶具有较高的粘度,当浓度达到1%时,其粘度为920mpa·s^-1,胡卢巴胶溶液为非牛屯流体;小于1h加热,可使其粘度增高。胡卢巴胶溶液在酸性和酸性溶液中较为稳定。冻融处理可使胡卢巴胶溶液粘度有较大幅度的提高,胡卢巴胶与卡拉胶有一定协效性,但其协效性较低。