新疆杨愈伤组织原生质体的游离与纯化

目的:以愈伤组织为材料,研究新疆杨原生质体的游离、纯化。方法:以新疆杨愈伤组织为材料,采用简单试验设计和方差分析方法,对新疆杨原生质体游离的影响因素进行研究,并利用二乙酸荧光素染色法观察原生质体活力。结果:适宜新疆杨愈伤组织原生质体游离的较适宜条件是:CPW+2.0%纤维素酶R-10+1.0%离析酶R-10+1.0%果胶酶Y-23+0.6 mol/L甘露醇,酶解温度27℃,酶解时间8 h。在此条件下,原生质体产量达8.5×106个/(g.FW),活力达83.6%。原生质体纯化可采用蔗糖等密度离心法,较适蔗糖浓度为30%。结论:研究筛选出的酶解因素组合与等密度离心条件较适宜新疆杨愈伤组织原生质体的游离和纯化。     

金花茶胚状体中游离氨基酸的含量及花氨酸、丝氨酸对胚状体发育的影响

本文报道金花茶Camellia chrysantha(HU)Tuyama胚状体培养中,具有正常产生次级胚能力的材料(第一类)和产生次胚能力差的材料(第二类)的游离氨基酸测定结果,以及脯氨酸、丝氨酸对胚状体发生的培养结果。所检出的氨基酸含量,第一类材料为第二类材料的1—5倍;且第二类材料中未能检出脯氨酸,苯丙氨和酪氨酸。在此基础上培养发现:脯氨酸和低浓度(50mmol、100mmol)的丝氨酸促进胚状体发生与鲜重增加,脯氨酸、丝氨酸和苯丙氨酸以50mmol混合使用效果最好,而且除色氨酸外,这些外加氨基酸对胚体形成频率、数目和鲜重的影响之间都有平行关系。     

大麦籽粒及花药愈伤组织的游离氨基酸含量分析

对同一基因型大麦花药愈伤组织与籽粒中的游离氨基酸含量尤其是赖氨酸含量之间的关系进行分析,结果表明,对同一基因型而言,愈伤组织及籽粒中的同一氨基酸含量高低具有相同趋势。同时着重分析了愈伤组织中游离脯氨酸的含量与绿苗分化的关系,结果表明游离脯氨酸含量高的愈伤组织,其绿苗分化率较高,说明脯氨酸对绿苗分化具有重要作用。966259的花药愈伤组织及籽粒中的游离氨基酸总含量及游离赖氨酸含量均最高。     

冷藏对米蛾卵液中游离氨基酸变化的影响

赤眼蜂的工厂化繁育常使用米蛾卵作为中间寄主卵,为了满足赤眼蜂生产的需要,需对米蛾卵进行冷藏,但冷藏米蛾卵影响赤眼蜂的生长发育。利用核磁共振技术(NMR)测定了新鲜米蛾卵(U)、新鲜杀胚米蛾卵(CK)、杀胚米蛾卵在4℃条件下冷藏15 d(N15)、30 d(N30)、45 d(N45)和60 d(N60)后,米蛾卵卵液游离氨基酸种类和含量的变化。结果共鉴定到24种游离氨基酸及其衍生物,包括昆虫发育必需的10种氨基酸。U和CK之间的游离氨基酸组分没有显著差异,N15、N30和N45游离氨基酸总量随冷藏时间的延长而显著升高,N60中的氨基酸总量与N45比较没有显著增加。对24种游离氨基酸及其衍生物的含量进行主成分分析,结果表明丙氨酸、谷氨酰胺、鸟氨酸、天冬氨酸、组氨酸、赖氨酸、丝氨酸、焦谷氨酸等8种氨基酸的含量随冷藏时间的增加而有着显著的变化,其中,丙氨酸变化幅度最为明显,随着冷藏时间的增加,含量从0.1624 mmol/L增加到8.6192 mmol/L;组氨酸在N30、N45和N60处理之间显著下降,从0.7553 mmol/L降低到0.2495 mmol/L。因此,冷藏会导致米蛾卵内游离氨基酸含量发生一定变化,这可能是冷藏米蛾卵影响赤眼蜂生长发育的重要原因之一。     

竹红菌乙素光敏作用对于小鼠肝癌细胞内游离钙浓度的影响

本文用Quin 2/AM荧光探针作为细胞内部钙离子指示剂,研究了竹红菌乙素光敏损伤后引起小鼠腹水肝癌细胞的钙离子浓度变化。实验结果表明,细胞内的钙离子浓度随着乙素光敏作用增强而上升。并且钙离子浓度的升高与细胞的存活率下降呈正比关系;用数种单线态氧淬灭剂(L-His,NaN_3);羟自由基清除剂(PABGA)观察了乙素光敏过程中产生的活性氧与细胞内的钙离子浓度增加相关。用膜去极化方法研究了细胞在光敏损伤过程中钙离子浓度变化与去极化的关系。     

先天性与后天性大鼠白内障晶体中游离氨基酸含量变化的研究

用药和的诱发大鼠先天性白内障动物模型,检测了晶体中１８种游离氨基酸含量,并与大鼠硒性和半乳糖性白内障晶体中ＦＦＡ含量进行了比较,发现：仔一代和仔二代先天性白内障晶体中各ＦＡＡ含量接近,先天性白内障晶体内,酪氨酸和羟脯氨酸含量明显高于正常对照组（Ｐ＞０．０５）;谷氨酸、甘氨酸等９种ＦＡＡ明显低于硒性白内障（Ｐ＜０．０５）;而酪氨酸高于半乳糖性白内障组,半胱氨酸等５种ＦＡＡ含量均低于半乳糖性白内障组。     

反相高效液相色谱法测定血浆游离氨基酸

本文报告了采用高效液相色谱法反相梯度洗脱,邻苯二甲醛和β-巯基乙醇柱前衍生化,荧光检测分血浆游离氨基酸。实验采用线性洗脱,在50分钟内可同时测定18种氨基酸,血浆样品的预处理简单,衍生化反应的时间仅需1分30秒,血浆样品的实际进样量少于1μl。本测定方法的精确度高,各个氨基酸保留时间的变异系数平均为0.89%±0.45%(SD),峰面积的变异系数平均为2.06%±1.76%(SD),各个氨基酸的浓度在15—150μmol/L的范围中,线性关系的相关系数平均为0.985±0.0305(SD)。准确性好,各个氨基酸的回收率平均为97.6%±5.1%(SD)。实验还讨论了氨基酸分离时溶液pH值、柱温、离心速度等因素对分析结果的影响。     

人体游离循环DNA的研究进展

游离循环DNA是一种细胞外游离状态的DNA, 在动植物及人的体液中都检测到了它的存在。对游离循环DNA的检测已经应用在疾病的监控、胎儿的产前诊断及肿瘤的研究中。文章介绍了循环DNA的生物学特征, 并对近年来游离循环DNA的研究和应用进展做了简单的回顾。     

癌肿与氨基酸代谢的研究

研究了癌肿与氨基酸代谢的关系。这些癌肿包括喉癌HepⅡ细胞 ,急性非淋巴细胞白血病和急性淋巴细胞白血病 ,结果表明 :( 1 )喉癌细胞株培养过程中亮氨酸、赖氨酸、丝氨酸、天冬酰胺、异亮氨酸、甘氨酸以及苏氨酸等水平明显降低 ,而色氨酸水平明显增加 ,说明喉癌细胞的生长繁殖必须依赖以上 7种氨基酸同时释放了色氨酸 ;( 2 )急性非淋巴细胞白血病 (ANLL)患者血浆中的谷氨酸、甘氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸等水平明显升高 ,而苏氨酸、组氨酸、丙氨酸等水平明显降低 ,这些结果与国际报道相一致 ;( 3)经治疗后 ,ANLL患者血浆中甘氨酸、色氨酸和苯丙氨酸等水平明显降低 ,而丙氨酸、组氨酸等水平明显升高 ,表明肿瘤细胞处在无氧代谢。患者经治疗后色氨酸和苯丙氨酸水平降低和组氨酸水平的升高对患者预后是有益的 ;( 4)急性淋巴细胞白血病患者血浆中苯丙氨酸、赖氨酸、色氨酸和酪氨酸水平提高 ,这些氨基酸能促进肿瘤生长 ,而门冬酰胺、谷氨酰胺以及天冬氨酸水平降低 ,说明这 3种氨基酸为肿瘤生长所必须。此外还发现ALL患者外周淋巴细胞中精氨酸水平增加 ,精氨酸对癌肿细胞有直接杀伤作用。     

Bacillus coagulans X3角蛋白酶的酶学性质及其应用研究

为了提高凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)X3角蛋白酶的水解效率,对其粗酶液的酶学性质及降解羽毛角蛋白的效果进行了研究。结果表明,粗酶液的最适反应温度为60℃,最适pH为7.0～8.0,在70～80℃时具有较好的热稳定性。金属离子中Ca²⁺、Mn²⁺对角蛋白酶活性起促进作用,Cu²⁺、Ni²⁺强烈抑制角蛋白酶活性,而Na⁺、Mg²⁺、Fe³⁺对酶活性无显著影响。化学试剂苯甲基磺酰氟(PMSF)、乙二胺四乙酸(EDTA)对酶活性有较强的抑制作用,β-巯基乙醇和二硫基苏糖醇(DTT)可显著提高酶活性,十二烷基磺酸钠(SDS)和二甲基亚砜(DMSO)对酶活性没有显著影响。优化条件下降解羽毛,产物中游离氨基酸的总量高达4.322 6 mg/mL,主要种类为缬氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸、谷氨酸。研究结果为菌株X3酶解角蛋白废弃物提供了技术支撑。