辅酶Q10,甘露醇及别嘌呤醇清除活性氧自由基的ESR研究

药物清除氧自由基的ESR研究近年来在国内已有报道,但以中药有效成分为多见,我们选择了在心脏直视手术时用于临床心肌保护的几种有效药物:辅酶Q_(10)甘露醇及别嘌呤醇,用ESR技术测定其清除活性氧自由基的作用,以了解它们防治心肌缺血再灌注损伤的机理。     

用终止剂改进超氧化物歧化酶邻苯三酚测活法

以二硫苏糖醇(DTT)或L-抗坏血酸(Vit C)为终止剂改进的经典邻苯三酚法测定超氧化物歧化酶(SOD)活性.反应体系:50mmol/L邻苯三酚,pH8.20,总体积9ml,25℃,加一滴DTT(100mmol/L)或Vit C(5%),约50μl,终止自氧化反应.终止后,反应体系的420nm光吸收在lh内保持恒定.终止剂法的邻苯三酚自氧化率及酶活测定灵敏度与经典法相近,一个酶活单位相当于纯SOD 100μg/L.     

银杏叶提取物对过氧化氢刺激下的血管内皮细胞的影响

目的:探讨银杏叶提取物对血管内皮细胞的保护作用及可能的保护机制。方法:进行血管内皮细胞培养。用过氧化氢(H2O2)处理血管内皮细胞建立细胞凋亡模型。将细胞分为四组:空白对照组、H2O2处理组、单独银杏叶提取物处理组、银杏叶提取物预处理组(提前2h给药后H2O2处理)。进行MTT检测细胞的相对活力、RT-PCR检测目的基因CHOP的表达、Western Blot分析目的蛋白CHOP的表达等。结果:与对照处理组比较,H2O2处理组细胞凋亡率、CHOPmRNA相对表达及CHOP蛋白表达量明显升高。与H2O2处理组比较,银杏叶提取物预处理组细胞凋亡指数、CHOPmRNA相对表达及CHOP蛋白表达量明显降低(P0.05)。结论:作为一种清除自由基、抗氧化、抗衰老药物,银杏叶提取物可能通过调节CHOP蛋白选择性地抑制过度的内质网应激来保护血管内皮细胞。     

水分胁迫下自由基清除剂对番木瓜的生理保护效应

用维他命C(Vc)、维他命E(VE)和苯甲酸钠等作为外源自由基清除剂在水分胁迫前1d预处理番木瓜幼苗,研究其对番木瓜的生理保护效应。结果表明,3种外源自由基清除剂预处理有效地降低了水分胁迫下番木瓜叶片细胞质膜透性、POD活性、MDA和H2O2含量的上升程度,并能延缓叶片叶绿素和可溶性蛋白质含量和SOD活性的降低。外源自由基清除剂通过有效清除H2O2降低膜脂过氧化程度,从而减轻水分胁迫对番木瓜引起的自由基伤害和提高番木瓜的抗旱能力。不同自由基清除剂预处理对番木瓜的抗旱保护效果存在差异,其中以Vc预处理的保护效果最好。     

染料木素、槲皮素及其化学修饰物清除自由基能力研究

分别采用Fenton反应.邻菲罗啉显色法、邻苯三酚自氧化法和紫外可见分光光度法,考察染料木素、槲皮素及其化学修饰物清除·OH、·O2-和DPPH自由基能力.结果显示,槲皮素铬配合物清除·OH、·O2-和DPPH自由基能力大大高于其母体槲皮素,同时,其稳定性和抗自氧化的能力亦得到提高;染料木素铬配合物清除·OH和·O2-自由基的能力高于其母体染料木素,其清除·OH自由基的能力提高最为显著;染料木素糖苷修饰物清除三种自由基能力与其母体相比无显著提高.因此,染料木素铬和槲皮素铬配合物是一类高活性、高稳定性自由基清除剂或与自由基相关疾病新药的候选物,值得进一步研究.     

氧自由基清除剂的应用

对筛选和研究氧自由基清除剂的方法和模型、已知的自由清除剂、具抗氧化作用的中草药与食物及开发中的微生物来源的自由基清除剂的研究现状和最新进展作了概述。     

药蒲公英(Taraxacum officinale Weber)耐1.5% NaCl变异体的筛选及特性分析

为提高药蒲公英的耐盐性, 用20~30 d大小的药蒲公英叶片诱导愈伤, 获得的愈伤以NaCl作为选择因子, 用直接筛选的方法, 每3周进行一次继代培养, 经3个月继代筛选获得了耐1.5% NaCl的药蒲公英愈伤组织, 将耐1.5% NaCl的药蒲公英愈伤组织接种在分化培养基上分化出芽, 之后将再生芽转接到生根培养基中进行生根培养, 经4个月得到了12株耐1.5% NaCl的药蒲公英再生植株。与野生型相比, 耐盐植株叶片宽大、叶柄粗短、叶表面覆盖白色细毛, 根粗壮较短, 花茎中部具2 cm左右的苞叶。RAPD(Random amplified polymorphic DNA , 随机扩增的多态性DNA)和SDS-PAGE检测表明, 耐盐植株与对照植株在DNA及蛋白水平上均存在明显差异。1.5% NaCl处理后, 与普通再生植株相比, 耐盐株系的抗氧化酶活性明显提高, 脯氨酸含量上升幅度更为显著, 而丙二醛(MDA)含量降低, 其主要药用成分黄酮的含量显著增加。这些结果说明耐盐植株的抗氧化防御能力明显增强。以上结果表明耐1.5% NaCl的药蒲公英再生植株为耐1.5% NaCl药蒲公英变异体, 这些耐盐变异体有望成为抗盐耐海水蔬菜家族的新成员。同时, 这些耐盐变异体植株比普通植株具有更高的医用商业价值。耐1.5% NaCl的药蒲公英再生变异体遗传稳定性的研究正在进行中。     

氧自由基清除剂治疗肾综合征出血热疗效观察

肾综合征出血热(HFRS)的发病机制复杂,病情多变,无特殊疗法,以综合治疗为主,我院在抗病毒、液体疗法等治疗的基础上加用抗氧自由基治疗HFRS取得了较好的疗效。现报告如下：     

抗白内障药物滴眼对亚硒酸钠性白内障的预防作用

 观察了三种化合物(抗氧化剂与自由基清除剂)对大鼠亚硒酸钠性白内障的滴眼预防作用。实验分为正常对照组、亚硒酸钠组及滴眼预防组。亚硒酸钠组及滴眼预防组系给12─13日龄的大鼠皮下注射亚硒酸钠,首次剂量为6μmol/kg体重,间日一次,逐次递增1μmol/kg体重,连续六次。预防组则为大鼠开眼后同时滴眼抗氧化剂与自由基清除剂。结果表明,三种化合物通过滴眼均能有效的防止亚硒酸钠性白内障的发生,白内障的发生率从95.8％降低至15％～43.5％。同时测定了各组晶状体中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、谷胱甘肽还原酶(GSSG-R)及谷胱甘肽硫转移酶(GSH-S)的活性,结果表明,凡注射硒的大鼠晶状体中GSH-Px及GSSG-R的活性均比正常晶状体的高,接受抗氧化剂与自由基清除剂预防的大鼠晶状体中这两种酶的活性比未接受预防的大鼠晶状体中的低。单独注射硒的大鼠晶状体中GSH-S的活性比正常晶状体的高。接受预防的大鼠晶状体中此酶的活性和正常晶状体无差异,但比单独注射硒的大鼠晶状体中的低。