费氏链霉菌HTP6分批发酵动力学

对费氏链霉菌HTP6产新霉素的分批发酵动力学进行了研究, 并建立了动力学模型。对数生长期最大比生长速率μm为0.0866 h-1, 产物合成期最大合成速率qp为1.1867×10-4 g/(mL×h)。对实验数据与模型模拟值进行拟合检验, 表现出很好的适用性, 实验平均相对偏差小于5%。表明该动力学模型对费氏链霉菌产新霉素的发酵生产具有实际意义。     

肠道菌群与宿主关系解析及肠道菌群调控/合成研究进展

肠道菌群和宿主健康之间有着密切的关系,其与宿主之间存在着复杂的相互作用,如菌群及其代谢产物与免疫系统的互作、脑-肠轴、肺-肠轴等.肠道菌群紊乱与多种疾病的发生和发展存在相关性,且部分微生物菌株与一些疾病的发生存在着因果关系.肠道菌群还会影响药物代谢,个体差异的肠道菌群使得不同个体对于同种药物的代谢具有很大差别;解析个体肠道菌群的状态及其与宿主之间的关系是实施个性化精准诊疗的重要环节.肠道菌群具有可塑性,通过饮食调控、益生菌/益生元/合生元补充、粪菌移植等干预手段可以使肠道菌群处于健康状态,应用肠道菌群编辑和合成肠道微生物组等新技术调控、合成肠道菌群的研究已有报道.目前,利用合成生物学等方法调控肠道菌群已成为改善和治疗疾病的有效方法之一.本文综述了肠道菌群与人体等宿主的相互作用、肠道菌群与部分疾病的相关性和因果性,以及通过肠道菌群调控改善人体健康状态的策略,展望了微生物组学和合成生物学在肠道菌群调控与合成方面的应用.     

摇床转速对淡紫拟青霉菌生长的影响

设置不同摇床转速来调节通气量,以淡紫拟青霉菌株NHPL03培养过程的OD值、pH值、菌丝重量、孢子量、毒力为指标,研究通气量对淡紫拟青霉菌NHPL03生长的影响。结果表明:淡紫拟青霉菌可在多种摇床转速(通气量)条件下生长。通气量不仅影响菌丝生长与孢子生成而且影响毒力产物分泌,菌丝生长与孢子生成的最佳摇床转速为100r/min,培养8d菌丝干重达到最高值1.10g/50mL,产孢量达28.5×106个/mL。从毒力强度看,低转速条件60r/min总体毒力水平最高,培养8d菌液对茎线虫校正致死率达到47.1%。     

双丁酰环磷酸腺苷耐人肝癌细胞株SMMC－7721表面N－糟链类型及天线数的影响

本文采用系列凝集素柱层析法,并配合外切精苷酶研究了在双丁酰环磷酸腺苷（ｄＢ－ｃＡＭＰ）作用１～５天过程中人肝癌细胞株ＳＭＭＣ－７７２１细胞表面Ｎ－糖链类型及复杂型糖链天线数的变化。结果表明,ｄＢ－ｃＡＭＰ促进３Ｈ—Ｍａｎ参入细胞表面Ｎ－糖链,使高甘露糖型Ｎ－糖链的百分比下降,并促进二天线Ｎ－糖链的生物合成。使多天线特别是四天线和Ｃ２Ｃ２Ｃ６三天线Ｎ－糖链的百分比减少．结果提示,Ｎ－糖链结构的这些变化可能是ｄＢ－ｃＡＭＰ诱导ＳＭＭＣ－７７２１细胞向正常方向分化的结果。     

Asia Ⅰ型口蹄疫病毒中和表位与羊IgG重链恒定区的融合表达及免疫原性测定

VP1蛋白是口蹄疫病毒(Foot-and-Mouth Disease Virus,FMDV)诱导机体产生抗病毒感染免疫的主要蛋白,含有病毒的若干中和表位.本研究设计和合成了由Asia Ⅰ型FMDV VP1蛋白136～160aa和198～211aa两个表位组成的重复串联表位的编码基因,并克隆了羊IgG重链恒定区编码基因.利用BamH I、EcoR I和Xho I位点将2个基因片段依次克隆到pPROExHTb载体,构建成重组质粒pPRO-FshIgG,将其转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,以IPTG诱导表达得到融合蛋白FshIgG.100μg FshIgG蛋白免疫豚鼠后刺激豚鼠产生了高效价的FMDV中和抗体,而且使这些免疫豚鼠在用200 ID_(50)剂量FMDV攻击时得到了完全保护.由此证明,羊IgG重链恒定区蛋白能够作为FMDV表位肽的载体,而融合蛋白FshIgG可成为一种口蹄疫表位疫苗候选物用于口蹄疫的预防.     

鲑鱼降钙素在链霉菌中的分泌表达

利用聚合酶链式反应(PCR)技术分别扩增鲑鱼降钙素的编码序列(sCT-Gly)和抗生链霉菌melCl的信号肽编码序列及其上游的调控序列,将鲑鱼降钙素编码序列融合在melCl信号肽编码序列后,定向克隆到链霉菌质粒载体pIJ680中的新霉素磷酸转移酶基因的启动子(Paph)下游,得到的表达质粒pMS680转化变铅青链霉菌(Streptomyces lividans TK54)进行分泌表达。酶联免疫测定法(EIA)显示重组菌株在YEME培养基中的分泌表达水平于96h达到最高,表达量大于100μ/L培养液。实验表明表达产物能降低大鼠血清钙的浓度。高压液相色谱(HPLC)结果表明,表达产物中主峰的保留时间与鲑鱼降钙素标准品的保留时间基本一致。以上结果提示,鲑鱼降钙素在链霉菌中获得了成功的分泌表达。     

二十碳五烯酸和二十二碳六烯酸的生物合成途径研究进展

以二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)为代表的长链多不饱和脂肪酸,对人体心血管系统、神经系统、抗炎免疫系统等有着理想的功效,因而倍受研究者关注。我们从结构、生物来源和合成、生理功能及生物工程途径的研究现状等方面阐述了EPA和DHA的相关信息,并对其生成途径中涉及的酶进行了简要概述。     

N-糖基化修饰在髓性白血病耐药中的作用

目的研究N-糖基化修饰、糖基因表达调控在髓性白血病耐药中的作用,明确N-糖基化修饰、糖基因与白血病耐药的相关性,从而为预测和诊断髓性白血病耐药性,寻求逆转药物提供新策略和靶点。方法通过修饰白血病耐药细胞株的N-糖基化（衣霉素Tunicamycin和PNGase F处理）,Western Blot检测Pgp、CD147糖蛋白的表达水平;MTT法检测N-糖基化修饰前后髓性白血病耐药细胞株的生长情况及对化疗药物的敏感性,观察上述细胞膜型N-糖基化修饰后对化疗药物耐药性的影响;进一步通过RNA干扰技术干预差异表达的糖基因,MTT法检测干扰前后白血病耐药细胞株的生长情况及对化疗药物的敏感性,观测糖基因的表达调控对髓性白血病耐药的影响。结果 NB4/ADR细胞经N-糖基化修饰后,P-gp、CD147糖蛋白的表达水平发生改变,同时该细胞的药物敏感性也增强（P〈0.05）;当通过RNA干扰技术特异性使NB4/ADR细胞中B3GNT8和ST8SIA4表达下调时,该细胞的药物敏感性增强（P〈0.05）。结论髓性白血病细胞株中N-糖基化修饰、糖基因的改变均与白血病多药耐药具有相关性,为预测和诊断髓性白血病耐药性,寻求逆转药物提供新策略和靶点。     

神农架林区和自然保护区链霉菌资源考察

首次从神农架林区和自然保护区的原始林、次生林、荒地、耕地采集土样 78份 ,用 5种培养基分离放线菌。经挑选留取 96株 ,其中 86株放线菌为白长链霉菌 (Streptomyces .albolongus)等 5 5个种或类群种。对神农架林区和自然保护区链霉菌的分布规律作了初步探讨 ,讨论了土壤类型、植被类型、海拔高度、气候条件、人类活动等对神农架林区和自然保护区链霉菌分布的影响     

灰冠鹤雏鸟的生长发育

1999~2000年对哈尔滨动物园8只灰冠鹤(Balerica regulorum)雏鸟的生长发育进行了观察,并对雏鹤恒温能力的发育进行测定。发现灰冠鹤体重、嘴峰、跗跖和翼4个生长指标的增长曲线均呈“S”型。利用Logistic、Gompertz和Von Bertalanffy生长曲线分别对其进行回归分析,发现3种曲线的回归效果均较好,其中Logistic曲线的回归效果最佳。显示出雏鹤外部体征发育呈现一定的顺序,符合重要功能优先发育的原则。灰冠鹤雏鸟的体温调节能力在5~10日龄发育最快,到40日龄体温基本恒定,达到成鸟体温。根据灰冠鹤的发育规律,可将其生长分为4个阶段:(1)0~5日龄,体重下降,体温调节能力很低;(2)6~30日龄,体重开始增长,嘴峰增长速度达到顶峰,体温调节能力明显增强;(3)31~80日龄,体重、跗跖和翼快速生长,体温基本恒定;(4)81~135日龄(离巢),体重及各外部体征的生长都很缓慢,体型已接近成体,不断完善身体各部的机能。