骨髓淋巴细胞的分离

目的:探讨骨髓淋巴细胞的分离方法。方法:对18例疑似血液病患者,分别抽取骨髓0.2ml,参照淋巴细胞分离步骤来分离骨髓淋巴细胞,并且对骨髓细胞进行活力检测,分别观察骨髓淋巴细胞的形态及计算骨髓淋巴细胞的活力。结果:骨髓淋巴细胞外形呈圆形或椭圆形、边缘整齐,胞浆量很少,似裸核,胞质如可见,呈淡蓝色,一般无颗粒;胞核圆形或有小切迹,染色质聚集成大块状,结构紧密,结块边缘不清楚,染紫红色;镜下观察发现骨髓淋巴细胞的活力>95%。结论:Ficoll分离液可以对骨髓淋巴细胞进行分离,将为成熟淋巴细胞的研究以及其在炎症性疾病中的发病机制及治疗提供一个新的思路。     

蛋氨酸脑啡肽对免疫系统恢复作用的研究

采用固相合成法合成蛋氨酸脑啡肽,制备成注射液。对经放化疗后免疫系统受到伤害的晚期肿瘤志愿者进行治疗,经静脉滴注15 d。患者免疫系统指标全面迅速恢复,淋巴细胞亚群间比例趋于合理,证明蛋氨酸脑啡肽可以用于癌症患者的免疫系统的恢复治疗。     

计算机辅助设计可溶性BLyS受体, eBCMA-Fc 融合蛋白及其在大肠杆菌中的表达

B 细胞成熟抗原 (BCMA)是 B淋巴细胞刺激因子(BLyS)的受体之一．它的胞外区与人IgG1 Fc的融合蛋白eBCMA-Fc,又称为诱饵受体,具有拮抗BLyS的活性．为了设计新的拮抗肽,基于BCMA和Fc的晶体结构,通过计算机图形学技术、分子模拟方法,建立了eBCMA-Fc融合蛋白的三维理论结构．利用均方根位移（root mean square distance, RMSD）对eBCMA-Fc融合蛋白与单体eBCMA、Fc构象差异进行分析．融合蛋白eBCMA-Fc中的eBCMA段与单体eBCMA的主链碳原子间RMSD值为0.036 nm,Fc段与单体Fc的主链碳原子间RMSD值为0.064 nm．结果表明,对比单体,融合蛋白eBCMA-Fc并未因eBCMA与Fc直接连接而发生构象的变化．分子对接方法显示,融合蛋白eBCMA-Fc中的BCMA与BLyS作用,而Fc扮演着稳定BCMA构象的支架作用．为进一步验证上述理论分析,构建eBCMA-Fc融合基因,并将载有eBCMA-Fc融合基因的原核表达质粒转化BL21 (DE3)菌、在细菌中表达．目的蛋白经蛋白A亲和柱纯化大约为36 kD,与理论预测值34 kD相近．免疫印迹表明抗人IgG抗体能够识别eBCMA-Fc融合蛋白．ELISA证实,eBCMA-Fc融合蛋白能够结合BLyS．随着eBCMA-Fc融合蛋白增加,结合BLyS的融合蛋白也相应增加．而对照人IgG,即使在高浓度条件下,也不结合BLyS．此外,eBCMA-Fc 融合蛋白能够抑制BLyS对B细胞肿瘤Daudi细胞的作用．这些研究为下一步设计和筛选BLyS拮抗肽提供了实验基础．     

脑出血与脑缺血模型大鼠脾淋巴细胞的蛋白质组学研究

目的:通过比较正常与脑出血及脑缺血模型大鼠脾淋巴细胞蛋白质表达的差异,初步探讨细胞免疫功能与脑血管病之间的关系.方法:将SD大鼠随机分为正常组、脑出血模型组(采用VII型胶原酶诱导脑出血)和局灶性脑缺血模型组(采用线栓法造成大脑中动脉阻塞),分离大鼠脾淋巴细胞,提取总蛋白质后进行双向凝胶电泳,考马斯亮蓝染色,PDQUEST软件分析,对差异蛋白质点采用基质辅助激光解析电离质谱(MALDI-TOF-MS)技术进行鉴定并分析.结果:胶质细胞成熟因子γ等9个蛋白在脑出血和脑缺血模型组表达上调,膜联蛋白III在脑出血和脑缺血模型组表达下调.结论:建立了分辨率高重复性较好的脑出血及局灶性脑缺血脾淋巴细胞总蛋白的双向凝胶电泳图谱,并鉴定一些与脑血管病脑损伤相关的差异表达蛋白质,为深入研究脑血管病细胞免疫功能改变与脑血管病之间的关系奠定了基础.     

55例早期食管癌浸润深度的临床病理因素分析

目的:探讨早期食管癌的浸润深度的临床病理因素。方法:对术前胃镜发现、术后病理证实的55例早期食管癌进行统计,分析早期食管癌内镜下表现、肿瘤分化程度、淋巴转移与浸润深度之间的关系。结果:表面扩散生长型、腔内生长型高度<5mm、双向生长型高度<2mm及壁内生长型深度<0.5mm提示黏膜内癌。腔内生长型高度≥5mm、壁内生长型高度≥0.5mm、双向生长型高度≥2mm及混合生长型提示黏膜下癌。肿瘤分化程度与浸润深度呈负相关。4例淋巴结转移及2例淋巴管癌栓,其中1例为黏膜癌。5例为黏膜下层癌,原位癌均未发生转移。结论:内镜下表现与浸润深度有密切关系,肿瘤恶性程度越高则越易向深层浸润,浸润越深淋巴结转移率越高。     

基质金属蛋白酶与中枢神经系统感染

基质金属蛋白酶(MMPs)是一组合锌的能降解细胞外基质的中性蛋白酶家族.目前认为MMPs尤其是明胶酶(MMP-2,MMP-9)与中枢神经系统感染关系密切.通常它们以酶原的形式存在,一旦活化,则迅速攻击血脑屏障,降解基底膜的一些基质蛋白,破坏内皮细胞的紧密连接蛋白,促进脑水肿的形成和炎细胞的浸润.近年来研究发现,中枢神经系统感染后MMPs表达增加.导致血脑屏障损害及血管源性脑水肿,并参与中枢神经系统免疫反应,促进感染的病理生理过程.     

胸腺基质淋巴细胞生成素的研究进展

胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)是一种新型的细胞因子,它存在多种类型。已鉴定了人、小鼠和大鼠的TSLP受体,属于造血细胞因子受体家族成员,功能性TSLP受体复合物是由TSLP受体和IL- 7Rα组成,与配体相互作用能活化Stat3和Stat5,发挥着多种生物学功能。     

半胱胺盐酸盐减缓山羊手术后细胞免疫抑制效应的实验研究

Sixteen castrated male goats were randomly allocated into two groups (Control n=8; Experiment n=8) to investigate the effects of cysteamine on surgery-induced cellular immune suppression. The experiment commenced with 13 d of pre-operation (pre-Op), which contained 3 d of roughage-fed period (RP) and 10 d of roughage + concentrate-fed period (RCP), followed by first operation (Op-1) and then the second operation (Op-2). The goats were allowed to have 14 d of recovery between two operations. The fistulas were fixed to rumen walls in Op-1 and to duodenal walls in Op-2. Cysteamine (15 mg x kg(-1) x BW x d(-1)) was added to diet and fed to goats in Exp. group since RCP of pre-Op through whole experimental period. Blood was sampled through jugular vein from goats of both groups at pre-feeding of the last day of RP and RCP, 8 d after Op-1, 4 d and 13 d after Op-2, respectively to determine serum concentration of interlukin-2 (IL-2), cortisol, as well as PHA-stimulated lymphocytic proliferation rate (SI). In pre-operative periods there were no significant differences in concentration of IL-2 (0.82+/-0.1 vs 1.03+/-0.22 microg l(-1)) and cortisol (20.48+/-4.52 vs 20.80+/-9.93 microg l(-1)), as well as lymphocytic SI (90.72+/-7.25 vs 129.22+/-18.59) between Control and Exp. groups. The concentrations of IL-2 (0.82+/-0.1 vs 0.73+/-0.08 vs 0.55+/-0.12 microg l(-1)) and lymphocytic SI (90.72+/-7.25 vs 49.31+/-6.4 vs 7.09+/-1.66) in Control were depressed acutely (P<0.05), but cortisol concentration elevated (20.48+/-4.52 vs 26.67+/-10.51 vs 32.33+/-3.29 microg l(-1)) in post-operative periods (8 d after Op-1 and 4 d after Op-2), compared with those in RCP. While they remained unaltered in Exp. group except a slight decrease of lymphocytic SI at 4 d after Op-2. The different responses of Control and Exp. groups to surgery stress led to a 80-90% higher of IL-2 and about 3 times greater of SI in Exp. than those in Control, which was contributed by cysteamine administration. Our data show that in operated goats the cellular immune was suppressed by surgery stress, cysteamine administration prevented decreases of IL-2 and lymphocytic SI and increase of cortisol induced by surgery stress, consequently attenuates surgery-induced suppression of cellular immune activity.     

树木气孔浸润级与SO2伤害及ABA的防护作用

以常见绿化树种为材料,通过实地测定和熏烟实验,探讨了气孔浸润级与树木SO₂伤害的关系及ABA的防护效应.结果表明,在特定环境下,相同树种的气孔浸润级较为稳定,不同树种的气孔浸润级差异较大;浸润级与叶绿素结合度呈负相关变化,但不明显;与K⁺渗出量呈正相关(r=0.92,α＜0.01),并按95%的置信度绘制了伤害预测图.不同SO₂浓度条件下,对同一树种的气孔浸润级的影响甚小,不超过一个等级,K⁺渗出量则依大气SO₂浓度和树木吸S量的增加而增多.气孔浸润级依ABA溶液处理浓度增大而降低,K⁺渗出量也相应减少,经2.5mol·L^-1×4h剂量的SO₂熏烟,预涂30mol·L^-1ABA者,降低了1.5～3个浸润级,K⁺渗出量减少36.5%～54.8%,其测定值与自然对照值相近,防护作用显著.     

β—连环素与肿瘤发生、浸润的转移

β-连环素（β-catenin,β-cat)具有双重功能,它是wnt信号转导通路的下游元件,β-cat介导的wnt信号转导通路异常激活与肿瘤发生关系密切,同时,β-cat也是上皮钙粘附素-连环素复合体（E-cadherin/catenin complex,E-cd/cat复合体）的重要组分,该复合体中β-cat结构和功能异常在肿瘤浸润、转移过程中发挥重要作用。