最新专利文摘

酵母菌混合发酵乳清生产燃料乙醇的方法;微生物处理工业废弃物的方法和发酵生产微生物油脂的方法及其专用菌株;重组表达载体和用其转化的宿主细胞发酵甘油高产1,3-丙二醇的方法;用基因工程菌发酵生产腺苷蛋氨酸的方法     

产S-酰胺酶培养基统计学筛选与响应面优化

利用Design Expert软件中的两水平实验设计和响应面法,对发酵生产S-酰胺酶(可用于拆分2,2-二甲基环丙甲酰胺外消旋体)的培养基进行了优化。采用Plackett-Burman(PB)设计对培养基中相关影响因素的效应进行评价并筛选出了有显著效应的葡萄糖、酵母粉及2,2-二甲基环丙甲酰胺浓度,其他因素对酰胺酶产量的影响不显著。然后用旋转中心组和实验设计及响应面分析确定了主要影响因素的最佳条件,在优化的培养基中,酰胺酶产量达到168 U/L,比优化前的80 U/L提高了110.0%。     

Co-expression of IL-18 binding protein and IL-4 regulates Th1/Th2 cytokine response in murine collagen-induced arthritis

We constructed a recombinant adenoviral vector containing a murine interleukin （IL）-18 binding protein （mlL-18BP） and murine IL-4 （mIL-4） fusion gene （AdmIL-18BP/mIL.4） and used a gene therapy approach to investigate the role of IL-18BP and IL-4 in modulating the T-helperl and T-helper2 （Th1/Th2） balance in mice with collagen-induced arthritis （CIA）. Mice with CIA were intra-articularly injected with 107 pfu/6 μl ofeitherAdmIL.18BP/mIL-4, or a controladenovirus, or with the control vehicle （phosphate-buffered saline）. After intra-articular gene therapy with AdmIL-18BP/mIL-4, the serum levels of tumor necrosis factor-α （TNF-α）, T-interferon （IFN-γ）, IL-4, IL-10, and IL-18 in mice with CIA were assessed by ELISA. IFN-T-expressing and IL-4-expressing CD4^＋ T cells from mice splenocytes were monitored by flow cytometry. Mice with CIA at weeks 1, 2, and 4 after intraarticular injection of AdmIL-18BP/mIL-4 showed significantly increased serum concentrations of IL-4 and IL-10 （P〈0.01 at all time points） but greatly decreased serum concentrations ofIFN-γ, TNF-α and IL-β （P〈0.01 at all time points ） compared to both the con trol adenovirus and phospha tebuffered saline control groups. The percentage of LFN-γ- producing CD4^＋ T cells was significantly decreased in response to local AdmIL-18BP/mIL-4 treatment. The percentage of IL-4-producing CD4^＋ T cells increased significantly at 1 week after local injection of AdmIL-18BP/ mIL-4 then returned to normal by week 4. These data indicated the significant modifying effects on the Th1/Th2 imbalance in murine CIA produced by local overexpression of IL-18BP and IL-4. Combination treatment with IL-18BP and IL-4 is a promising potential therapy for rheumatoid arthritis.     

氟康唑注射液稳定性研究

目的检测氟康唑注射液在不同条件下的稳定性。方法系统观察不同条件下氟康唑注射液的稳定性,条件分别为高温（40℃）、4500Lx强光试验观察10d,室温（25℃）、低温（4℃）试验各观察3个月。建立一个简单的HPLC法用于稳定性试验中氟康唑和降解产物的含量测定。结果氟康唑＇往射液的含量和降解产物均无明显下降。结论氟康唑注射液在上述条件下是稳定的。     

预测和鉴定蛋白质翻译后修饰的生物信息方法

蛋白质翻译后修饰对蛋白质成熟、结构和功能多样性有决定性的作用。但蛋白质翻译后修饰的多样性、普遍性、动态性,使传统的生物化学方法在全局水平上理解翻译后修饰非常有限,对它们的研究、特别是大规模的研究长期发展缓慢。现在,在实验研究基础上,借助多方面的生物信息学方法,可以快速高通量的预测和鉴定蛋白质翻译后修饰。一方面,可以从序列角度出发,基于酶识别底物的特异性,用位点权重矩阵、支持向量机等算法,从底物蛋白质序列提取修饰相关的保守序列,并用于预测翻译后修饰位点。这种方法相对成熟,能够取得较理想的预测准确性,但不能反映不同时间不同细胞的翻译后修饰状态。另一方面,可从质谱数据分析出发,有望捕获细胞内翻译后修饰的动态特性。质谱分析的高灵敏度、高准确度和高通量的能力已使建立在质谱基础上的蛋白质组学成为研究翻译后修饰的重要工具,生物信息学方法和质谱蛋白质组学的结合则更可以加速研究翻译后修饰的进程。本文从序列和质谱分析两个角度总结评价了各种翻译后修饰相关生物信息学方法的研究近况,重点讨论利用质谱数据鉴定翻译后修饰的新思路。     

羽叶千里光不同部位提取物的抗氧化活性研究

目的:比较研究羽叶千里光根、茎、叶和花四个部位甲醇提取物的抗氧化活性.方法:采用索式提取法分别对羽叶千里光根、茎、叶和花进行甲醇提取;采用分光光度法测定提取物对二苯代苦味酰自由基(DPPH)清除能力及其在β-胡萝卜素/亚油酸体系中的抗氧化活性.结果:羽叶千里光叶甲醇提取物对DPPH的清除能力最强,其次为茎、花、根.在β-胡萝卜素/亚油酸体系中,羽叶千里光抗氧化作用强弱依次为叶、茎、根、花.结论:羽叶千里光四个部位甲醇提取物均有抗氧化活性.其中,叶甲醇提取物的抗氧化能力最强.     

环氧合酶-2在卵巢癌中的表达及其临床意义

目的：探讨COX-2的表达与卵巢癌生物学关系。方法：采用免疫组化SP法,分别测定12例正常卵巢组织、16例良性卵巢肿瘤、70例卵巢癌组织中COX-2的表达。结果：70例卵巢癌组织中COX-2阳性表达62例,明显高于正常卵巢组织,COX-2与临床分期、及淋巴结转移均有一定关系,与病理类型无关。结论：COX-2与卵巢癌的发生、发展及转移有关,可作为观察卵巢癌进展的重要指标。     

血清视黄醇结合蛋白-4同儿童肥胖和代谢综合征组分的关系

目的:探讨儿童血清视黄醇结合蛋白-4(retinol-binding protein4,RBP-4),视黄醇,甲状腺素运载蛋白(transthyretin,TTR)等维生素A相关指标与肥胖、胰岛素抵抗以及代谢综合征组分之间的关系。方法:分别随机选取本地区13-15岁体检学生,其中正常对照组和单纯性肥胖组儿童各50例,测定其血清RBP-4、视黄醇、TTR水平;利用空腹胰岛素和定量胰岛索敏感性检测指标评价其胰岛素抵抗;同时测定代谢综合征部分组分水平和亚临床炎症指标。结果:仅5%的青少年存在维生素A营养不足状态。排除年龄、性别、感染等因素的影响后,血清RBP-4水平、视黄醇、RBP-4/TTR摩尔比值以及RBP-4/视黄醇摩尔比值与体重指数、体脂含量以及体脂的中心分布(WHR)等密切相关;RBP-4与代谢综合征组分的甘油三酯水平则存在明显的正相关,而RBP-4/视黄醇摩尔比值则与空腹胰岛素水平存在显著的正相关。结论:RBP-4可能通过视黄醇依赖和/或非视黄醇依赖的方式参与肥胖和代谢综合征的病理过程。     

固相微萃取—气相色谱—质谱联用分析蓼实挥发性成分

察了萃取样品温度、萃取纤维吸附时间等因素对于固相微萃取蓼实挥发性成分的影响,确定较佳的实验条件为：萃取样品温度60℃,萃取纤维吸附时间60 min,脱附温度250℃,脱附时间5 min。用气相色谱—质谱联用技术测定上述条件所得蓼实挥发性化学成分,并鉴定出其中43种,占总峰面积的76.73%。其中含量较高的物质有：罗汉柏烯 (6.99%),丁香烯 (5.59%),2,5,5,8 a-四甲基-6,7,8,8a 四氢-5H-萘-1-酮(5.52%),α-丁香烯(4.29%),1,2,4a,5,6,8a-六氢-4,7-二甲基-1-异丙基萘(4.04%),环氧石竹烯(3.60%),α-香附酮(3.54%),4,5,5a,6,6a,6b-6氢-4,4,6b-三甲基-2-乙烯基-2H-环丙香豆酮(3.54%),香叶基丙酮(3.48%)。     

精氨酸甲基转移酶1和核因子κB在哮喘豚鼠中的表达变化

目的：探讨共激活因子相关的精氨酸甲基转移酶1和核因子-κB在豚鼠支气管哮喘模型气道和肺组织的表达变化。方法：24只白色雄性豚鼠随机分为：①正常对照组;②哮喘组。卵清蛋白致敏并激发后采用间接免疫荧光法检测气道及肺组织精氨酸甲基转移酶1和核因子NF—κB（P65）的表达水平,探讨其在哮喘中可能的作用机制。结果：CARM1和NF—κB（P65）在对照组和哮喘组均有阳性表达,主要在支气管-终末细支气管上皮细胞和肺组织成纤维细胞胞核表达。正常对照组和哮喘组CARM1和NF—κB（P65）的表达差异均有统计学意义？结论：在哮喘豚鼠气道上皮及肺组织CARM1和NF—κB（P65）在细胞胞核高表达,提示CARM1可能通过增强募集NF—κB到相关位点激活NF—κB信号转导通路,并启动了多种前炎性基因和免疫调节基因的转录激活从而诱发哮喘炎症反应.