血小板激活因子对大鼠海马脑片CA1区LTP的作用

目的:为了探讨血小板激活因子(platelet-activating factor,PAF)对大鼠海马脑片CA1区的长时程增强效应(long-term potentiation,LTP)的影响.方法:应用离体脑片电生理记录技术,记录大鼠海马CA1区的兴奋性突触后电位EPSP,研究了PAF对大鼠海马脑片CA1区的突触传递和可塑性的影响.结果:小剂量(1μmol/L)PAF可诱发大鼠海马CA1区LTP的产生;大剂量(10～50μmol/L)PAF不能诱发大鼠海马CA1区LTP的产生,且不能阻止高频电刺激(HFS,100 Hz,1 000 ms×2,每隔20 s给予)Schffer侧支引起的大鼠海马脑片CA1区LTP的形成和维持.大剂量PAF对海马CA1区基础EPSP没有影响.PAF受体拮抗剂银杏苦内酯(ginkgolide B,GB)可拮抗小剂量PAF诱发大鼠海马CA1区LTP的产生.结论:大剂量PAF具有神经毒性,可能是通过抑制海马CA1区的LTP的形成而参与艾滋病痴呆(HIV-1 associated dementia,HAD)的形成机制.     

培养的大脑皮层、海马及交感神经细胞钠、钾和钙离子通道的全细胞记录技术

目的: 建立新生大鼠大脑皮层、海马细胞及交感神经元细胞的培养方法及其钠、钾和钙通道的膜片钳全细胞记录技术.方法: 取出生1～3 d的大鼠大脑皮层、海马及交感神经节,用胰蛋白酶(0.125%)消化组织并分离出神经细胞,种植在涂有多聚赖氨酸的35 mm培养皿中,用高糖的DMEM培养液培养,一周后,镜下可见神经细胞壁光滑、完整,周围有明亮的光润,在高倍倒置显微镜下可见到完整的细胞核及均匀的胞浆,细胞间形成良好的突触连接,可用于细胞膜片钳记录.结果: 用胰蛋白酶消化分离培养的神经细胞,功能状态良好,在膜片钳全细胞记录中,易形成细胞与记录电极间的高阻抗封接,可分别记录到INa、IA、IK和ICa.结论:在神经系统电生理学研究中,此方法可应用于中枢神经系统不同脑区培养以及钠、钾和钙通道电流的记录.     

焦亚硫酸钠对大鼠海马CA1区神经元钾电流的影响

目的:探讨焦亚硫酸钠(SMB)、二氧化硫(SO2)及其体内衍生物(亚硫酸盐和亚硫酸氢盐)对中枢神经元钾通道的影响及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)及谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)相应的保护作用.方法:采用全细胞膜片钳技术研究了SMB对大鼠海马CA1区神经元瞬间外向钾电流(IA)和延迟整流钾电流(IK)的影响.结果:①焦亚硫酸钠可增大全细胞IA和IK,且具剂量依赖性和电压依赖性,使IA和IK增大50%的剂量分别为15.8 μmol/L和11.5μmol/L;②10 μmol/L的SMB均可显著影响IA和IK的激活过程,给药前后IA的半数激活电压分别为(-12.6±1.6)mV和(-7.0±1.3)mV(n=8,P＜0.01),IK的半数激活电压分别为(10.8±0.9)mV和(21.6±0.7)mV(n=8,P＜0.01),但不改变其斜率因子;③10μmol/L的SMB还非常显著地影响IA的失活过程,给药前后其半数失活电压分别为(-97.0±1.1)mV和(-84.4±3.3)mV(n=8,P＜0.01),但也不改变其斜率因子;④抗氧化酶SOD(1×106U/L)、CAT(2×106U/L)及GPx(105U/L)均可使SMB(10μmol/L)增大的IA和IK部分恢复.结论:SMB可显著增大IA和IK,抑制IA和IK的激活过程及IA的失活过程,从而导致胞内K 的外流增加,使胞内K 浓度降低,从而对中枢神经元功能产生不利影响.     

间歇性低氧对大鼠海巴长时程增强电位的影响

目的：研究间歇性低氧对大鼠海马神经元突触可塑性的影响。方法：大鼠受间歇性低氧处理后,用脑立体定位仪定位,观察海马时程增强电位（LTP）的变化。结果：间歇性低氧大鼠LTP幅值显著低于对照组。结论：间歇性低氯可影响LTP幅值,提示间歇性低氧可能使大鼠海马神经元的突触可塑性发生变化。     

脑缺血／再灌对海马磷酸酪氨酸蛋白含量的影响及其机制的研究

目的和方法：采用蒙古沙土鼠双侧颈总动脉结扎（BCAO）前脑缺血模型,研究N－甲基D－门冬氨酸（NMDA）受体（NR）非竞争性拮抗剂氯胺酮（ketamine,KT)、L－型电压门控钙离子通道（L－type voltage gatd calcium channel,L型VGCC）拮抗剂硝苯吡啶（Nifedipine ND）及非NR拮抗剂6,7－二硝基喹恶啉上卫四（6,7－dinitroquinoxaline-2,3dione DNQX)对沙土鼠脑缺血及缺血／再灌海马可溶性（S3）、突触体（P2）和颗粒性（P3）部分中磷酸酪氨酸蛋白（p-tyr-pr）含量变化的影响。结果：①缺血15min,三部分（P2,P3,S3）p-tyr-pr含量均下降,而S3部分p-tyr-pr含量下降更明显;随着脑缺血再灌时间的延长,三部分P-tyr-Pr含量均逐渐升高。S3部分恢复快,P2与P3部分相比,升高的速度较慢,但升高的幅度较大,且再灌后期变化不大;②脑缺血前腹腔注射KT或ND,均可部分地拮抗缺血再灌引起的p-tyr-pr含量的升高,而DNQX对此无影响。结论：缺血／再灌引起的p-tyr-pr变化与NR通道及L型VGCC有关,而与非NR无关。     

脑预缺血引起大鼠海马细胞膜腺苷受体数量和亲和力升高及其对神经元的保护作用

采用放射性配基结合法,测定大鼠全脑缺血后海马细胞膜腺苷(adenosine,ADO)受体数量及亲和力的变化,以探讨其与脑缺血耐受形成之间的关系。发现缺血6min即可导致海马组织明显的神经元延迟性死亡(delayed neuron     

线粒体膜电位与皮质酮对原代培养海马细胞的毒性作用

采用MTT法和激光共聚焦显微术观察皮质酮对原代培养海马神经细胞的存活率及其线粒体膜电位的影响。结果表明,在低糖、无血清培养条件下,皮质酮可剂量依赖地降低海马神经元及神经胶质细胞的存活率,在同等剂量下以神经元损伤更为显著。给予高浓度葡萄糖（25mmol/L）可明显拮抗皮质酮对海马神经元的毒性作用。进一步研究表明,皮质酮（10^-6-10^-5mol/L）可引起海马神经元线粒体膜电位明显下降,此作用亦可被高浓度葡萄糖所对抗。结果提示,在相同处理因素条件下,皮质酮以损伤神经元为主。皮质酮可降低海马神经元的存活率及线粒体膜电位,给予高浓度葡萄糖具有明显的改善作用。线粒体膜电位的下降可能是皮质酮引起神经元损伤的机制之一。     

慢性电刺激诱发大鼠癫痫模型中核磁共振检测信号异常的非对称性与特征性行为发作的关系

本文旨在探讨内嗅皮质（EC）－海马环路在颞叶癫痫发生中的作用,慢性强直电刺激大鼠石背海马（DH－PC）或右中部颞叶新皮质（MTNC）,每日一次（60Hz,2s,0.4-0.6mA),加续7－10d,刺激DHPC（57.4%,8/14只）或MTNC（71．42％,10／14只）均能引起电极对侧出现非对称性脑区核磁共振（T2－WI）信号增强,组织学切片证实与扩大的侧脑室吻合,可能涉及脑帝质结构的损伤,DHPC刺激组大鼠对侧脑扣内务 伴有高频原发性湿狗样抖（WEDS）,MTNC刺激组大鼠对侧脑损伤伴有低频原发性WEDS,后者在第2个刺激日开始出现,持续到第10天以后,所有假电极组无脑区T2-WI稚号和行为改变,我们推测,刺激HPC或MTNC所致癫痫性早期脑损伤具有同一种机制,涉及EC－HPC环路,刺激MTNC时,可能由于EC潜在门控作用,削弱了进出EC－HPC环路通往新皮质的信息流,致使脑损伤明显时行为发作频度低,另外,非对称非脑扣内务 提示了颞叶癫痫的致痫灶的对侧易感特征。     

孤啡肽对海马IL—1β表达的调节作用

采用原位杂交,免疫荧光双标技术及大鼠创伤应激模型,观察孤啡肽对海马白介素－1β（IL－1β）表达水平的影响,结果显示,侧脑室注射抗大鼠IL－1β抗体能明显改善创伤介导的免疫反应,即有效下调巨噬细胞分泌IL－1和TNF－α的能力,侧脑室注射孤啡肽后2h海马IL－1β的表达明显下降,且此作用能反啡肽受体拮抗剂阻断,免疫荧光双标结合激光共聚焦显微镜观察发现,孤喱肽的受体在神经经元,星形胶质细胞及小胶质细胞均有表达,实验结果提示,海马的IL－1β参与创伤应激介导的免疫反应,孤喱肽的神经免疫调节作用可能是通过作用于海马的中枢神经细胞,抑制L－1β的合成及释放而完成的。     

脱氧鬼臼毒素对美洲大蠊的毒力及几种酶系的影响

采用药膜法测试了脱氧鬼臼毒素对美洲大蠊Periplaneta americana初孵若虫的触杀活性,并测定了其对成虫中枢神经系统乙酰胆碱酯酶（AChE）和腺苷三磷酸酶(ATPase)离体活性的影响。结果表明：脱氧鬼臼毒素对美洲大蠊初孵若虫具有较强的毒杀活性,在接触时间24、48、72和96 h 的LC₅₀分别为26.26、4.68、1.51和0.62 μg/cm²;其对AChE没有明显影响; 对Na⁺ -K⁺ -ATPase有明显抑制作用,并存在浓度 效应关系,IC₅₀为44.9 μmol/L; 对Ca²⁺-Mg²⁺-ATPase表现出低剂量激活,高剂量抑制的现象。结果提示美洲大蠊的AChE不是脱氧鬼臼毒素靶标,而ATPase可能是脱氧鬼臼毒素的重要靶标之一。