臭牡丹苯乙醇苷类成分的鉴定及体外抗人肺腺癌A549细胞的机制研究

臭牡丹提取物具有良好的抗肿瘤的作用，为了鉴定臭牡丹提取物的成分及探究其对A549细胞体外抑制的影响，采用超高效液相色谱-质谱联用技术、CCK-8、细胞划痕法、Transwell、Western blot、免疫荧光及流式细胞术等方法进行检测。鉴定了臭牡丹提取物中34个苯乙醇苷类化合物，其中类叶升麻苷含量为32.95%,异类叶升麻苷5.49%。体外实验表明，臭牡丹提取物能抑制A549细胞的增殖、迁移和侵袭，且IC₅₀为0.125 mg/mL,还能下调A549细胞中EphA2、p-AKT、mTOR、p-mTOR、p-GSK-3β和β-catenin的表达，上调EphrinA1的表达，减少EphA2在A549细胞膜与膜质上的表达，并将A549细胞周期阻滞于G1/S期。本研究证实臭牡丹地上部分富含苯乙醇苷类成分，尤以类叶升麻苷和异类叶升麻苷为多，且可通过调控EphA2/Akt/mTOR通路达到抗肺癌作用。     

胰腺微环境外泌体miRNA参与胰腺炎症和纤维化的发病机制研究进展

慢性胰腺炎(chronic pancreatitis, CP)发病率逐年上升，目前尚无明确根治性治疗方法且后期有进展为胰腺癌的风险。CP的典型病理学特征是胰腺慢性炎症和纤维化，CP进展与胰腺微环境中三种主要细胞(腺泡细胞、巨噬细胞以及胰腺星状细胞)间的相互作用密切相关，然而它们具体是如何进行细胞间联系的目前尚不清楚。新近研究表明外泌体作为细胞间重要的通讯介质，其携带的miRNA可通过调控主要细胞内基因表达和信号通路等影响CP的发生发展。本文围绕胰腺微环境中外泌体来源miRNA与三种主要细胞相互作用的机制，对其最新研究进展进行归纳和总结分析，以期为CP发病机制的深入认识提供参考。     

利用CHAPS分离豌豆叶绿体偶联因子复合物

近年来不少工作者对叶绿体偶联因子复合物的结构、功能和发生的问题颇为关注(程秋琛等 1986,Merchant等 1985,Nelson 1982,Pick等1979,Strontman等1983,Suss等 1983)。分离生物膜蛋白质的     

腺病毒携带shFOXM1 对ACC-2 细胞作用机制的研究

目的:研究携带特异性抑制叉头框蛋白M1(Forkhead box protein M1,FOXM1)表达的腺病毒(Ad5.sh FOXM1)对人涎腺腺样囊性癌(Adenoidcystic carcinoma,ACC)细胞周期的调控、细胞凋亡的影响及其作用机理。方法:根据人FOXM1 m RNA的序列,设计合成针对FOXM1基因的三对sh RNA,转染ACC-2细胞系,利用实时荧光定量PCR、Western blot筛选获得最佳干扰片段,并构建入腺病毒载体,利用流式细胞术、MTT、Western blot等检测其对ACC-2细胞周期、细胞凋亡的调控及分子作用。结果:1成功筛选获得了抑制FOXM1表达的sh RNA,并构建了特异性抑制ACC-2细胞中FOXM1表达的腺病毒Ad5-sh FOXM1;2Ad5-sh FOXM1能明显抑制ACC细胞的增殖,并引起ACC-2细胞S期的阻滞(P0.05);2Ad5-sh FOXM1通过下调c-Myc蛋白的表达抑制了细胞的增殖,通过下调P21Cip1,P27Kip1蛋白的表达抑制了ACC-2细胞周期(P0.05)。结论:下调FOXM1的表达能够明显抑制ACC-2细胞周期和ACC-2细胞的增殖。     

莱氏拟乌贼缠卵腺的显微与超微结构

为了解莱氏拟乌贼(Sepioteuthis lessoniana)缠卵腺的结构和功能,本研究采用组织切片技术和透射电镜技术对该腺体进行显微与超微结构观察.结果显示,缠卵腺由腺壁组织、分泌叶瓣和结缔组织组成.其中,腺壁组织由外膜层和肌肉层组成,位于腺体外部;分泌叶瓣是腺体的主要部分,由分泌细胞和支持细胞组成,分泌细胞具有...     

蛛丝蛋白MiSp重组模块R1R2CT表达及其纤维化动力学研究

为探索蛛丝蛋白模块单元在成丝过程中的作用,研究了大腹园蛛Mi Sp R1R2CT功能模块在不同p H条件下的纤维化动力学特性。大腹园蛛Mi Sp蛋白的R1R2CT功能模块与硫氧还蛋白融合,并在BL21(DE3)中进行表达,表达量约为15 mg/L LB培养基。R1R2CT蛋白在p H 7.5和6.5时较为稳定,在22 h之内不发生纤维化;当p H值降至5.5时,R1R2CT在前2 h内快速纤维化,3~5 h趋势较为平缓;5 h之后R1R2CT蛋白再次出现Th T信号的快速增长,7 h后保持缓慢增长至22 h。R1R2CT的增长速率及幅度高于单独的CT(C-terminal)蛋白,而单独的R1R2在p H 7.5、6.5和5.5时均保持稳定,表明重复区依赖CT模块的快速纤维化模式。已有研究表明,CT在重复区纤维化过程中起晶核作用,该成果也从反面证实CT的晶核理论。     

重组新型冠状病毒疫苗(腺病毒载体)腺相关病毒qPCR检测方法的验证

目的 对重组新型冠状病毒疫苗(腺病毒载体)腺相关病毒(adeno-associated virus, AAV)实时荧光定量PCR(quantitative Real-time PCR, qPCR)检测方法进行验证。方法 以基因组两末端的反向末端重复序列(inverted terminal repeat, ITR)为目的基因，对重组新型冠状病毒疫苗(腺病毒载体)的腺相关病毒进行qPCR检测。对该方法进行线性范围、重复性、准确度、中间精密度、定量限、耐用性和适用性验证。结果 AAV浓度在2×10²～2×10⁷ copies/μL范围内线性良好(R²>0.999);重复性验证CV<10%;准确度验证回收率在91%～114%;中间精密度验证CV<10%;定量限为100 copies/μL;耐用性验证CV<10%;并且3种不同重组新型冠状病毒疫苗(腺病毒载体)均未检出腺相关病毒。结论 重组新型冠状病毒疫苗(腺病毒载体)腺相关病毒qPCR检测方法的线性范围、重复性、准确度、中间精密度、定量限和耐用性均符合可接...     

鱼类的后鳃腺

鱼类的后鳃腺王金星，赵小凡（山东大学生物学系济南２５０１００）鱼类的后鳃腺早在１００多年前就已被发现，但直到最近十几年才搞清楚其分泌激素的成分和功能。鱼类的后鳃腺（Ｕｌｔｉｍｏｂｒａｎｃｈｉａｌｇｌａｎｄ）来自胚胎时期的最后一个鳃囊。该组织在鱼类发育...