贴壁法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞的生物学特性

目的建立一种简便有效的体外分离纯化及培养扩增大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)的方法。研究MSCs的生物学特性,为血管组织工程提供理想的种子细胞。方法贴壁培养法分离纯化大鼠MSCs体外培养和连续传代,在倒置显微镜下连续观察细胞的形态变化;利用MTT法测定MSCs的生长曲线;行免疫组化方法鉴定MSCs膜抗原;分别加成骨、成脂肪诱导剂后MSCs体外培养1到3周,分别做碱性磷酸酶(ALP)、VonKossa染色及油红O染色,观察细胞形态变化、成骨及成脂肪分化结果。结果MSCs体外培养生长状况良好,呈均一的成纤维细胞样,表达波形蛋白(Vimentin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA),不表达层粘连蛋白(Laminin)、CD34、VIII因子相关抗原(VIII)。经体外诱导后具有多向分化潜能。结论贴壁培养法能有效分离纯化大鼠MSCs,用此方法培养的细胞生长稳定,增殖能力活跃,具有MSCs的一般生物学特性,为其成为血管组织工程理想的种子细胞提供了进一步的支持。     

一种适合AFLP分析的柑橘DNA提取方法

目的：通过对传统用于AFLP分析的DNA提取方法进行改善调和整得到一种效率较高,DNA损失较少适合于柑橘AFLP分析的DNA提取方法。方法：利用改善后的方法提取了13份参试柑橘材料（无病虫害的鲜叶）的DNA基因组,后用0．8％琼脂糖进行电泳检测,并进行了AFLP试验。结论：结果分别得到了清晰的DNA模板检测图和AFLP指纹图谱,表明该方法提取的DNA无降解且较纯,其质量完全满足AFLP技术的要求,并且在提取效率,减少DNA损失等方面体现出了优势。     

葡萄叶中总黄酮的提取工艺研究

目的：从葡萄叶中提取总黄酮。方法：采用正交试验法研究葡萄叶总黄酮的最佳提取工艺条件,考察了乙醇浓度、回流温度、回流时间及料液比四因素对葡萄叶总黄酮提取率的影响。结果：确立了葡萄叶总黄酮最佳提取条件为：45％的乙醇为溶剂、液料比为1：40、提取温度为60％、提取时间2h,在最佳工艺条件下葡萄叶总黄酮含量为5．329mg／g。     

花生DNA提取方法比较

目的:旨在筛选优化花生DNA提取方法。方法:采用SDS法、改进SDS法;CTAB法、改进CTAB法四种方法对花生叶DNA进行提取,并从电泳结果、纯度、得率、等方面对其进行比较研究,从而确定花生DNA提取适用流程;结果:CTAB法DNA平均得率为55.0μg/g.Fw,略小于SDS的60.3,但其A260/A280平均值为1.81,比SDS的1.55更接近标准要求。结论:综合考虑CTAB法是提取花生DNA的最佳方法,可提取到较高质量的DNA,符合分子检测要求;虽然改良CTAB法也相对好于SDS法,但由于步骤增加反而加剧DNA降解。     

妇宁康泡腾胶囊的药代动力学研究

目的研究妇宁康泡腾胶囊在家兔体内的药动学特点。方法用HPLC法测定甘草酸在家兔体内48 h血药浓度,采用3P87药动学程序计算药动学参数。结果主要药动学参数为t1/2=8.956 h,Tmax=8.27 h,Cmax=0.4544μg/ml,AUC=37.161。结论该制剂在家兔体内吸收代谢缓慢,其生物半衰期超过8 h。     

妊娠高血压综合征患者血清瘦素、TNF-α水平测定及其临床意义

目的检测妊娠高血压综合征患者血清中瘦素、TNF-α的水平,并探讨其与妊高征发病的关系。方法用放射免疫法测定35例妊高征患者外周血中瘦素及TNF-α的水平,并以21例正常晚期妊娠妇女(正常妊娠组)作比较。结果(1)妊高征组血清瘦素水平为(32.9±11.5)ng/ml,明显高于正常妊娠组的(18.9±3.0)ng/ml,P<0.05;轻度妊高征组血清瘦素水平为(22.0±4.8)ng/ml,与正常妊娠组比较,差异无显著性,P>0.05;中、重度妊高征组血清瘦素水平分别为(31.1±5.2)、(41.8±10.9)ng/ml,与轻度妊高征组及正常妊娠组比较,差异有显著性,P均<0.05;轻、中、重妊高征组之间血清瘦素水平差异有显著性(P均<0.05)。(2)妊高征组血清TNF-α水平为(22.7±11.5)fmol/ml,明显高于正常妊娠组的(9.2±2.1)fmol/ml,P<0.05,轻度妊高征组血清TNF-α水平为(11.5±4.1)fmol/ml,与正常妊娠组比较,差异无显著性,P>0.05;中、重度妊高征组血清TNF-α水平分别为(19.5±7.4)、(32.9±8.3)fmol/ml,与轻度妊高征组及正常妊娠组比较,差异有显著性(P均<0.05);轻、中、重妊高征组之间血清TNF-α水平差异有显著性(P均<0.05)。(3)妊高征组血清瘦素水平与TNF-α水平呈正相关(分别为r=0.56,P<0.01)。结论妊高征患者血清TNF-α水平增高可能是导致血清瘦素水平升高的原因之一。     

全自动直接定量法与定量比值法检测红细胞葡糖-6-磷酸脱氢酶活性的比较

目的:与定量比值法比较,探讨全自动直接定量法检测红细胞葡糖-6-磷酸脱氢酶(G-6-PD)活性的可行性。方法:同时采用定量比值法(即硝基四氮唑蓝定量法)和全自动直接定量法,检测219例肝素抗凝静脉血标本的红细胞G-6-PD活性。结果:定量比值法检测G-6-PD缺乏的阳性率为9.13%,全自动直接定量法检测的G-6-PD缺乏阳性率为9.58%,两种方法检测结果无显著性差异(P>0.05)。结论:定量比值法简单易行,适用于卫生条件有限的基层医疗单位;全自动直接定量法快速准确,是一种可批量检测的理想筛选方法。     

斑马鱼总RNA提取和纯化

采取异硫氰酸胍法从斑马鱼的3个样品中提取和纯化RNA,结果表明,RNAA260分别为0、587、0．719、0．151.A260/A280比值分别为1．89、1．92、1．82。电泳条带也清晰可见,可以用于进一步的分子生物学研究。     

桃品种'八月香'花粉的超低温保存

桃品种‘八月香’的花粉经4℃硅胶干燥8h或(20±1)℃下玻璃化液PVS4(35%甘油 20%乙二醇 0.6mol·L-1蔗糖)处理60min后直接投入液氮保存,解冻后的萌发率都可以达到70%以上,萌发率与保存时间长短无关。     

蜜蜂全基因组出笼前后

在2006年10月26日,期待已久的蜜蜂的基因组序列在英国杂志《自然》上发表了。这一事件对于全世界蜜蜂生物学家来说,标志着蜜蜂研究“后基因组时代”的开始。这一重大项目由倍乐医学院完成,耗资800万美元,历时2年。而实际上对于基因组的注释又经过近2年的时间,由代表15个国家、来自64个实验室的170名科学家完成。这一等待是值得的基因组序列最终发表后,生物学家通过互联网能做他们自己的“数据采掘”,用这一可得的公共资源验证自己的假说。事实上,在蜜蜂基因组文章在《自然》上发表的当周,其姊妹刊上发表的约50篇相关论文中,有一半以上是基于生物信息学的研究,这些刊物包括《科学》、《基因组研究》、《美国国家科学院院报》及《昆虫分子生物学》。蜜蜂与人类享有一些共性劳动分工,复杂的通信系统包括语言,发达的保卫和防御系统,精妙的建筑以及为了共同利益自我牺牲的特点。由于有这些共性,蜜蜂基因组的发表将使科学家不仅能够深入研究蜜蜂生物学,而且能深入了解我们人类自身的生物学。