饲料原料中有毒有害物质的综合毒性测定法初探

目的建立发光细菌综合毒性测定法,对实验动物饲料原料中有毒有害物质进行初筛.方法用发光细菌作指示生物,测定金属离子Pb2+,Zn2+,Cr+,Hg2+和毒性物质苯酚,灭害灵;以Hg2+为毒性对照物,测定10种饲料原料和3种人用食品.结果发光菌对有毒有害物质和金属离子敏感.在所测定的范围内,其发光强度随浓度增加而减弱,即相对抑光率增强,呈负线性相关,其相关系数在0.92以上;以Hg2+为毒性对照物,对10种饲料原料和3种人用食品进行测定,其中脱水蔬菜相对抑光率最大,为39.74%,相当于1.85×10-5%Hg2+的表征毒性,提示该样品可能受到农药和化肥等较严重的污染.结论发光细菌综合毒性测定法,可用于饲料原料中有毒有害物质的初筛,是一种快速、经济、有效的方法.     

二苯代苦味肼基自由基分光测定法及其应用的初步研究

在生命活动的氧化代谢过程中不断产生各种自由基~（［１］）。这些自由基与机体的许多功能障碍和疾病的发生密切相关~（［２］）。因此,研究自由基的检测方法和探讨清除自由基的物质的作用具有重要意义。自由基的检测方法很多,如电子顺磁共振法（ＥＰＲ）、电子自旋共振法（ＥＳＲ）、气－液色谱法、发光法等。但这些方法大多需用昂贵的仪器,一般实验室难以应用。我们根据文献调研,对简便的二苯代苦味肼基自由基（ＤＰＰＨ）分光测定法进行了初步研究,并用此法对多种野生植物进行了抗氧化性质的测定。此法简便易行,灵敏可靠,不失为筛…     

芒柄花素的放射免疫测定法

本文建立了芒柄花素(formononetin)的放射免疫测定法(RIA)。该方法利用芒柄花素的衍生物作为同位素示踪物,获得的针对芒柄花素—7-O—羧甲基—牛血清白蛋白(BSA—F)的抗血清对芒柄花素具有高的亲和性(Ka=6.8×10~9 L/M)。方法的检出限量为3.5±1.24 ng(n=13),检出范围为3.5—100 ng。用此方法测定红三叶草(Trifolium pratense L.)中的芒柄花素含量,批内、批间的平均误差分别为6.5％和11.9％,加样回收率平均为98.5％。红三叶草中芒柄花素含量为0.1305±0.495％(n=12)。南京地区夏季杂牧草饲料中芒柄花素含量为0.0062±0.030％(n=6)。并用此方法测定了饲喂红三叶草的湖羊血清中芒柄花素的血浓-时间曲线图。     

小鼠S_(180)瘤细胞免疫性的初步研究

本文选用灵敏度高,特异性强的酶标免疫吸附测定法(ELISA)及A.D.C.C.测试法(Antibody Dependent Cell mediated Cytotoxicity Assay)检测到以S_(180)瘤细胞免疫的小鼠血清中有抗S_(180)瘤细胞的特异抗体。并初步探讨了S_(180)肿瘤细胞膜上的唾液酸与抗原抗体相互作用的关系。实验表明S_(180)肿瘤细胞经唾液酸酶作用,水解去除瘤细胞表面的唾液酸后,对其与特异抗体的结合反应无明显影响。这提示S_(180)瘤细胞膜表面的糖蛋白上的唾液酸未必直接参与抗原抗体的特异性结合。以上结果为进一步研究患瘤小鼠各阶段的免疫情况及寻求最佳免疫时机,为治疗肿瘤奠定了基础。     

抗黄曲霉毒素B1单克隆抗体的制备及特性

用杂交瘤技术制备了5株产生抗黄曲霉毒紊B₁单克隆抗体的杂交瘤细胞株。对其中之一AFB1－2H8进行了较系统的研究。AFB1一2H8属IgC3。纯化腹水抗体效价约5×10⁶。ELISA检测标准毒素的线性范围为0．5～50ng／ml。最低检出量为0．01ng／ml。该单抗与参试的其它黄曲霉代谢物的交叉反应系数为0～0．21,该抗体有较大的应用价值。     

RNase保护法同时检测黄体生成素受体及17α－羟化酶的mRNA

睾酮是组织中主要雌激素雌二醇的前体,在卵巢内睾酮绝大部分转为雌二醇．睾酮的生成直接受垂体的黄体生成素和睾酮合成的限速酶17α羟化酶的调控．用液相杂交的方法,同时检测了卵巢组织中黄体生成素受体和17α－羟化酶的基因表达,并摸索出了最适条件．为今后进一步研究卵巢的功能,提供了新的手段．     

玉米种胚萌发过程中钙调素含量变化及与赤霉素和脱落酸的关系

用对植物钙调素具有专一性的小麦钙调素抗体建立了定量植物钙调素的酶联免疫吸附测定法。该方法的线性测定范围为２至１４００ｎｇ;批内与批间变异系数分别为７．９和１０．６。用此方法对玉米种胚的测定结果表明,钙调素含量随着萌发时间延长而增加。赤霉素在促进玉米种子萌发的同时,种胚中的钙调素含量也提高;脱落酸抑制玉米种子萌发,同时种胚中的钙调素含量也降低。这些结果说明钙调素可能在种子萌发过程中具有重要作用。     

小麦中T—2毒素的污染调查

采用酶联免疫吸附测定法(ELlSA),调查了我国部分地区1990年国产小麦T—2毒素的污染状况。调查结果表明,在330份样品中,有264份检出T—2毒素,占样品总数的80％。样品中毒素含量最高达1122．Oppb,平均含量为53．3ppb。在引起食物中毒的48份小麦样品中,检出高含量的T—2毒素(84．5—1064．4Ppb)。我国小麦中T—2毒素的污染水平与小麦赤霉病的流行密切相关。     

人IA-2基因的部分区段克隆表达及其在1型糖尿病诊断中的应用价值评估

目的:构建人IA-2基因不同区段原核表达载体,诱导表达获得重组蛋白,并初步验证其在1型糖尿病蛋白酪氨酸磷酸酶自身抗体检测中的价值。方法:用RT-PCR方法调取目的基因,构建相应的原核表达质粒,转化大肠杆菌HB101,诱导表达获得纯化重组蛋白;以重组蛋白为包被抗原,初步建立检测蛋白酪氨酸磷酸酶自身抗体的ELISA方法,评价各片段在1型糖尿病诊断中的价值。结果:获得了2种可被1型糖尿病患者血清识别的重组人蛋白酪氨酸磷酸酶抗原区段IA-2(601～979)和IA-2(683～979),检测敏感性和特异性相当,但IA-2(683～979)检测的阳性D450nm值明显高于IA-2(601～979),成为首选的抗原区段。结论:所选重组人IA-2(683～979)抗原区段具有良好的抗原性,可作为1型糖尿病患者辅助诊断试剂的候选抗原。