Annexin V/PI法流式细胞术检测细胞凋亡的影响因素

[目的]探讨消化液、细胞数量及试剂温度对Annexin V/PI法流式细胞术检测细胞凋亡率的影响。[方法]细胞经Accutase或无EDTA胰酶消化后比较检测结果;含有0.5×10^(5)、1×10^(5)、2×10^(5)细胞的样本按照说明书推荐(默认含有1×10^(5)细胞)加入试剂后,比较检测结果;细胞加入室温或4℃试剂后比较检测结果。以上比较均用未处理细胞和秋水仙素处理细胞分别进行。[结果]对于未处理细胞而言,与无EDTA胰酶相比,Accutase能显著减少凋亡率(2.70%vs 18.05%);而经药物处理的细胞,Accutase组凋亡率也有一定程度减少(22.32%vs 26.50%),但差异没有未处理细胞大。未处理细胞随着细胞数量的增加,PI信号并未发生明显改变,Annexin V-FITC信号与细胞数量成反比,统一十字门分析的凋亡率分别是:2.46%、1.85%、1.35%。对于药物处理的细胞差异尤其明显,统一十字门分析的凋亡率分别是:28.83%、21.27%、15.59%,因此不能用统一的十字门分析。加入4℃试剂的未处理细胞的凋亡率明显高于加入室温试剂的细胞的凋亡率(3.77%vs 8.13%),而对于药物处理的细胞,两者基本无差别(22.94%vs 22.18%)。[结论]用Annexin V/PI法流式细胞术检测细胞凋亡率时,使用Accutase消化液;样本严格计数,使细胞数符合说明书要求;使用室温试剂。     

应用流式细胞术分析林麝外周血 CD4+、CD8+ T淋巴细胞

通过对圈养林麝(Moschusberezovskii)外周血淋巴细胞CD4~+、CD8~+亚群的检测,探讨林麝细胞免疫功能状态,并探索应用流式细胞仪分析其淋巴细胞亚群的方法,为研究林麝重大疾病的病理机制及诊断方法提供科学依据。本研究选取健康林麝和患呼吸道疾病林麝各5头,以双色流式细胞术检测其外周血淋巴细胞CD4~+、CD8~+亚群的含量,并进行比较。结果显示,羊源CD4、CD8的流式荧光抗体能够标记林麝细胞并有效检测;患病林麝与健康林麝相比,外周血CD4~+细胞含量无差异(P 0.05),CD8~+细胞含量则显著降低(P 0.01),CD4~+/CD8~+比值显著增高(P 0.01)。结果表明,患呼吸系统炎性疾病的林麝其外周血淋巴细胞CD8~+亚群变化显著,检测淋巴细胞亚群对林麝疾病的诊断有重要意义。     

输尿管软镜结合输尿管硬镜治疗复杂上尿路结石的效果评价及对预后的影响

目的 探讨输尿管软镜协同输尿管硬镜治疗复杂上尿路结石的临床效果.方法 选择我院收治的复杂上尿路结石患者96例,按入院顺序分为对照组和观察组,每组48例.对照组采取输尿管硬镜钬激光碎石术治疗,观察组采取输尿管软镜协同输尿管硬镜钬激光碎石术治疗.比较两组患者1次性碎石成功率、结石彻底清除率、炎症反应情况以及生活质量、住院时...     

经阴道高位骶韧带悬吊术联合自体组织修复治疗重度盆腔器官脱垂的近期疗效

目的 探讨经阴道高位骶韧带悬吊术(HUS)联合自体组织修补手术治疗重度盆腔器官脱垂(POP)的疗效.方法 回顾性分析2019年1～12月在我院行经阴道高位骶韧带悬吊术为主的自体组织修补手术治疗的重度盆腔器官脱垂患者31例的临床资料,分析围术期指标并评价手术安全性,并于术后第3、6、12个月采用国际尿控协会制定的盆腔器官...     

徒手旋转胎头术66例临床分析

我院１９９４～１９９７年对６６例持续性枕横位及枕后位采用经阴道徒手旋转术纠正胎头位置,结果成功率７４．２％,效果明显,现报道如下：１临床资料１．１一般资料６６例中持续性枕横位５４例,持续性枕后位１２例。初产妇５０例,经产妇１６例。１．２徒手旋转指征（...     

黄瓜和菠菜LHC-Ⅱ的二维结晶及其结构的初步分析

用batch法生长了黄瓜和菠菜LHC -Ⅱ较大面积的良好有序的二维晶体 ,并用电子显微术和计算机图象处理方法获得了该 2种晶体的分辨率约 1 5nm的投影结构 .文章分析了黄瓜和菠菜LHC- Ⅱ二维晶体形成的异同 ,以及影响膜蛋白二维晶体生长的主要因素 .比较了 2种晶体结构的相似性和差异 .并讨论了 2种LHC- Ⅱ多肽组分和叶绿素a/b比值的不同与它们结构的关系 .     

猫肾离体保存中亚细胞水平上Ca^2＋浓度的X—射线微区分析

应用定量Ｘ－射线微区分析技术结合细胞化学技术,分析测定用单纯冷冻法保存离体猫肾脏过程中肾脏细胞的胞浆、线粒体、内质网、细胞核等细胞器内的Ｃａ２＋浓度变化,并探索钙通道阻滞剂对这种变化的影响。保存３６小时及７２小时后,线粒体与胞浆中Ｃａ２＋的峰背比极显著地提高,内质网、细胞核中钙颗粒减少。添加Ｖｅｒａｐａｍｉｌ后,保存过程中细胞器内Ｃａ２＋无显著变化。线粒体中的Ｃａ２＋峰背比与胞浆中的呈强的正相关,ｒ＝０９９０。实验结果显示：保存过程中,Ｃａ２＋由钙库（内质网等）进入胞浆中,线粒体在胞浆Ｃａ２＋浓度高时摄取Ｃａ２＋,而钙通道阻滞剂可抑制该过程。     

射线诱导在体造血细胞凋亡的量时效关系的研究

以4—10Gy射线在体损伤的小鼠为模型,应用DNA电泳和流式细胞术等方法证实细胞凋亡是射线损伤在体骨髓造血细胞的途径之一,发现射线诱导的造血细胞凋亡有明显的量效和时效关系。4、6、8和10Gy照射后,细胞凋亡发生率均表现为升高-降低过程,各剂量诱导的凋亡发生率峰值分别出现在照后12、8、4和4h,6和8Gy诱导的凋亡发生率已达最高水平,约为30％,10Gy诱导的凋亡反而要低。上述结果表明,诱导细胞凋亡是射线损伤骨髓造血细胞的一个重要途径,而且凋亡的发生率受照射剂量和照后时间的影响。因此,深入研究射线诱导的细胞凋亡,将有助于揭示射线损伤造血功能的机理。     

右美托咪定联合舒芬太尼术后镇痛对卵巢癌根治术患者细胞免疫功能和炎症应激反应的影响

摘要 目的：探讨右美托咪定联合舒芬太尼术后镇痛对卵巢癌根治术患者细胞免疫功能和炎症应激反应的影响。方法：根据随机数字表法将2020年2月至2023年2月期间陕西省肿瘤医院120例择期行卵巢癌根治术的患者分为对照组（n=60，术后镇痛药物选用舒芬太尼）和研究组（n=60，术后镇痛药物选用右美托咪定联合舒芬太尼）。对比两组镇静（Ramsay镇静评分）、细胞免疫功能[CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺、CD4⁺/CD8⁺]、镇痛情况[视觉模拟评分法（VAS）]、不良反应、炎症应激反应[白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、皮质醇（Cor）和去甲肾上腺素（NE）]变化情况。结果：与对照组术后6 h、12 h、24 h、48 h 相比，研究组同时间点VAS评分更低，Ramsay镇静评分更高（P<0.05）。与对照组术后24 h相比，研究组同时间点CD3⁺、CD4⁺、CD4⁺/CD8⁺更高，CD8⁺更低（P<0.05）。两组不良反应发生率组间对比未见差异（P>0.05）。与对照组术后24 h相比，研究组同时间点IL-6、TNF-α、Cor、NE更低（P<0.05）。结论：右美托咪定联合舒芬太尼用于卵巢癌根治术患者术后镇痛，镇静、镇痛效果显著，同时还可减轻机体炎症应激反应，缓解免疫抑制。     

地塞米松联合昂丹司琼对胸腔镜术后病人静脉自控镇痛PONV的影响

目的:观察地塞米松联合昂丹司琼对胸腔镜术后病人自控静脉镇痛(PCIA)相关恶心呕吐的防治效果。方法:120例ASAⅠ~Ⅱ接受胸腔镜手术的患者,随机分为两组:地塞米松与昂丹司琼联合组(OD组)和昂丹司琼组(O组)。OD组患者在诱导时给予10 mg地塞米松,O组给予等量生理盐水,在手术结束前10分钟时,患者均给予静脉注射8 mg昂丹司琼,术后均行病人自控静脉镇痛(PCIA:生理盐水将2μg/kg舒芬太尼和8 mg昂丹司琼稀释到100 m L)。观察术后48小时内的恶心呕吐的发生率及严重程度。结果:在术后恶心呕吐整体发生率上OD组(53.3%)与O组(60%),差异无统计学意义(P0.05),但在重度PONV发生率上OD组(10%)要显著低于O组(26.7%),差异有统计学意义(P0.05)。结论:地塞米松联合昂丹司琼能有效地降低胸腔镜手术后以舒芬太尼为主的病人自控静脉镇痛所致严重恶心呕吐的发生率。