真菌诱导子对茶条槭细胞没食子酸积累的影响

茶条槭（Acer ginnala Maxim.）叶片中含有没食子酸,但含量较低。真菌诱导子可以增加植物中一些次生代谢产物的含量,但其机理尚不十分清楚。本研究在茶条槭细胞悬浮培养的对数期加入内生真菌（Phomopsis sp.）诱导子,茶条槭细胞中没食子酸含量在24 h后开始增加,48 h时没食子酸含量达到峰值,最高含量为12.2 mg·g^-1 DW,是对照的1.58倍。茶条槭细胞对内生真菌诱导子的防御反应不同于对病原和非生物胁迫。真菌诱导子不提高培养液中pH值,也不明显增加胞内Ca²⁺浓度,但增大细胞膜通透性。培养液电导率差异显著,细胞核发生分裂,说明真菌诱导子可能促进茶条槭细胞核内有丝分裂,促使茶条槭细胞对培养液中的无机盐离子的吸收,以满足细胞生长的需要。PAL酶活性升高,在48 h时为对照的1.75倍,说明PAL酶可能参与了真菌诱导没食子酸的合成。     

茶条槭悬浮培养体系的建立与没食子酸合成的优化条件

初步建立茶条槭(Acer ginnala)细胞悬浮培养体系: 以茶条槭子叶为外植体, 接种于WPM培养基中, 对茶条槭愈伤组织进行诱导和继代培养。悬浮培养中, 每代增长指数达到11.6, 没食子酸含量达到1.518%。通过对比NT、IS、WPM、B5和MS培养基所含成分对茶条槭愈伤组织悬浮培养的影响, 综合考虑悬浮细胞的生长速率和有效成分的含量, 确定WPM为基本培养基。WPM培养基大量元素的浓度对细胞的生长和没食子酸的积累有显著影响, 其浓度越高, 促进作用越明显。3倍浓度的大量元素最有利于没食子酸的积累。蔗糖浓度为10 g.L-1最适于没食子酸的积累, 浓度为30 g.L-1最适于茶条槭细胞生长和没食子酸合成。     

鲜茶叶中表没食子儿茶素没食子酸酯的高效提取技术研究

采用鲜磨匀浆提取、负压空化混悬组合技术对新鲜老龄茶叶中的没食子酸酯(EGCG)进行了高效提取,并与干燥老龄茶叶的传统提取工艺进行了对比。结果表明：组合工艺的最佳提取条件为新鲜老龄茶叶高温杀青后,再经常温水匀浆萃取,固液比为1:10,匀浆萃取时间为1 min,滤渣再经负压空化混悬固液提取,固液比为1:10,空化时间为15 min,空化提取2次。新鲜老龄茶叶最佳组合工艺的EGCG提取量为502.85 mg,优于传统干燥老龄茶叶工艺。     

表没食子儿茶素-3-没食子酸酯抑制TNF-a和IL-1β在小鼠皮肤烫伤修复期间的表达

肿瘤坏死因子-a(tumor necrosis factor-a,TNF-a)和白细胞介素-1β(interleukin, IL-1β)在创伤修复中起着至关重要的作用.本研究利用小鼠皮肤深II度烫伤模型,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测烫伤部位组织Tnf-a mRNA和Il-1β mRNA的表达水平以及TNF-a和IL-1β的含量,以探讨表没食子儿茶素-3-没食子酸酯(EGCG)对小鼠皮肤烫伤修复期间TNF-a和IL-1β表达的影响.结果显示,用0.2 mg/g EGCG膏剂涂敷烫伤皮肤,处理12 h可致组织Tnf-a mRNA表达水平和TNF-a含量下降,处理24 h可致组织Il-1β mRNA表达水平和IL-1β含量下降.上述结果提示0.2 mg/g EGCG处理能抑制烫伤组织TNF-a和IL-1β的表达,减弱创伤组织的炎症反应,有助于创伤组织的修复.     

长鞭红景天化学成分研究

从高山植物长鞭红景天(Rhodiola fastigita S.H.Fu)的根茎中得到七种结晶,经红外光谱、质谱和核磁共振及化学方法鉴定为β-谷甾醇(β-sitosterol)、胡萝卜甙(daucosterol)、没食子酸乙酯(gallic acid ethyl ester)、没食子酸(gallic acid)、酪醇(p-tyrosol)、β-谷甾醇-3-β-D-半乳糖甙(β-sitosterol-3-β-D-galactoside)和草质素-8-阿拉伯糖甙(herbacetin-8-arabinoside),其中胡萝卜甙、β-谷甾醇-3-β-D-半乳糖甙和没食子酸乙酯是首次从红景天属得到的。     

盐肤木果油中没食子酸的UPLC-MS及HPLC分析

盐肤木果实中没食子酸等多酚类物质是重要的生物活性成分,具有抗氧化、抗病毒、消肿瘤等多种生物学活性。采用超高效液相色谱-质谱联用技术（UPLC-MS）,分别对压榨法、乙醚浸提法和超临界CO2萃取法3种提取方法所得盐肤木果油中没食子酸等多酚成分进行了定性分析,再以没食子酸标准品为对照,采用高效液相色谱法（HPLC）对各样品中没食子酸含量进行了定量分析。结果表明：3种样品中均检测到没食子酸的存在,其含量在69.5～434.4 mg/L之间,但不同样品中没食子酸含量差异显著,即提取盐肤木果油的方式不同,其油脂中含没食子酸的多少不同,其中以乙醚浸提油中样品中没食子酸最多,达(426.7±7.7)mg/L。该研究可为进一步开发利用盐肤木果油资源提供方法借鉴。     

表没食子儿茶素没食子酸酯对活性氧的抑制作用

生物体内的活性氧(Reactive oxygen species,ROS)过量引起氧化应激将导致脂质、DNA和蛋白质氧化损伤,从而引发一系列生理和病理反应。绿茶中茶多酚的主要成分表没食子儿茶素没食子酸酯((-)-Epigallocatechin-3-gallate,EGCG)具有强抗氧化性,能有效抑制ROS。本文简要介绍了生物体内ROS的来源和EGCG的特性及其对ROS的抑制作用。通过检测玫瑰红水溶液在光敏化时所产生~1O_2的1 270 nm近红外发光,分析比较了EGCG和迭代钠(NaN_3)对~1O_2发光的淬灭过程,发现EGCG对~1O_2的淬灭效果比NaN_3更好,为EGCG淬灭~1O_2的定量研究提供理论依据。     

利用黑曲霉单宁酶酶法制取没食子酸的研究

利用已有的 10株高单宁酶活性的菌株为起始菌 ,经活化分离选择 ,借助Ⅱ级发酵培养程序、生物转化、结合TLC分析进行筛选实验。最后选出具有高单宁酶活性的 1号和 5 0号菌株 ,开展了没食子酸 (GA)克量级生物转化法制备实验 ,结果表明 ,本酶法工艺是可行的 ,在发酵液中GA的浓度分别达到2 0 .6mg/ml和 2 1 3mg/ml,产品产率 (以从五倍子提取的单宁酸计 )达到 41 2 %和 42 6 % ,具有潜在的工业开发价值     

表没食子儿茶素-3-没食子酸酯抑制脂多糖诱导的巨噬细胞促炎因子TNF-α和IL-1β基因表达

表没食子儿茶素-3-没食子酸酯(epigallocatechin-3-gallate,EGCG)具有抗氧化、抗癌、抗炎等多种生物学特性,但对巨噬细胞中表达TNF-α及IL-1β的报告尚存在争议.本文旨在探索EGCG对脂多糖(LPS)诱导的小鼠腹腔巨噬细胞和RAW264.7细胞促炎细胞因子Tnf-α和Il-1β基因表达的影响.MTT结果显示,0~100μmol/L EGCG对RAW264.7细胞活力没有影响;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和ELISA分析显示,1 mg/L LPS可显著升高小鼠腹腔巨噬细胞和RAW264.7细胞Tnf-α和Il-1βmRNA和蛋白水平,EGCG单独处理对巨噬细胞Tnf-α和Il-1β的基因表达与蛋白生成没有影响,但可以抑制LPS诱导的巨噬细胞Tnf-α和Il-1β的基因表达与蛋白生成,并存在剂量依赖效应.上述结果提示,EGCG可以剂量依赖方式抑制LPS诱导的巨噬细胞促炎细胞因子Tnf-α和Il-1β的表达,这可能与EGCG的抗炎效应有关.     

没食子酸对胡桃醌染色性能的影响

为探索没食子酸对胡桃醌的媒染机理,本实验通过比较在没食子酸存在的条件下,胡桃醌在头发上的染色效果和吸附性能,并利用量子化学计算没食子酸对胡桃醌和头发之间相互作用能的影响。结果表明,没食子酸可以使胡桃醌染出的发色更加鲜亮并且拥有更强的色牢度;同时没食子酸还可以改变胡桃醌的吸附行为,增加胡桃醌的吸附总量;在分子水平上,没食子酸可以充当桥梁连接头发角蛋白和胡桃醌,使得整体具备的能量更低,所形成的氢键更加稳定。说明没食子酸可以充当媒染剂增强胡桃醌的染色性能,本研究为天然媒染剂的选取提供了理论基础。