表没食子儿茶素没食子酸酯对心力衰竭小鼠心肌损伤的影响

为了评估表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对心力衰竭小鼠心肌损伤的保护作用,本研究通过主动脉弓缩窄术建立了心力衰竭的昆明小鼠模型,然后应用EGCG (20 mg/kg)处理小鼠4周。采用苏木精和伊红染色评价心肌组织的病理改变。采用ELISA法检测血清脑钠肽(BNP)、N末端-脑钠肽前体(NT-proBNP)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6 (IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的水平,采用Western blotting检测小鼠心肌组织中collagenⅠ、collagenⅢ、Bcl-2、Bax、caspase-3、TGF-β1、Smad3和p-Smad3水平。采用RT-qPCR检测心肌组织中collagenⅠ和collagenⅢ的表达,通过免疫荧光染色检测TGF-β1和p-Smad3的表达。研究显示,EGCG可有效减弱心力衰竭所致细胞坏死、组织肿胀、心肌纤维断裂等病理变化,并且显著降低心力衰竭诊断标志物BNP和NT-proBNP的水平。EGCG可显著降低小鼠心肌组织中的collagenⅠ和collagenⅢ的表达水平。EGCG处理可显著降低TNF-α、IL-1β和IL-6的水平。EGCG处理显著降低了心力衰竭小鼠血清MDA水平,而升高了SOD和GSH-Px水平。EGCG可显著上调心力衰竭小鼠心肌组织中Bcl2的表达,而下调Bax和caspase-3的表达。TGF-β信号通路激活剂可显著上调心肌组织中的TGF-β表达,而EGCG处理可显著抑制TGF-β1和p-Smad3蛋白的表达。表明EGCG可抑制心力衰竭小鼠的心肌纤维化、炎症反应、氧化应激和细胞凋亡,从而减轻心肌损伤。EGCG对心肌的保护作用可能与抑制TGF-β1/smad3信号通路有关。     

茶条槭悬浮培养体系的建立与没食子酸合成的优化条件

初步建立茶条槭（Acer ginnala）细胞悬浮培养体系：以茶条槭子叶为外植体,接种于WPM培养基中,对茶条槭愈伤组织进行诱导和继代培养。悬浮培养中,每代增长指数达到11．6,没食子酸含量达到1．518％。通过对比NT、IS、WPM、B5和MS培养基所含成分对茶条槭愈伤组织悬浮培养的影响,综合考虑悬浮细胞的生长速率和有效成分的含量,确定WPM为基本培养基。WPM培养基大量元素的浓度对细胞的生长和没食子酸的积累有显著影响,其浓度越高,促进作用越明显。3倍浓度的大量元素最有利于没食子酸的积累。蔗糖浓度为10g·L^-1最适于没食子酸的积累,浓度为30g·L^-1最适于茶条槭细胞生长和没食子酸合成。     

EGCG铜离子络合物对结肠癌细胞内活性氧水平的影响

本文主要通过荧光探针结合流式细胞术,探讨了表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)铜离子络合物(ECC)对结肠癌细胞(RKO细胞)内活性氧水平的影响,并进一步从分子水平阐述了其影响机制.结果表明,5～10 mg/L的ECC能够显著增强胞内活性氧水平,并且随着ECC水平的增加,细胞周期主要阻止于G2/M期.另外,胞内黄嘌呤氧化酶活性呈降低趋势,并且超氧化物岐化酶-1活性并没有随着其基因水平的增强而显著增强;但过氧化氢酶虽然基因水平有了较大的提升,其在胞内的生物活性却呈现出显著性剂量依赖性降低.因此,胞内活性的提升可能主要归因于胞内活性氧(过氧化氢)未能及时被活性降低的过氧化氢酶清除所致.     

EGCG对人结肠癌HT-29细胞凋亡的影响以及对MMP-2,RECK的调节作用

目的：观察表没食子儿茶素没食子酸酯（Epigallaocatechin-3-gallate,EGCG）对人结肠癌HT-29细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其对MMP-2,RECK的调节作用。方法：体外培养人结肠癌HT-29细胞,MTT比色法检测EGCG对HT-29细胞的生长抑制作用;Histone/DNA ELISA检测细胞凋亡;FITC标记Annexin-V/PI双染流式细胞术分析凋亡细胞百分率;Western Blot和RT-PCR方法检测EGCG对MMP-2,RECK蛋白和mRNA表达的影响。结果：EGCG呈浓度和时间依赖性抑制HT-29细胞的增殖,并且增加HT-29细胞Histone/DNA碎片的渗漏;EGCG诱导HT-29细胞凋亡百分率增高;EGCG抑制MMP-2蛋白和mRNA的表达,促进RECK蛋白和mRNA的表达。结论：EGCG抑制人结肠癌HT-29细胞的增殖,促进其凋亡,并且呈浓度和时间依赖性;其作用机制可能与其下调MMP-2蛋白和mRNA的表达、上调RECK蛋白和mRNA的表达有关。     

茶条槭愈伤组织的再生体系建立及其没食子酸含量的测定

通过愈伤组织诱导途径,建立了快速高效的茶条槭再生体系。成熟种子在MS＋1．0mg·L^-1 6-BA的培养基中萌发,以茎段作为外植体,在WPM＋0．002-0．01mg·L^-1 TDZ＋0．1mg·L^-1 6-BAR培养3周诱导形成愈伤组织,诱导频率平均为98．0％。愈伤组织转入WPM＋0．01mg·L^-1 TDZ＋0．1mg·L-^1 6-BA培养基中得到再生芽,分化频率为42．0％,平均每块愈伤产生再生芽10个左右。转到WPM＋0．3mg·L^-1 IBA的培养基上的再生芽均可生根并长成完整植株,小苗移栽成活率达到89．0％。实验还建立了愈伤组织中没食子酸的提取和HPLC检测方法。对深绿色愈伤组织连续培养2个继代后,没食子酸含量达到2．8％。     

白莺山古茶的化学成分分析与栽培茶树的起源

应用高压液相色谱(HPLC)技术,对白莺山古茶的大理茶素、儿茶素类、茶掊素、没食子酸、咖啡因和茶氨酸的含量进行分析.同时,应用分光光度法测定茶多糖和茶多酚含量.在与野生大理茶及栽培大叶茶(普洱生茶)进行多成分比较的基础上,结合形态性状的变异与进化,讨论白莺山古茶种质资源的多样性与野生大理茶和栽培大叶茶的相互关系.分析研究结果不仅为白莺山古茶的品质评价提供可靠的科学数据,为白莺山丰富的古茶种质资源的深人系统研究和合理开发利用提供基础,同时,通过多种过渡类型的化学成分分析与比较,为栽培大叶茶的起源和大理茶作为大叶茶的野生基源之一的假说提供了植物化学方面的证据.     

珠子草化学成分的研究

利用大孔树脂吸附和多种柱层析方法,从珠子草中分离得到5个化合物,根据理化数据和波谱学等方法鉴定为柯里拉京(1)、芦丁(2)、isobubbialine(3)、丁二酸(4)和没食子酸(5)。根据2D-NMR修正了化合物3的部分碳信号归属,归属了化合物1的碳氢谱数据。     

鸡尾木化学成分的研究

从鸡尾木中分出三个化合物,经光谱数据鉴定为没食子酸(Gallic acid),α-香树脂醇(α-Amyrin)和β-谷甾醇(β-Sitosterol)。     

籽瓜皮多酚的提取及其抑菌作用研究

利用超声波辅助提取籽瓜皮中多酚类物质并用高效液相色谱检测提取液的主要成分,同时对提取液的抑菌作用进行了研究。结果表明,最优提取工艺为提取时间35 min,乙醇浓度70 m L/100 m L,提取温度60℃,料液比1∶12。提取液的主要成分为没食子酸。0.4 mg/m L的籽瓜多酚提取液在大肠杆菌平面培养皿上产生明显的抑菌圈。籽瓜多酚提取液对大肠杆菌的最低抑菌浓度是0.05 mg/m L。     

EGCG防治神经退行性疾病的作用机制

表没食子儿茶素没食子酸酯（epigallocatechin-3-gallate,EGCG）是绿茶多酚成分中的一种主要组分,参与了神经细胞生长与凋亡的调控,研究发现其机制可能与抗氧化损伤和影响MAPK．PKC和PI-3K／Akt等细胞内信号转导通路相关。因此,探讨EGCG的神经保护作用及其机制,将为应用EGCG防治帕金森氏症、阿尔茨海默病等中枢神经系统退行性疾病的基础与临床研究提供理论依据。