水飞蓟素药学研究进展

本文综述了国内近10年来水飞蓟素分析方法、全合成及衍生物制备和药剂学研究,也包括了部分国外的主要研究成果。     

水飞蓟萌发期和苗期对盐胁迫的生长生理响应

为了探讨水飞蓟萌发期和苗期对盐胁迫的响应,比较不同水飞蓟类型耐盐性的强弱,以黑色果皮（SD）和白色果皮（HW）2个类型水飞蓟为材料,用不同浓度NaCl（0、0.1%、0.3%、0.5%、0.7%、0.9%）溶液处理种子和幼苗,观察种子发芽势、发芽率和芽苗和幼苗生长及其生理生化特征。结果表明:（1）NaCl胁迫下,水飞蓟种子发芽率、发芽势下降,芽苗生长表现为低浓度促进高浓度（HW为≥0.5%,SD为≥0.3%）抑制,且盐分对子叶长、胚轴长和鲜重影响较大,对干重无显著影响。（2）盐胁迫下水飞蓟幼苗叶片中MDA含量升高,光合色素（Chl a、Chl b、Car）含量下降,幼苗生长表现为低浓度促进高浓度（HW为≥0.9%,SD为≥0.7%）抑制;植株体内可溶性蛋白、可溶性糖含量及保护酶（SOD、POD、CAT）活性先升高后降低,脯氨酸含量则持续增加,其中保护酶活性在0.7% NaCl处理下较对照显著下降,可溶性蛋白和可溶性糖含量在0.9% NaCl处理下较对照显著下降。研究发现,在水飞蓟种子萌发期,盐分主要通过改变种子吸涨能力来影响芽苗生长;在苗期,水飞蓟幼苗主要通过提高渗透物质含量和保护酶活性来缓解盐分造成的伤害;水飞蓟萌发期和苗期耐盐性有所差别,萌发期耐盐能力明显低于苗期,2个类型水飞蓟耐盐性强弱表现为白色果皮类型＞黑色果皮类型。     

水飞蓟宾乳糖苷的合成、表征及抗氧化活性研究

实验设计旨在提高水飞蓟宾的水溶性、生物活性,以水飞蓟宾和乳糖苷为原料合成水飞蓟宾乙酰乳糖苷和水飞蓟宾乳糖苷.采用IR、1H NMR、13C NMR及HPLC-MS等手段对产物进行结构表征,并测定了水飞蓟宾乳糖修饰物的还原能力,清除DPPH自由基,清除ABTS+自由基能力及抑制脂质过氧化能力.结果表明水飞蓟宾乳糖苷的抗氧化活性显著优于水飞蓟宾.     

荧光定量PCR方法检测白酒发酵过程中Aspergillus tubingensis生物量

【目的】为了更好地分析霉菌在白酒发酵过程中的作用,需要快速准确地测定发酵过程中霉菌生物量的变化,本实验以白酒酿造中常用的塔宾曲霉(Aspergillus tubingensis)为例,建立一套快速准确定量塔宾曲霉生物量的方法。【方法】优化从酒醅中提取基因组的方法,设计和验证专一性引物,建立实时荧光定量PCR(Real-time quantitative PCR)方法,验证方法的有效性并应用于白酒发酵过程中塔宾曲霉生物量的检测。【结果】用原位机械破碎法提取酒醅中总基因组,其DNA的浓度能够达到1.060×105 ng/g酒醅;同时建立了一套快速准确测定固态基质中霉菌生物量的方法,并应用于白酒生产(制曲、堆积发酵和窖池发酵过程)中塔宾曲霉生物量的定量。【结论】实时荧光定量PCR方法能够快速准确地测定固态基质中霉菌的生物量,且检测限较低,对今后的相关研究具有借鉴意义。     

塔宾曲霉L-27菌株的分离鉴定及其发酵液除草潜力

【背景】微生物源天然产物是新农药研究开发的热点之一。【目的】从土壤中分离筛选代谢产物具有除草潜力的真菌菌株。【方法】培养皿滤纸法测定分离菌株发酵液对植物幼苗生长的抑制作用及抑制作用稳定性,显微观察结合rDNAITS序列分析鉴定菌株。【结果】在分离的30株土壤真菌中,L-27菌株发酵液对小麦幼苗生长抑制最显著,对根、茎抑制率分别为79.4%、67.3%。基于菌落形态、菌体显微观察和rDNA ITS基因序列分析,分离菌株L-27被鉴定为塔宾曲霉(Aspergillus tubingensis)。进一步测定发现,L-27菌株发酵液完全抑制反枝苋、马齿苋、稗草的幼苗生长,对圆叶牵牛幼苗根、茎的抑制率分别为100%、77.8%。L-27菌株发酵液对小麦幼苗生长的抑制作用表现出良好的热稳定性、酸碱稳定性和紫外光照射稳定性。发酵液在120°C加热20 min,根、茎生长抑制率分别为100%和73.8%;将发酵液调至pH 2.0-12.0并保持1 h,再调回初始pH值,对根、茎生长的抑制率均达100%;发酵液经紫外光照射5-240 min,抑制率分别为100%和84.3%-91.7%。【结论】分离的塔宾曲霉L-27菌株发酵液具有开发微生物源除草剂的潜力。     

水飞蓟宾诱导肺腺癌Anip973细胞凋亡的分子机制研究

目的：探讨水飞蓟宾诱导肺腺癌Anip973细胞系细胞凋亡的分子机制。方法：采用MTT法、倒置显微镜和电子显微镜等形态学检测以及流式细胞仪（FCM）技术检测、DNALadder分析、凋亡分子PARP的表达检测细胞凋亡,同时进行凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、caspase-3和caspase-9表达活性分析。结果：（1）水飞蓟宾对人肺腺癌Anip973细胞系细胞的增殖有显著抑制作用;（2）水飞蓟宾作用Anip973细胞48h后,随着浓度的增加,倒置显微镜下可见细胞数目减少,胞体变小、变圆,到高浓度时出现较多的死亡细胞;（3）扫描电镜观察发现,随着水飞蓟宾作用浓度的增加,Anip973细胞中出现增多的凋亡细胞,凋亡细胞表现出典型的超微结构特征;（4）流式细胞仪检测的结果发现,随着药物作用时间的延长,Anip973细胞的G1期细胞比例增多,S期细胞明显减少,G2期细胞略有减少,并出现明显的凋亡峰。（5）水飞蓟宾作用后的Anip973细胞出现明显的DNALadder和PARP降解增加等凋亡特征;（6）水飞蓟宾作用后,Anip973细胞中的凋亡相关蛋白Bax表达增加、caspase-3和caspase-9酶活性增加,而Bcl-2表达降低。结论：水飞蓟宾在体外有抑制人肺腺癌细胞Anip973的增殖作用,并通过激活线粒体依赖的caspase凋亡通路,诱导其凋亡。     

Eupenicillium sp.E-UN41产活性物质的分离与结构分析

在筛选微生物来源代谢产物的过程中,分离得到一株正青霉Eupenicillium sp.E-UN41,发酵液经离子交换树脂和葡聚糖凝胶等方法分离得到化合物UN41A.通过核磁共振波谱和X-单晶衍射进行该化合物的分子构型和晶体结构分析,确定其为4-氨甲酰基-1-β-D-呋喃核糖-5-羟基咪唑,与咪唑立宾同质.晶体属斜方晶系,空间群P212121,晶胞参数a=7.4897(7),b=11.3801 (15),c=14.0090(13)(A),V=1194.0(2) (A)3,Z=4,Dc=1.553g/m3,F(000) =592.晶体结构分析表明,分子中存在咪唑环共平面.     

广西来宾中二叠世的珊瑚群

系统研究了广西来宾地区中二叠世的珊瑚１９属５９种（包括２１新种）,自下而上建立了３个珊瑚化石组合,即栖霞组的１．Ｗｅｎｔｚｅｌｏｐｈｙｌｌｕｍ ｍｅｇｎｉｃｌｌｕｍｅｌｌｕｓ－Ｃｙｓｔｏｍｉｃｈｅｌｉｎｉａ ｒｅｇｕｌａｒｉｓ－Ａｋａｇｏｐｈｙｌｌｕｍ ｍｕｌｔｉｔａｂｕｌａｔｕｍ珊瑚组合,２．Ｈａｙａｓａｋａｉａ ｇｕａｎｇｘｉｅｎｓｉｓ－Ｐｏｌｙｔｈｅｃａｌｉｓ ｓｐｉｎｏｔｈｅｃａ珊瑚组合及     

猫海马注射去甲肾上腺素对血浆皮质醇浓度的影响

本工作报道了在戊巴比妥钠麻醉猫的海马不同区域注射去甲肾上腺素(NE)时血浆皮质醇浓度的变化及其作用受体。腹侧海马(VHIP)注入NE(4 μg/2μl),血浆皮质醇浓度明显升高,在背侧海马(DHIP)注入NE,则此作用不大。进一步分析表明,注射β受体阻断剂心得安(10μg/2μl),对皮质醇升高效应无明显影响,但此效应可被α受体阻断剂酚妥拉明(10μg/2μl)、α_1受体阻断剂哌唑嗪(2μg/2μl)或α_2受体阻断剂育亨宾(4μg/2μl)所阻断。这些结果表明,VHIP的α受体对于调节血浆皮质醇浓度起着较大的作用。     

灵芝总三萜对鹅膏毒肽中毒小鼠所致肝损伤的保护作用研究

鹅膏肽类毒素是蘑菇中毒导致死亡的最主要因素,用于鹅膏中毒治疗的解毒药物已有大量报道,水飞蓟宾（silibinin,SIL）被认为是目前最有效的解毒药物。灵芝作为我国传统的中药真菌,具有良好的保肝护肝作用。本文开展灵芝主要活性成分灵芝总三萜（Ganoderma total triterpenoids,GTT）和对照药物水飞蓟宾对α-鹅膏毒肽（α-amanitin,α-AMA）中毒小鼠所致肝损伤的保护作用及其抗氧化机理研究,结果表明α-鹅膏毒肽中毒小鼠经灵芝总三萜和水飞蓟宾治疗后小鼠血清中的ALT和AST活性显著降低,小鼠死亡率降低40%-50%,病理组织切片观察表明能明显减轻肝组织损伤的程度,说明灵芝总三萜与水飞蓟宾一样,对α-鹅膏毒肽中毒小鼠的肝具有很好的保护作用。灵芝总三萜给药组和水飞蓟宾给药组能显著增加肝组织中SOD和CAT的活性,显著降低肝脏中MDA含量,表明灵芝总三萜和水飞蓟宾具有抗氧化和自由基清除剂作用,能减轻α-鹅膏毒肽所引起的脂质过氧化伤害作用。