定量比格犬血浆中去甲文拉法辛LC-MS/MS方法的建立及比格犬血浆中富马酸去甲文拉法辛药代动力学研究

目的:建立一种快速灵敏的液质联用方法定量比格犬血浆中去甲文拉法辛,并进行比格犬体内富马酸去甲文拉法辛药代动力学研究,同时与琥珀酸去甲文拉法辛比格犬体内药代参数进行对比。方法:样品处理采用叔丁基甲醚进行液液萃取,液相分离采用Agilent Eclipse Plus C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,3.5μm),以乙腈-乙酸铵缓冲液(1 mmol/L)(体积比80∶20)进行等度洗脱。采用单次给药和多次给药试验进行比格犬体内药代动力学研究。结果:此方法具有良好的线性、精密度、准确度,定量下限(0.5 ng/mL)高于文献报道。液液萃取的样品提取方法简便,液质联用分析时间相对较短(3 min)。结论:此方法可成功地应用于比格犬血浆中去甲文拉法辛定量分析。比格犬体内富马酸去甲文拉法辛的药代参数(单次给药和多次给药试验)与对照品琥珀酸去甲文拉法辛没有明显的统计学差异。     

秸秆浸提液漂浮栽培对不结球白菜产量及相关品质特性的影响

以1/4园试营养液为对照,以腐熟发酵的农业秸秆(苋菜和番茄植株残体)浸提液模拟富含N、P的水体进行不结球白菜(Brassica campestris ssp.chinensis Makino)的漂浮栽培,对茎叶的单株鲜质量和干质量及叶片的VC、可溶性蛋白质、蔗糖、果糖、葡萄糖含量及可溶性糖总含量进行了比较分析。结果表明:在24 d的栽培周期内,随生长时间的延长,处理组和对照组茎叶的单株鲜质量和干质量均呈增加趋势,但从第10天开始,处理组茎叶的单株鲜质量和干质量均显著低于对照组。栽培初期叶片VC含量均最高且处理组叶片VC含量显著低于对照组;从第10天开始,叶片VC含量降低,但处理组叶片VC含量与对照组无显著差异。处理组与对照组叶片可溶性蛋白质含量均呈波动的变化趋势,但总体差异不显著。处理组叶片蔗糖含量总体上与对照组差异不显著,仅在第24天显著低于对照组。处理组叶片的果糖含量均高于对照组,特别是在第24天为对照组的1.81倍,差异显著。叶片葡萄糖含量均呈先升高后降低的趋势,可溶性糖总含量则呈波动的变化趋势,对照组叶片葡萄糖含量和可溶性糖总含量总体上高于处理组,但差异不显著。研究结果显示:用秸秆浸提液漂浮栽培,虽然不结球白菜的生长量(即产量)有所减少,但相关的品质指标变化不大,对果糖合成和积累还有一定的促进作用,因而,此种秸秆浸提液可用于栽培商品不结球白菜。     

人乳头状瘤病毒DNA检测在宫颈病变筛查中的应用研究

目的：探讨高危型人乳头状瘤病毒（HR-HPV）DNA检测方法在宫颈病变筛查中的应用意义。方法：580例妇女同时进行薄层液基细胞学（TCT）、第2代杂交捕获法（HC Ⅱ）和阴道镜下宫颈组织活检,并以病理组织学检查结果作为确诊标准进行对比分析。结果：①580例受检者中病理诊断为炎症207例（35.69%）,CIN Ⅰ 224例（38.62%）,CIN Ⅱ 96例（16.55%）,CIN Ⅲ 38例（6.55%）,浸润癌15例（2.58%）;②TCT检测异常者中炎症52例（25.12%）,CIN Ⅰ 177例（79.02%）,CIN Ⅱ 85例（88.54%）,CIN Ⅲ36例（94.74%）,浸润癌15例（100%）,其中CIN Ⅱ和CIN Ⅲ组间差异无统计学意义（P〉0.05）,但显著高于炎症组和CIN Ⅰ组,低于湿润癌组（P〈0.01或0.05）;③HPV DNA检测阳性者中炎症66例（31.88%）,CIN Ⅰ 152例（67.86%）,CIN Ⅱ 83例（86.46%）,CINIII 35例（92.11%）,浸润癌组15例（100%）,除CIN Ⅱ和CIN Ⅲ组间差异无显著性外（P〉0.05）,其余各组间差异均有统计学意义（P〈0.05或0.01）,且HPV-DNA检测阳性组CIN和浸润癌发病率明显高于阴性组（P〈0.01）;④30岁以下高危险型HPV感染率（65.53%）显著高于30岁以上34.47%感染率（P〈0.01）;⑤联合应用TCT、HPV-DNA检测诊断宫颈癌及癌前病变的敏感度和特异度分别为96.14%和69.28%,高于TCT或HPV-DNA的单独检测。结论：宫颈高危险型HPV感染是CIN及宫颈癌的主要发病因素,并与病变严重程度密切相关,而HPV-DNA和TCT联合应用可提高宫颈癌及癌前病变的检出率。     

姜老师信箱

蛋白质研讨班学员问:姜老师,您好!非常感谢您上次的建议。我们用您说的方法重新尝试了2种不同的胞内表达蛋白,电泳后发现渗透冲击法能有效的把蛋白释放到上清中。虽然目前效率还没有达到100%(目测可能有50%-60%左右的目的蛋白释放到上清中),但相对之前始终没有蛋白的情况已经好了很多。现在我还有2个细节问题想请教一下:1.这种方法的效率能达到90%以上么?如果可以,我们实验的效率能否通过增加低渗液(水)的体积来进一步提高?     

简易血栓吸除器

简易血栓吸除器,由Genesis医疗国际集团所生产。它使用了一个漏斗形的导液管,以吸除透析病人的透析管中的血液凝块,减少因血液凝块流人到身体的其它地方而造成的病人死亡。     

本氏针茅根际土提取物对本氏针茅及其优势种种子萌发的影响

以本氏针茅及其优势种大针茅和百里香种子为受体,采用生物检测的方法研究了0(对照)、0.1、0.2和0.5g/mL本氏针茅根际土甲醇浸提液和水浸提液对3种受体种子萌发的影响,以探究草地演替过程中物种间的生态关系和化感作用的表现形式。结果显示:(1)甲醇浸提液对3种受体种子的发芽均有抑制作用;水浸提液对本氏针茅发芽有促进作用,对百里香有部分促进作用,而对大针茅有抑制作用。(2)甲醇浸提液对本氏针茅和大针茅胚根和胚芽生长无显著影响,而抑制百里香胚根和胚芽的生长;水浸提液对本氏针茅胚根生长无显著影响,对本氏针茅胚芽生长具有显著促进作用,而对其它两种受体胚根和胚芽均无显著影响。(3)各种浓度甲醇浸提液对大针茅和百里香生长表现出了化感综合抑制效应,对本氏针茅生长于0.2g/mL时表现出化感综合抑制效应,其它2种浓度(0.1、0.5g/mL)表现为化感综合促进效应;水浸提液对本氏针茅和百里香表现为化感综合促进效应,而对大针茅表现为化感综合抑制效应。研究表明,本氏针茅根际土甲醇浸提液和水浸提液的化感物质存在差异;不同受体对同一浸提液反应不同,同一受体对不同浸提液的反应也不同。     

曼陀罗叶水浸液对大豆幼根生长及细胞分裂的影响

以曼陀罗叶干粉为供体,大豆种子为受体,用室内培养皿法研究了曼陀罗叶水浸液化感胁迫对大豆种子萌发、幼根生长、根毛发育和根尖细胞分裂的影响。结果表明:各试验浓度的曼陀罗叶干粉水浸提液均抑制了大豆种子的萌发以及幼根和侧根的生长,且幼根生长随胁迫浓度的增加呈现逐渐缩短变粗变褐的趋势;化感胁迫还使根尖分生区细胞的染色体畸变和微核高频率发生。根毛发生和根尖细胞的分裂对化感胁迫都表现出"低促高抑"的响应,即轻度胁迫能显著促进根毛的生长并提高根尖细胞的分裂指数,而高度胁迫对根毛的生长有极显著的抑制作用,且使根尖细胞的分裂指数显著下降。     

木犀草素改善低温下离体大鼠心脏保存效果的研究

目的:研究木犀草素是否能改善心脏停搏保存液(UW液)对离体大鼠心脏的低温保存效果。方法:将40只成年SD大鼠随机分成4组(n=10):对照组(UW组)、7.5μmol/L木犀草素小剂量组,15μmol/L木犀草素中剂量组及30μmol/L木犀草素大剂量组。利用Langendorff离体心脏灌流法,观察心脏在4℃含或不含木犀草素的UW液中保存12 h复灌60 min后心脏功能及超微结构变化,比较心脏冠脉流量(CF)、心肌含水量及冠脉流出液中磷酸肌酸激酶(CK)的释放量。结果:与对照组比较,添加木犀草素后,复灌期心脏的收缩功能(LVPSP,+dp/dtmax)与心脏舒张功能(-dp/dtmax)、冠脉流量在多个复灌时间点均优于对照组,心率在复灌60 min时也显著优于对照组;复灌过程中磷酸肌酸激酶的漏出量及低温保存后心脏超微结构的损伤也均明显低于对照组;随灌注时间延长木犀草素组心脏结构和功能的改善有剂量依赖性趋势;木犀草素对心肌含水量没有影响。结论:木犀草素能显著改善UW液对离体大鼠心脏的低温保存效果,对心脏有明显的保护作用,以30μmol/L的木犀草素大剂量组作用最显著。     

细胞外液酸碱度改变对自发性高血压大鼠脑动脉平滑肌细胞电生理特性的影响

目的:探讨细胞外液酸碱度(pHo)的改变对自发性高血压大鼠(SHR)脑动脉平滑肌细胞电生理特性的影响。方法:取200~250 g自发性高血压大鼠,应用全细胞膜片钳记录技术观察细胞外液酸碱度改变后对SHR脑动脉平滑肌细胞膜电流的作用,进一步揭示其离子机制。结果:①pHo酸化可电压依赖性的抑制SHR脑动脉平滑肌细胞的外向电流。其主要抑制SHR脑动脉平滑肌细胞0~+60 mV区间的电流幅度;②1 mmol/L TEA可以有效抑制pHo酸化对脑动脉平滑肌细胞外向电流的抑制作用。结论:pHo的改变引起SHR脑动脉平滑肌细胞外向电流变化,其可能与电压依赖性的抑制SHR脑动脉平滑肌细胞BKCa通道电流有关。     

静脉输注高氧液对单肺通气期间低氧血症的治疗作用

目的:探讨静脉输注高氧液对家猪OLV时肺内分流与氧合的影响.方法:30头健康家猪(25～35 kg)建立OLV模型后,随机分为2组,每组15头,即高氧液组(H组)和对照组(C组),H组动物在单肺通气后经右静内静脉以15 mL·kg-1·h-1的速度恒速输入高氧液,C组动物则以相同的方式和速度输入等量的乳酸林格氏液.分别于双肺通气时、单肺通气30 min、单肺通气60 min时抽取动脉血和混合静脉血做血气分析,并计算肺内分流率(Qs/Qt％),同时记录血流动力学指标.结果:与双肺通气时相比,单肺通气时两组PaO2,SaO2,PvO2和SvO2均显著降低,而Qs/Qt％明显升高(P＜0.01).单肺通气30 min以及60 min后,H组的PaO2,SaO2,PvO2和SvO2等指标均显著高于C组(P＜0.05),而对于肺内分流率(Qs/Qt％),两组间比较差异无统计学意义.结论:静脉输注高氧液虽然对肺内分流影响不大,却能够明显改善氧合,治疗单肺通气引起的低氧血症.