黄檀素对心肌缺血/再灌注损伤的治疗作用及机制研究

摘要 目的：探讨黄檀素（DAL）对小鼠心肌缺血/再灌注（MI/R）损伤心肌的治疗作用及其作用机制。方法：选择成年雄性C57 BL/6J小鼠随机分为假手术组（Sham）、模型组（MI/R）、地尔硫组（Diltiazem）和DAL低、中、高剂量组（10、30、90 mg/kg/d）,每组10只。结扎小鼠冠状动脉左前降支（LAD）,缺血30 min,再灌注1 h建立小鼠MI/R损伤模型。术后第1天起,Sham组、MI/R组小鼠均灌胃等体积生理盐水,Diltiazem组、DAL各剂量组小鼠灌胃相应药液,每日1次,连续7 d。给药结束后检测小鼠血清中肌酸激酶同工酶（CK-MB）、乳酸脱氢酶（LDH）活性及肿瘤坏死因-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）含量;检测小鼠心肌组织中超氧化歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）含量;苏木精-伊红染色（HE）检测心肌损伤病理形态;Western Blot检测心肌组织中Akt和P-Akt的蛋白水平表达变化;超声检测左室舒张末内径（ESD）、左室舒张末容积（EDV）、射血分数（EF）和短轴缩短率（FS）。结果：DAL可以减轻小鼠血清中CK-MB、LDH活性及TNF-α、IL-6含量;升高小鼠心肌组织中SOD活性,减少MDA生成;增加p-Akt的蛋白水平表达,减轻心肌组织病理损伤,改善心脏功能。结论：DAL可以通过增加Akt磷酸化促进心肌细胞存活,减轻心肌组织病理损伤,进而抑制小鼠MI/R损伤,改善心脏功能,最终发挥心肌治疗作用。     

SIRT3抑制线粒体自噬并减轻高糖加重的神经元缺氧再灌注损伤*

目的:探讨SIRT3调控的线粒体自噬对高糖加重神经元缺氧再灌注损伤的影响及机制。方法:高糖(50 mmol/L)干预HT22细胞后,构建细胞缺氧/复氧模型,利用SIRT3抑制剂3-TYP抑制SIRT3表达。倒置显微镜观察细胞形态改变,CCK8法检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡率,TMRE荧光试剂盒检测细胞线粒体膜电位,RT-qPCR、Western blot检测相关分子的基因和蛋白质表达。结果:高糖使神经元缺氧再灌注后的细胞碎片进一步增加,细胞存活率降低,细胞凋亡率升高(P<0.05)。此外,高糖降低了神经元缺氧再灌注后的线粒体膜电位(P<0.05)。进一步研究发现,高糖上调神经元缺氧再灌注后线粒体分裂相关蛋白DRP1的表达水平,降低了线粒体融合相关蛋白OPA1和线粒体外膜蛋白TOM20的表达;并且增加了自噬相关蛋白LC3Ⅱ、Beclin-1和线粒体自噬相关蛋白PINK1、Parkin的表达;同时,高糖升高了SIRT3的基因和蛋白质表达(P<0.05)。而SIRT3抑制剂3-TYP使神经元高糖缺氧再灌注损伤加重,同时进一步上调DRP1、LC3Ⅱ和PINK1的蛋白质表达(P<0.05)。结论:高糖可显著加重神经元缺氧再灌注损伤,破坏细胞线粒体功能,激活细胞线粒体自噬;SIRT3可抑制PINK1-Parkin通路介导的线粒体自噬并减轻神经元高糖缺氧再灌注损伤。     

胸段硬膜外麻醉对心肌缺血再灌注损伤的影响

摘要 目的：心肌缺血再灌注损伤常常会导致心肌的凋亡和坏死,有研究表明胸段硬膜外麻醉（Thoracic epidural anesthesia,TEA）在心肌缺血再灌注损伤中的作用,因此,我们建立了心肌缺血损伤模型和胸段硬膜外麻醉模型来探讨胸段硬膜外麻醉对大鼠心肌缺血再灌注损伤(Myocardial ischemia-reperfusion injury,I/R)的影响。方法：SPF小鼠60只,随机分为正常组、I/R组及TEA组,分别采用TTC、HE染色、免疫组化、Western-blot等方法检测各组小鼠心肌组织及相关蛋白表达情况。结果：1.与正常组比较,I/R组和TEA组有较高的心肌梗死面积。与I/R组相比,TEA组心肌梗死面积明显减少,差异具有统计学意义（P<0.05）。2.TEA组上调了Akt、Hes1和Bcl-2的蛋白表达,下调了Notch 1、DTNA、BAX和HIF-1α的表达。结论：TEA对小鼠心肌缺血再灌注损伤具有保护作用。     

雌激素对肾缺血再灌注损伤大鼠Th17/Treg平衡、氧化应激及肾组织NF-κB、TGF-β1表达的影响

摘要 目的：研究雌激素对肾缺血再灌注损伤（RIRI）大鼠Th17/Treg平衡、氧化应激及肾组织NF-κB、TGF-β1表达的影响。方法：取60只SD大鼠进行实验,随机分作假手术组、模型组以及雌激素组,每组各20只。模型组及雌激素组均建立RIRI模型,假手术组仅暴露肾脏,不进行肾缺血处理。雌激素组大鼠予以雌激素干预,模型组和假手术组均予以适量的生理盐水干预。分析各组肾功能指标水平以及Paller肾小管损伤评分,Th17/Treg平衡指标水平,氧化应激及肾组织NF-κB、TGF-β1表达水平的差异。结果：模型组及雌激素组血肌酐（SCr）、尿素氮（BUN）水平以及Paller肾小管损伤评分均高于假手术组,且雌激素组上述各项指标水平均低于模型组（均P＜0.05）。模型组及雌激素组白细胞介素-17（IL-17）水平高于假手术组,且雌激素组低于模型组;模型组及雌激素组白细胞介素-10（IL-10）水平低于假手术组,且雌激素组高于模型组（均P＜0.05）。模型组及雌激素组丙二醛（MDA）水平均高于假手术组,且雌激素组低于模型组;模型组及雌激素组超氧化物歧化酶（SOD）水平均低于假手术组,且雌激素组高于模型组（均P＜0.05）。模型组及雌激素组肾组织NF-κB、TGF-β1表达水平均高于假手术组,且雌激素组低于模型组（均P＜0.05）。结论：雌激素可有效调节RIRI大鼠Th17/Treg平衡,减轻氧化应激反应,同时有利于改善肾组织NF-κB、TGF-β1表达,缓解其RIRI。     

颅内压监测在高血压脑出血患者治疗中的指导价值及术后再出血的危险因素分析

摘要 目的：探讨颅内压监测在高血压脑出血患者治疗中的指导价值,并分析术后再出血的危险因素。方法：选取我院于2017年2月~2020年7月期间收治的70例高血压脑出血患者的临床资料进行回顾性分析,根据有无颅内压监测将患者分为对照组31例和监测组39例。对比对照组、监测组围术期指标情况,对比对照组、监测组术后并发症发生情况,采用单因素及多因素Logistic回归分析患者术后再出血的影响因素。结果：监测组甘露醇使用剂量少于对照组,重症监护室（ICU）住院时间、甘露醇使用天数短于对照组（P<0.05）。监测组术后并发症总发生率低于对照组（P<0.05）。本次研究纳入的70例高血压脑出血患者中,13例发生术后再出血纳为再出血组,再出血发生率为18.57%（13/70）;剩余的57例未再出血患者纳为未出血组。单因素分析结果可知,高血压脑出血患者术后再出血与发病至手术时间、凝血机制、术前血肿量、入院时收缩压（SBP）有关（P<0.05）。多因素Logistic回归分析结果显示,发病至手术时间≤6 h、凝血机制异常、术前血肿量>60 mL、入院时SBP≥200 mmHg均是高血压脑出血患者术后再出血的危险因素（P<0.05）。结论：颅内压监测在高血压脑出血患者治疗中的指导价值较高,高血压脑出血患者术后再出血与发病至手术时间、凝血机制、术前血肿量、入院时SBP相关,临床应给予高度重视并积极干预,以降低术后再出血发生率。     

Effects of resource sharing directionality on physiologically integrated clones of the invasive Carpobrotus edulis

资源共享的方向性对入侵植物海榕菜生理整合的影响 与植物克隆生长相关的一个关键性状是生理整合能力,它允许在一个克隆内相连接的分株之间共享资源。资源传输遵循源-汇关系：从生长在资源丰富斑块上的分株到生长在贫瘠斑块上的分株。然而,一些实验结果表明,向顶运输(从后端到前端)通常超过基部运输(从前端到后端)。在本研究中, 我们旨在确定入侵植物海榕菜(Carpobrotus edulis)生理整合模块的资源运输方向。我们开展了两个模拟实 验,研究了在不同位置(后端、中部、前端)的不同营养水平对海榕菜连接和断开克隆系统的影响。比较了分株生物量分配模式和最终生物量,以阐明生理整合的作用是否受资源运输方向性的影响。研究结果表明,海榕菜资源的向顶运输是普遍存在的,其发育分工是后端分株专注于获取土壤资源,前端分株专注于地上生长。虽然在最严酷的生长条件下的前端分株所获得的效益最高,但这种生物量分配模式不受后端或前端分株生长的营养条件的影响。这种发育程序化的分工被认为可以促进海榕菜的横向生长,从而对这种入侵物种的扩展具有重要意义。     

模拟喀斯特异质性小生境下三叶鬼针草地上地下协同生长对策

模拟在喀斯特异质生境下,通过随机区组实验,研究三叶鬼针草（Bidens pilosa L.）在两种土壤生境（浅而宽、深而窄）和3种水分处理（对照、减水50%、减水70%）下植物的地上和地下生长关系及生物量分配格局。结果显示：（1）两种生境中三叶鬼针草的地上生长（株高、地径、叶面积、叶生物量）与地下根系生长（根长、根表面积、根体积、根生物量）均随着施水量的减少而降低;叶面积比率随着施水量的减少而增加;根质量比在浅而宽土壤生境中呈先增后减的趋势,而在深而窄土壤生境中呈增加趋势。（2）两种生境中三叶鬼针草的地上生物量与地下根系生物量、叶面积与根长、叶面积与各层根系生长均呈显著正相关关系。但在浅而宽土壤生境中,三叶鬼针草的地上生物量与各土层根系生物量均呈显著正相关,而在深而窄土壤生境中,地上生物量仅与中上土层根系生物量呈显著正相关。研究表明三叶鬼针草在不同生境中均具有较好的地上地下协同生长对策,在增强对地下资源获取的同时也增强了对地上资源的获取。在浅而宽土壤生境中,三叶鬼针草通过协调根系的横向拓展能力与植物叶片的生长来应对快速的干旱缺水;在深而窄土壤生境中,植株能较好地协调根系向下拓展能力与地上叶面积的生长,更好地利用土壤深层的水分资源。     

不同种类氮素对苋菜硝酸盐积累及分配的影响

应用¹⁵N核素示踪技术,研究了不同氮肥种类对苋菜硝酸盐积累与分配的关系及氮素的去向。结果表明:（1）苋菜可食部分中茎较叶更易富集硝酸盐,茎中硝酸盐含量为叶中的1.5倍左右,施用硝态氮肥苋菜叶与茎中的硝酸盐含量都偏高。（2）苋菜硝酸盐主要来源于土壤,达到80%以上,而来自肥料部分不足20%。（3）苋菜施用尿素其肥料利用率达到46.27%,土壤残留氮素达到17.01%,均高于硫铵与硝酸钠,尿素损失率为40.32%,远低于硫铵与硝酸钠,表明施用尿素有利于土壤氮素储量的保持和提高。     

骨髓间充质干细胞移植在小鼠急性肾损伤肾内的存活与分化情况研究

为探讨急性肾损伤后,移植骨髓间充质干细胞(marrow mesenchymal stem cells,MSCs在损伤肾内的存活能力及分化情况,通过复苏、扩增培养已完成鉴定、经慢病毒EGFP转染的MSCs,观察备用MSCs的EGFP(enhanced green fluorescent protein)表达情况,采用雄性C57BL/6J小鼠12只建立小鼠肾脏缺血再灌注损伤模型后(结扎双侧肾蒂40 min后开放血流并经尾静脉注射MSCs),分别于第1、3、7、14 d处死3只小鼠,采集小鼠左侧肾脏制作石蜡切片,倒置荧光显微镜下观察MSCs在肾内的存活及分化情况,定量分析每个时间点存活于肾内的数目的差异.结果表明复苏、扩增培养出的MSCs增殖活力旺盛,成功建立小鼠肾脏缺血再灌注损伤模型.移植的细胞随时间的延长,存活于肾脏内的数量显著减少(第14 d存活于肾内的细胞数量仅为移植后第1d的1/5),第1、3、7、14 d表达EGFP的MSCs主要分布于肾小球周围、肾脏小血管内壁、肾小管与肾小管之间的间质而肾小管内壁未见到表达EGFP的MSCs分布.这说明移植的MSCs在缺血再灌注损伤后肾脏内能够存活,但肾脏内的微环境限制了移植细胞的存活能力.在肾小管内壁未观测到表达EGFP的MSCs,提示MSCs对肾脏修复的途径不是直接向肾小管内皮细胞分化而另有其它途径.     

模拟酸雨胁迫对杨梅幼苗水分生理特性的影响

选择浙江省典型亚热带经济植物杨梅为对象,通过盆栽试验研究了重度酸雨(pH2.5)、中度酸雨(pH4.0)和对照(pH5.6)处理对杨梅幼苗水分生理特性的影响.结果表明:季节、年份和酸雨对杨梅幼苗的光合速率均有显著影响,各处理中,夏季的差异大于春、秋季,pH4.0处理对光合速率有促进作用;季节、年份、酸雨,季节-年份交互作用以及三者交互作用对气孔导度均有显著影响,各处理在夏季的差异大于春、秋季,酸雨对气孔导度有抑制作用;季节、年份、酸雨及季节-年份和季节-酸雨两两交互作用对蒸腾速率有显著影响,各处理夏季的差异大于春秋季,且pH2.5处理对蒸腾速率的抑制作用最强;酸雨、季节-年份和季节-酸雨交互作用对水分利用率有显著影响,且pH2.5处理对水分利用率有一定的促进作用.