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731.
多铜氧化酶 (Multicopper oxidase,MCO) 家族中的某些酶可以通过氧化反应降解食品中的胺类危害物生物胺。然而酶在催化时因为持续被氧化可能会影响整个反应过程中MCO的活性及稳定性,使酶的催化效率和降解生物胺的能力下降。文中成功在大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3) 中构建并表达了来源于发酵乳杆菌Lactobacillus fermentum的多铜氧化酶 (MCOF) 与枯草芽孢杆菌过氧化氢酶 (CAT) 的融合酶。8种融合酶对H2O2的耐受性提高了51%–68%,融合酶CAT&MCOF在降解组胺的过程中稳定性比MCOF提高了17.3%。以2,2′-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸(2,2′-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid),ABTS)为底物时,CAT&MCOF对底物的亲和力 (Km) 提高了1.0倍,催化效率 (kcat/Km) 提高了1.7倍,摩尔比酶活提高了1.2倍,且在酸性 (pH 2.5–4.5) 和中高温 (35–55 ℃) 条件下的稳定性都有不同程度的提高。此外,CAT&MCOF对腐胺、尸胺和组胺的降解率分别为31.7%、36.0%和57.8%,分别比MCOF提高了132.5%,45.7%和38.9%。多铜氧化酶与过氧化氢酶融合表达提高酶催化稳定性和催化效率的策略将为通过酶的分子改造提高其应用特性提供参考。 相似文献
732.
多胺与激动素对稀脉浮萍离体叶状体衰老的影响 总被引:12,自引:0,他引:12
尹路明 《Acta Botanica Sinica》1994,36(7):522-527
多胺与KT 都可抑制暗诱导衰老的稀脉浮萍(Lem na aequinoctialis)离体叶状体的叶绿素损失,且多胺的作用大于KT。KT 还显著抑制蛋白质的损失与蛋白酶活性的上升,而多胺对此却无大的影响。0.05 m m ol/L的甲基乙二醛二脒基-腙(MGBG)轻微促进叶绿素和蛋白质的损失。0.05 m m ol/L的KT 可抑制衰老过程中腐胺(Put)的上升和亚精胺(Spd)的下降,而对精胺(Spm )无明显影响。在稀脉浮萍中,精氨酸脱羧酶(ADC)活性占优势。KT 可轻微促进ADC 活性,而对鸟氨酸脱羧酶(ODC)和S-腺苷甲硫氨酸脱羧酶(SAMDC)活性无显著影响。讨论了多胺与细胞分裂素在抑制植物叶片衰老过程中作用途径的可能关系 相似文献
733.
豇豆幼苗的连体和离体叶片衰老过程中多胺氧化酶(PAO)活性与叶绿素和蛋白质的含量都呈下降趋势,它们的降幅依次是:PAO活性大于叶绿素含量大于蛋白质含量;用氨基胍抑制离体叶圆片PAO活性,不能延缓叶绿素和蛋白质的含量下降。 相似文献
734.
目的通过shRNA沉默吲哚胺2,3-双加氧酶(indoleamine2,3-dioxygenase,IDO)基因表达,研究IDO表达在体外对NK细胞杀伤能力的作用。方法 shRNA沉默IDO基因表达质粒和空白质粒分别稳定转染至人卵巢癌细胞SKOV-3,应用Western blot检测IDO在SKOV-3、SKOV-3/Mock和SKOV-3/shIDO细胞中的表达情况,用MTT试剂盒检测3组肿瘤细胞体外生长速度和对NK细胞杀伤作用的敏感性。结果 IDO蛋白在SKOV-3/shIDO细胞中表达被抑制,在SKOV-3和SKOV-3/Mock细胞中有表达。3组肿瘤细胞体外生长曲线比较差异无统计学意义(P〉0.05)。SKOV-3/shIDO细胞存活的百分比明显低于其他2组对照(SKOV-3和SKOV-3/Mock)细胞,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论本研究应用shRNA沉默IDO基因表达质粒稳定转染卵巢癌细胞SKOV-3,获得IDO无表达卵巢癌细胞SKOV-3/shIDO,结果显示抑制IDO表达对卵巢癌细胞体外生长速度无影响,但可增强卵巢癌细胞SKOV-3对NK细胞杀伤作用的敏感性。因此,IDO可以作为卵巢癌基因治疗的潜在新靶点,shRNA沉默IDO基因表达可以作为卵巢癌治疗的新方法。 相似文献
735.
【背景】氯苯类化合物广泛应用于工业化合物的生产,由于其具有高毒性和环境持久性的特点,对人类健康和生态环境造成严重威胁,寻找高效降解这类化合物的新方法成为研究热点。【目的】将纳米零价铁与假单胞菌耦合,探究其在好氧条件下对五氯苯的降解效果和降解机理。【方法】建立纳米零价铁和假单胞菌降解五氯苯的反应体系,通过测定各反应体系中五氯苯及其中间产物的浓度,以及观测细菌的生长状况变化等,分析反应体系的降解效果及其可能的降解机理。【结果】纳米零价铁耦合假单胞菌的反应体系相对于两者的单一体系表现出更好的降解效果,36h的降解率可达55.4%,反应过程符合伪一级反应动力学,速率常数为0.02048h~(-1)。根据GC-MS所测的中间产物推测,该体系的反应机理为纳米零价铁在好氧条件下反应产生羟基自由基,攻击五氯苯使其变为低氯苯类化合物,假单胞菌进一步利用这些低氯苯类化合物;同时,假单胞菌又为纳米零价铁提供附着位点,有效地降低了纳米零价铁的聚集性,提高了反应活性。【结论】研究建立的纳米零价铁耦合假单胞菌反应体系对五氯苯具有较好的降解效果,为含有高氯代苯类等有机污染物的复杂环境的修复提供参考。 相似文献
736.
737.
目的:观察西达本胺对胰腺癌细胞BxPC-3和PANC-1生长抑制及诱导细胞凋亡作用,探讨西达本胺抗胰腺癌的机制。方法:西达本胺处理BxPC-3和PANC-1细胞后,用流式细胞术检测细胞的凋亡率,用罗丹明123和DCFH—DA染色方法测定细胞线粒体膜跨膜电位变化和活性氧(ROS)的产生,用Western印迹检测Bcl-2家族和γH2AX蛋白表达的变化。结果:西达本胺对胰腺癌细胞BxPC-3和PANC-1具有生长抑制和诱导细胞凋亡的作用,且呈时间和剂量依赖关系;处理72h后,胰腺癌细胞内ROS产生增强导致DNA损伤发生,且线粒体跨膜电位明显下降;促凋亡蛋白Bax的表达,抑制抑凋亡蛋白Bcl-2和Mcl—1的表达。结论:西达本胺具有抑制胰腺癌细胞增殖,诱导细胞凋亡的作用;西达本胺增强胰腺癌细胞内ROS的产生并导致DNA损伤,最终诱导细胞凋亡的发生。 相似文献
738.
739.
摘要 目的:探讨对心力衰竭后室性心律失常患者应用参松养心胶囊联合胺碘酮进行治疗的效果。方法:选择150例心力衰竭后室性心律失常,根据随机数字表法,将150例患者分为A组、B组、C组,每组50例。所有患者均行常规抗心力衰竭治疗,A组患者给予参松养心胶囊治疗,B组患者给予胺碘酮片治疗;C组给予胺碘酮片联合参松养心胶囊治疗。对比三组的疗效,对比三组治疗前后的心功能指标、24 h动态心电图指标、心率变异性指数,对比三组治疗过程中的不良反应发生情况。结果:C组治疗有效率明显较A组、B组高(P<0.05),A组、B组间对比无统计学意义(P>0.05)。与治疗前相比,A、B、C三组的LVDs、LVDd降低,LVEF、CO、SV明显升高,且C组较A、B组比较有相同趋势(P<0.05);A组与B组间对比无统计学意义(P>0.05)。与治疗前相比,A、B、C三组的室性心动过速数量、室性早搏数量、QTd明显降低,QTc升高,且C组较A、B组比较有相同趋势(P<0.05);A组与B组间对比无统计学意义(P>0.05)。三组不良反应发生率比较无差异(P>0.05)。结论:与单独应用参松养心胶囊、胺碘酮相比,参松养心胶囊联合胺碘酮会提高疗效,且应用安全,可能与其可改善患者的心率变异性有关。 相似文献
740.