渗透压对血管内皮细胞中NO合成酶活性的影响及其机制研究

目的：研究非等渗压浓度对血管内皮细胞NO合成酶活性的影响,并探索其发生机制。方法：使血管内皮细胞暴露于低渗（205mOsm)或高渗透压（410mOsm)培养液,用Griess法测定NO合成酶（NOS）活性,以Northern blot ting观测细胞iNOS和eNOS基因表达的变化。结果： 非等渗压浓度可使血管内皮细胞中NOS活性显著升高。细胞NOS活性变化具有明显的时间效应规律,低渗透压浓度效应产生的效应早于高渗透压浓度,且低渗透压浓度的影响较高渗透压浓度更为明显。Dexamethasone对这种非等渗透压诱导的NOS活性没有明显作用,给予cycloheximide,不影响非等渗压诱导的这种差异。Nothern blot分析表明：非等渗压浓度不诱导iNOS基因表达,而使eNOSmRNA表达增加。结论：非等渗透压浓度诱导血管内皮细胞NOS活性升高,eNOS基因表达增强是其主要机制之一。     

桉树树干维管形成层和次生韧皮部热致细胞坏死的定量试验

桉树树干维管形成层和次生韧皮部热致细胞坏死的定量试验 桉树(Eucalyptus)树干暴露在森林火灾辐射热中会杀死形成层细胞及其内嵌的再生分生组织,阻止树木萌枝和恢复。目前尚无组织水平的方法来量化热处理对桉树形成层细胞活力的影响。本研究的目 标包括：(1)采用并验证四氮唑还原法检测桉树细胞活力;(2)应用该方法确定斜叶桉(Eucalyptus oblique)形成层细胞活力的阈值水平,进而确定临界温度。采用四氮唑还原法量化该桉树韧皮部-形成层细胞活力。 从斜叶桉成树上切下带有形成层和韧皮部的圆形树皮切片,将质量为1-30 mg不等的样品在20–85°C 的温 度处理中放置1分钟,并在室温条件下在0.8%的2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)中保存20–22小时以检测 细胞活力。用乙醇冷萃取得到1,3,5-三苯基四唑甲臜(TPF),在485 nm处测定吸光度。结果表明,TTC还原 法准确地量化了组织切片(包括维管形成层)中细胞活力随温度升高而下降的情况,并确定60°C 为桉树物种形成层-韧皮部细胞的临界温度。细胞活力按[TPF 处理温度]/[TPF 20°C]计算,在20-85°C之间下降90%。细胞活力结果证实,在50-70°C的温度区间,经过1分钟体外组织加热,桉树的组织坏死显著 增加。TTC 方法显示细胞活力随温度升高而下降,这与温度处理和中性红染色处理后独立获得的活细胞计 数一致。     

水肥耦合对橡胶树产胶量的影响

水分和养分是限制橡胶树生长和产胶量的重要因子.以17年生的7-33-97橡胶树为试验材料,采用施氮量、灌水量、施磷量和施钾量四因素五水平(1/2实施)的二次回归通用旋转设计,通过田间小区试验,研究了不同水肥耦合水平对橡胶树产量和干胶含量的影响,并建立了橡胶树干胶产量的水肥回归数学模型.结果表明：不同水肥耦合水平对橡胶树橡胶产量和干胶含量都有显著影响;各因素对橡胶产量的效应顺序为：施氮量＞灌水量＞施磷量＞施钾量;各因素间耦合效应顺序为：氮、水＞氮、磷＞磷、水＞钾、水,且施钾量和土壤水分呈负交互效应;水肥调控的最佳组合为：尿素用量为476.39 kg·hm^-2,过磷酸钙用量为187.70 kg·hm^-2,氯化钾用量为225.77 kg·hm^-2,土壤相对含水量控制在82.78％左右.     

应用氯化锶对小鼠卵母细胞孤雌活化的研究

目的　探讨小鼠卵母细胞孤雌激活的最佳作用条件。方法　将MⅡ期小鼠卵母细胞随机分为 2组 ,第一组 ,将小鼠卵母细胞分别放入 2、4、6、8、10mmol ml不同浓度的氯化锶激活液中 ,作用 6h ,观察激活率及囊胚发育率。第二组 ,将小鼠卵母细胞放入 10mmol ml氯化锶激活液中 ,分别作用 3、6、9h ,观察激活率及囊胚发育率。结果　第一组 ,激活率分别为 86 49%、82 6 1%、88 0 0 %、86 6 7%、81 18%。各组间差异无显著性。体内培养 72h回收囊胚 ,囊胚发育率分别为 0、31 42 %、43 33%、6 2 5 0 %、5 0 0 0 %。 6～ 10mmol mlSrCl2 激活液激活后囊胚发育率高于 0～ 4mmol ml(P <0 0 5 )。第二组 ,激活率分别为 82 86 %、89 6 1%、91.40 %。 72h囊胚发育率分别为 2 6 5 3 %、5 0 0 0 %、5 3 2 2 %。激活 6、9h的囊胚发育率高于激活 3h的囊胚发育率 (P <0 0 1)。结论　结果表明 ,6～ 10mmol ml的SrCl2 为卵母细胞孤雌活化的最佳作用浓度 ,6～ 9h的激活时间为最佳作用时间 ;表明SrCl2 的浓度和作用时间对小鼠卵母细胞的活化有显著的影响。     

稀土化合物氯化亚鈰对人肺癌细胞PG、人胃癌细胞BGC-823的作用

 以人肺癌细胞 Ｐ Ｇ 和人胃癌细胞 Ｂ Ｇ Ｃ ８２３ 作为研究对象,利用 Ｍ Ｔ Ｔ 测定、３ Ｈ Ｔｄ Ｒ 参入、流式细胞术、软琼脂培养、 Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ、 Ｗ ｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ 等实验方法,观察了稀土化合物氯化亚鈰（ Ｃｅ Ｃｌ３）抑癌作用．结果表明, Ｃｅ Ｃｌ３ 浓度为 ００５ ｍ ｍ ｏｌ／ Ｌ,０１ ｍ ｍ ｏｌ／ Ｌ,０５ ｍ ｍ ｏｌ／ Ｌ和 １ ｍ ｍ ｏｌ／ Ｌ可抑制 Ｐ Ｇ 细胞的增殖;浓度为 ０５ ｍ ｍ ｏｌ／ Ｌ和 １ ｍ ｍ ｏｌ／ Ｌ可抑制 Ｐ Ｇ 细胞 Ｄ Ｎ Ａ 的合成,其 Ｇ１ 期细胞比例增加而 Ｓ期细胞比例减少,在软琼脂中的生长能力降低,原癌基因 ｃ ｍ ｙｃ 和 ｃ ｒａｓ 表达降低,ｐ１６ 蛋白质表达降低．而同样浓度的 Ｃｅ Ｃｌ３ 对 Ｂ Ｇ Ｃ ８２３ 细胞和正常细胞 ２ Ｂ Ｓ未见影响．提示：稀土化合物抑制肺癌细胞 Ｐ Ｇ 的增殖以及降低其恶性度的作用机制可能与一些增殖相关的原癌基因的表达和细胞周期的调控有关,其确切的机理还需进一步的研究．     

基于G4-配体的DNA模拟酶在生物传感中的发展与应用

鸟苷酸-四联体DNA (G4 DNA)是由富含串联重复鸟苷酸(G)的DNA或RNA序列形成的G4片层,并堆叠而成一类独特的核酸二级结构。G4 DNA结合多种特异性配体可形成具有催化过氧化氢活性的G4 DNA模拟酶(G4 DNAzyme)。由于G4 DNAzyme存在着序列构成简便灵活、适合多样传感平台检测等特点,其在新型生物传感方法研发、医学检测新技术研究等领域中应用前景广阔。本文主要依据G4 DNA结合配体的不同,对近年来新发展出的G4 DNAzyme进行分类与回顾,归纳为含氯化血红素(hemin)的G4-Hemin DNAzyme与非G4-Hemin DNAzyme。前者是目前G4 DNA模拟酶的研究主流——本文主要归纳了G4-Hemin DNAzyme在金属阳离子、生物小分子及生物大分子的检测分析方向上所取得的重要研究进展,并阐述其在生物传感领域的影响和优势;后者中的配体则主要包括金属阳离子N-甲基吗啡啉(4-methylmorpholine, NMM)、硫磺素T(thioflavin T,ThT)及新型金属配体(Cu²⁺Ce³⁺)等。...     

微生物对三苯基甲烷类染料脱色的研究进展

三苯基甲烷染料广泛应用于纺织印染、医药、生物染色、造纸、皮革、食品及化妆品等领域, 常见的有作为抗菌剂的孔雀石绿和结晶紫等。由于其特殊的化学结构, 在环境中较稳定且难以降解脱色, 因此其生物脱色降解的研究可为印染废水处理和染料污染环境的生物修复提供理论依据。本文从细菌、放线菌、真菌及藻类等微生物对三苯基甲烷类染料降解脱色研究新进展做综述。通过分析不同微生物脱色三苯基甲烷类染料的中间产物来探讨其降解机理和降解途径, 同时论及功能酶的分离纯化、酶学特性及其编码基因的克隆表达新进展, 并分别从基础理论和应用两方面对微生物降解三苯基甲烷类染料未来的研究方向进行了展望。     

外源氯化胆碱可提高小麦线粒体膜的流动性

分别用ANS、DPH及16 -NS三种不同的标记物标记小麦黄化苗的线粒体 ,研究氯化胆碱 (cholinechloride,CC)对线粒体膜的荧光光谱、平均微粘度 (η )及ESR图谱的影响。结果表明 ,0.21 -1.79mmol·L-1 的CC均能显著降低线粒体膜的荧光强度、η 值及ESR图谱的序参数 (S)和旋转相关时间 (τc) ,表明CC可增加线粒体膜的流动性。为揭示CC的提高植物抗冷机制提供依据     

香蕉束顶病和花叶心腐病的快速测定技术研究

种植无病蕉苗是防治香蕉束顶病和花叶心腐病的根本措施。筛选无病蕉苗的快速测定技术。除可引用2,3,5-氯化三苯基四(氨)唑浸渍徒手切片;在36℃条件下。24小时后:束顶病株叶脉切片的维管束呈现红色,其它组织为红褐色;花叶心腐病株叶脉切片(含维管束)全部呈现黑褐色;而健株叶脉切片由原绿色变成红色,最后褪成无色。此外。也可取叶片主脉的徒手切片,用1％曙红B水溶液染色。健株切片呈桔红色,病株切片呈砖红色,通过镜检:束顶病株叶片切片的表皮下,可观察到围绕在维管束周围成堆的分布有畸形叶绿体细胞团;花叶心腐病的畸形叶绿体细胞团,多分布在薄壁细胞中,且多散生;而健株的切片没有发现这种畸形的叶绿体细胞团,两种方法同样可靠。     

铬对增强心肌细胞抗病毒作用的研究

本文研究了Coxsackie B_2病毒(XOX B_2V)对人及鼠心肌细胞的感染性以及三氯化铬对心肌细胞生长与对病毒感染佳的影响。实验结果证明人心肌细胞对COX B_2 V感染的敏感性比鼠心肌细胞高。三氯化铬能促进人与鼠心肌细胞的生长,促进鼠心肌细胞的搏动及搏动频率加快,并随着培养时间的增加,细胞生长代谢旺盛,细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)的含量升高。用含铬培养液培养的人心肌细胞对病毒感染的敏感性有所降低,人心肌细胞培养液中LDH的含量随病毒对细胞损伤的程度而升高。