用普通琼脂糖代替低熔点胶回收DNA片段

为了建立一种直接从普通琼脂糖凝胶中回收DNA片段的简便实用的方法,采用聚合酶链式反应扩增人P53基因外显子7、8和其间的内含子7序列,用普通琼脂糖凝胶电泳,直接从凝胶中切下产物带,用加热熔化法回收DNA;紫外比色法测定回收率;用测序法鉴定回收产物质量。并用QIAquick Spin纯化柱对照。结果表明,本法回收的产物质量明显优于用QIAquick Spin柱回收,本法回收的产物用于测序效果极佳,回收率达80％,用QIAquick Spin柱回收率不到20％,差异非常显著（P<0.01）。证明这种方法回收PCR产物质量可靠,能代替低熔点胶回收DNA,有较大的实用价值。 Abstract： In order to find a simple and efficient method to isolate single or double?strand DNA fragment amplified by polymerase chain reaction (PCR),we used PCR method to amplify exon 7,exon 8 and intron 7 of human P53 gene, electrophoresis to identify products,fusion and phenol-chlorofom extraction (FPC) to isolate specific DNA from agarose gel,ultraviolet colorimetry to deteminate collected rate,and direct sequencing to identify the quality of recollected DNA. A control test was also made by using QIAquick Spin Colum．The results showed that the quality of PCR products recollected by using FPC method was very good．When the recollected DNA was used in sequencing,no matter what was single or double-strand DNA,the sequence data was clear and even,with low noise．The recollected rate of using FPC,which was over 80 per cent, was higher than that of using colum (lessthan 20 per cent), there were statistical significances (P<0.01).In the control test, it had a little non-specific DNA in the collected products,and the sequencing experiment of using double-strand products was failure．All above mentioned suggested that general agarose gelis efficient in place of low melting-temperature for isolating DNA fragment．     

洋葱根端分生组织细胞核中RNA多聚酶Ⅱ转录位置的研究

采用溴尿嘧啶核苷三磷酸(BrUTP)标记技术,对洋葱(Allium cepa L.)根端分生组织细胞核中RP Ⅱ转录位置进行了研究。经BrUTP和抗BrdU抗体标记后,在电镜下观察到染色质区域周边部位存在大量的金颗粒,该区域金颗粒数目占细胞核内非核仁区域金颗粒总数的92.70%,金颗粒密度为75.42个/μm~2,明显高于染色质问区域和染色质区域中央部位的金颗粒数目的百分比(分别为1.93%和5.37%)和金颗粒密度(分别为2.00个/μm~2和5.89个/μm~2),说明在染色质区域周边部位进行着旺盛的RPⅡ转录位置。经α-鹅膏蕈碱(10μg/L,2h)处理后,非核仁区域金颗粒的减少极其显著,其金颗粒密度从44.60个/μm~2降至2.67个/μm~2,进一步确认该区域中的金颗粒代表RPⅡ转录产物。讨论了完整植物细胞核内RPⅡ转录位置的分布。     

季节和地理差异对天然黄檗小檗碱和药根碱含量的影响

用高效液相色谱法测定了黄檗根皮、茎皮、多年生枝皮、1年生枝和叶片中小檗碱和药根碱的含量,研究黄檗不同部位两种生物碱的季节和地理差异。结果表明:不同季节,天然黄檗各部位的小檗碱、药根碱含量均表现为:根皮茎皮多年生枝皮1年生枝叶片。小檗碱含量随着季节变化在各部位呈现夏季升高,到秋季下降的趋势。而药根碱在不同部位中的含量随着季节变化的规律不同。根皮、茎皮中的药根碱含量随着季节推移逐渐增多,在夏季升高不明显,而到秋季大量积累。多年生枝皮、1年生枝、叶片中的药根碱在3个季节表现则为先降后升。从纬度水平上看,不同地域间黄檗各部位的生物碱差异显著,在调查的40°—50°N范围内,黄檗两种生物碱的含量普遍在纬度低的地区较高,随着纬度增大先逐渐降低,到N44°左右达到最低值,到了高纬度地区略有回升。     

野生与栽培甘草不同部位甘草酸分布特点及其意义

研究了乌拉尔甘草（Glycyrrhiza uralensis）不同部位的甘草酸分布特点及动态变化。野生及栽培甘草地下部分甘草酸含量较高,其中不定根中甘草酸含量与主根接近。野生甘草与栽培甘草地下部分甘草酸含量的月变化规律相似,且根茎中甘草酸含量比主根、不定根变化幅度大。在一个生长季中,栽培甘草主根甘草酸以10月份含量最高,表明秋末是最佳采收期。栽培甘草主根在1．0m土壤深度甘草酸含量较高且有继续增加的趋势,故直接播种方式种植甘草不利于根系采收,造成资源浪费,需要探索更有效的甘草栽培技术。     

克雷伯肺炎杆菌1,3-丙二醇氧化还原酶基因克隆及表达条件研究

1,3-丙二醇氧化还原酶是甘油歧化为1,3-丙二醇的一种关键酶。本研究从克雷伯肺炎杆菌(Klebsiella pneumoniae)基因组中,用PCR方法克隆了其编码基因dhaT。TA克隆测序正确后,构建胞内表达载体pET-28a-dhaT和分泌表达载体pET-22b-dhaT,然后转化E.coliBL21(DE3)进行原核表达。表达部位确定、SDS-PAGE和酶活分析表明,该酶得到了高水平表达。其中使用pET-22b表达的目的蛋白大都是不溶的包涵体;而使用pET-28a表达的目的蛋白胞内可溶,占胞内可溶总蛋白的45%,占菌体总蛋白的25%。常规(30℃)诱导表达即呈现1,3-丙二醇氧化还原酶活性,但低温(20℃)14 h诱导显示3.7倍的酶活性。     

RP-HPLC测定杭白芷不同部位5种香豆素的含量

目的:通过高效液相色谱测定栽培杭白芷不同部位中5种香豆素的含量,为合理利用栽培杭白芷资源提供依据.方法:采用Phenomenex Gemini C18(250 mm×4.60 mm,5μm)色谱柱;流动相为甲醇-水(70:30),流速0.8 mL·min-1,柱温30℃;UV检测波长310 nm.结果:栽培杭白芷不同部位的5种香豆素的含量差异显著.结论:栽培杭白芷的根中5种香豆素的总含量最高.     

大豆蚜触角嗅觉感器结构及其功能

采用扫描电镜观察大豆蚜Aphis giycines各型触角上嗅觉感器的细微结构,结合触角电位记录,发现大豆蚜有翅孤雌生殖蚜对萜烯衍生物的感受部位在第6节原生感器上,而萜烯烃类则在第5节原生感器上,两原生感器都对绿叶气味和芳香类起嗅觉反应。末端2节上还有其它化学感器对植物气味起反应。因此,各型对植物气味的感觉部位在末端2节上。各型对报警信息素的作用部位主要在第6节原生感器上,无翅型第5节原生感器和有翅型第3节次生感器也有一定的感觉能力。     

Cover story

Axonal regeneration in adult nervous system is the major barrier for successful recovery after central nervous system trauma. Poor regeneration of the adult nervous system is attributed to the low intrinsic regenerative capacity of adult neurons and the presence of an inhospitable environment at the injury site. To date,     

煤矸石山上不同种植年限和生长期香根草各部位全氮含量及其分配比例的比较

为了探明香根草〔Vetiveria zizanioides(Linn.)Nash〕在尾矿生态系统恢复中的作用机制,以贵州省六盘水市大河煤矿煤矸石山种植3、6、8和13 a的香根草为研究对象,分别在返青期、快速生长期、成熟期和枯黄期对香根草根、茎、叶和全株的全氮含量及其分配比例进行了比较.结果表明:在种植3、6、8和13 a,香根草根、茎、叶和全株的全氮含量均在快速生长期最高,并显著高于其余生长期.随种植年限增加,返青期、成熟期和枯黄期根的全氮含量,枯黄期茎的全氮含量以及返青期全株的全氮含量均逐渐升高;返青期茎和叶的全氮含量逐渐降低;快速生长期根的全氮含量,快速生长期和成熟期茎的全氮含量以及快速生长期、成熟期和枯黄期叶和全株的全氮含量先升高后降低,并在种植8 a最高.在种植6、8和13 a,快速生长期根的全氮含量分配比例最低,而快速生长期叶的全氮含量分配比例却最高.随种植年限增加,返青期根的全氮含量分配比例逐渐升高,而返青期茎和叶的全氮含量分配比例却逐渐降低;在种植8 a,快速生长期、成熟期和枯黄期根的全氮含量分配比例以及枯黄期茎的全氮含量分配比例最低或较低,而快速生长期和成熟期茎的全氮含量分配比例以及快速生长期、成熟期和枯黄期叶的全氮含量分配比例最高.在相同种植年限和生长期,香根草茎的全氮含量及其分配比例明显低于根和叶;总体来看,返青期、成熟期和枯黄期根的全氮含量及其分配比例高于叶,而快速生长期根的全氮含量及其分配比例却低于叶.研究结果显示:随着种植年限增加和生长期推移,香根草能够合理分配氮素资源,使其在煤矸石山立足,据此认为,香根草可用于煤矸石山的生态恢复和植被重建,但种植年限不宜超过8a.     

北草蜥主要贮能部位水分含量和能值的变化

研究了安徽滁州北草蜥（Takydromus septentrionalis）成体在2000年3～9月份主要贮能部位水分含量和能值的变化：①躯干,肝脏水分含量两种差异显著,尾部水分含量两性差异不显著;躯干、尾、肝脏水分含量月间差异显著。②雄性成体的躯干、脱指躯干、尾和脱脂尾能值显著高于雌性成体,肝脏能值显著低于雌性成体;躯干、尾、肝脏、腹脂肪体能值月间差异显著。结果分析表明,北草蜥躯干、尾、肝脏及腹脂肪体能值的季节变化与繁殖和冬眠密切相关。