鸭肝N－乙酰氨基葡萄糖结合蛋白的分离纯化

鸭肝Ｎ－乙酰氨基葡萄糖结合蛋白的分离纯化李溪冰,邵东敏,顾建新（上海医科大学生物化学教研室,２０００３２）关键词Ｎ－乙酰氨基葡萄糖结合蛋白;亲和层析动物凝集素作为广泛分布于各种组织及细胞中的能与糖特异结合的蛋白质,其重要性正日益受到重视,对其在体内及...     

过表达氨基葡萄糖脱氨酶对大肠杆菌氨基葡萄糖合成及中心碳代谢的影响

考察过表达氨基葡萄糖脱氨酶对氨基葡萄糖合成及大肠杆菌（Escherichia coli）中心碳代谢的影响。实验结果表明：过表达氨基葡萄糖脱氨酶使得在36 g/L葡萄糖,pH为9.0的发酵条件下,发酵24 h后,重组菌发酵液中氨基葡萄糖、丙酮酸和乙酸的量分别是对照菌Rosetta的2.1、1.48和1.74倍;而乳酸的量为2.53 g/L,对照菌Rosetta发酵液中的乳酸含量未检测到,重组菌发酵液中柠檬酸及α-酮戊二酸的含量分别是Rosetta的2.99和2.73倍。     

N-乙酰氨基葡萄糖转移酶-V过表达对人肝癌细胞迁移及粘附分子表达的影响

为了探讨转染N-乙酰氨基葡萄糖转移酶Ⅴ(GnT-V)正义cDNA后对7721细胞迁移影响及其机制,我们研究了GnT-V/7721和pcDNA3/7721(对照组)两株细胞的迁移力及其与侵袭转移能力密切相关的细胞表面重要粘附分子整合蛋白和E-钙粘蛋白的表达情况.通过琼脂滴法检测两株细胞的迁移力;间接免疫荧光法测定细胞表面整合蛋白α5和β1的含量及用RT-PCR方法检测细胞整合蛋白α5和β1的mRNA水平;免疫细胞化学ABC法检测了细胞E-钙粘蛋白表达水平;Western杂交方法检测β-连环蛋白含量.结果发现,7721细胞经转染GnT-V cDNA后,迁移力明显增高;整合蛋白α5亚基的含量比对照组增加2.9倍;β1亚基未见明显变化.α5亚基mRNA水平为对照细胞的2.1倍,β1亚基的mRNA含量无明显改变.GnT-V/7721细胞E-钙粘蛋白及β-连环蛋白表达也有不同程度的升高.本文结果提示与N-糖链加工有关的GnT-V过表达,可促进7721细胞表面整合蛋白的表达以及E-钙粘蛋白β-连环蛋白的表达,从而增加肿瘤细胞的迁移能力.     

链霉菌J-13-3中的第19家族壳多糖酶

壳多糖酶(几丁质酶)[EC3．2．1．14]水解壳多糖的β-1,4-键,产生N-酰氨基葡萄糖(GlcNAc)和(GlcNAc)2。根据催化结构域氨基酸序列的相似性,壳多糖酶分别属于18和19家族的糖基水解酶。除了一些链霉菌和气单胞菌等的壳多糖酶属于19家族外,所有细菌的壳多糖酶都属于18家族糖基水解酶。大多数19家族的壳多糖酶是在植物中发现的,除了降解壳多糖还可以抵抗真菌的侵染。     

N—乙酰氨基葡萄糖转移酶—V过表达对人肝癌细胞迁移及粘附分子表达的影响

The purpose of this paper is to study the effect of N-acetylglucosaminyltransferase V (GnT-V) overexpression on the migration of 7721 cells and its mechanism. The abilities of migration of both 7721 cells transfected with GnT-V cDNA and 7721 cells transfected with pcDNA3 was detected, the expressions of integrin and E-cadherin which are important adhesion molecules on surface membrane and closely related to the abilities of invasion and metastasis. Cell migration abilities were measured by the agarose drop explant method. Flow cytometric analysis (FACS) was applied to determine the relative amounts of integrin alpha 5 and beta 1 subunits on the cell surface while RTPCR was carried out to determine the expression of their mRNA. The expression of E-cadherin was examined by the immunocytochemical ABC method. Western blot analysis was carried out to examine the expression of beta-catenin. GnT-V overexpression enhanced evidently the migration ability of 7721 cells and increased the amount of integrin alpha 5 subunit to 2.9 times of that of control while the amount of beta 1 subunits was not significantly changed. Besides, the expressions of E-cadherin and beta-catenin were enhanced at different levels in GnT-V/7721 cells compared with mocked. The results suggested that the overexpression of GnT-V related to the production of N-linked sugar chains could promote the expressions of integrin, E-cadherin and beta-catenin on 7721 cells so that the migration ability of tumor cells was enhanced.     

《猪毛制备氨基酸》简介

《猪毛制备氨基酸》是武汉大学生物系编写的一本氨基酸生产技术资料专集。约20万字。第一篇为《氨基酸的制备》。共分六章,分别介绍了胱氨酸、精氨酸、谷氨酸、亮氨酸、半胱氨酸盐酸盐和N-乙酰半胱氨酸等7种氨基酸的制备方法和检验方法。第二篇为《氨基酸的化学、分类及应用》,共分三章,第一章介绍了氨基酸的化学性质和物理性质。第二章对常见的二十种氨基酸进行了分类,逐个介绍了制备方法、性质及检验方法。第三章介绍了氨基酸广泛应用于医药、食品、工业和农业领域情况。该书有以下几个显著特点：     

非天然氨基酸3-(4-噻唑基)-D,L-丙氨酸盐酸盐的合成

合成了非天然氨基酸 3- ( 4 -噻唑基 ) - D,L -丙氨酸盐酸盐以及三个中间体 ,其结构分别通过红外光谱、核磁共振、元素分析、熔点等测试手段得到确证     

D-赖氨酸盐酸盐的研制

报道了一种由L-赖氨酸盐酸盐制D-赖氨酸盐酸盐的方法     

66.5%霜霉威盐酸盐水剂在黄瓜中的残留趋势

【目的】对66.5%霜霉威盐酸盐水剂在黄瓜中的安全性进行评价,研究该农药在黄瓜上的残留趋势,为该药在黄瓜上的合理使用及限量标准的制定提供参考。【方法】采用一次性喷撒法进行田间降解动力学试验,施药剂量108.6 g·hm~(-2),施药2次,施药间隔7 d,利用液相色谱串联质谱法对农药残留物进行检测。【结果】黄瓜中66.5%霜霉威盐酸盐水剂添加浓度为0.05、0.15、1.50、5.00 mg·kg~(-1)时,霜霉威盐酸盐水剂平均回收率72%～107%,相对标准偏差1.7%～3.2%。在湖南长沙、广西南宁、浙江杭州这3个试验点,霜霉威盐酸盐水剂在黄瓜上的残留量变化趋势符合一级动力学方程C_t=C_0~(e-kt)。霜霉威盐酸盐水剂在黄瓜上的半衰期T_(1/2)为1.1～4.9 d,属于易于降解的农药(T_(1/2)30 d)。【结论】在黄瓜上使用66.5%的霜霉威盐酸盐水剂的推荐剂量为108.6 g·hm~(-2),施药次数为2次,安全间隔期为7 d,收获时,霜霉威盐酸盐残留量符合标准,可以安全使用。     

几种重金属离子对中华绒螯蟹N-乙酰-βD-氨基葡萄糖苷酶活力的影响

本文研究了Cu2+、Pb2+、Zn2+和Ag+等重金属离子对中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase)活力的影响。其结果表明:Cu2+、Pb2+和Zn2+对酶活力有不同程度的抑制作用,Cu2+和Zn2+对酶的抑制作用均表现为非竞争性抑制类型,Cu2+和Zn2+对酶的抑制常数(KI)分别为1.25mmol/L和8.10mmo/L;Pb2+对酶的抑制作用表现为混合型抑制类型,其对酶的抑制常数KI与KIS分别为10.44mmol/L和2.18mmol/L。Ag+对酶的效应为先激活后抑制,其抑制作用表现为反竞争性抑制,Ag+对结合酶(ES)的抑制常数KIS为204.51mmol/L。