三花枪刀药化学成分研究

由爵床科枪刀药属植物三花枪刀药（Hypoestes triflora）的地上部分丙酮提取物中分离得到了6个化合物,通过波谱分析及晶体X射线分析确定为：尿囊素(allantoin)（1）,β－谷甾醇（2）,胡萝卜甙（3）,硬脂酸（4）,黄木灵(xanthoxylin)（5）和无机盐硝酸钾（6）,这些成分均为首次由该种植物中分离得到。     

P-糖蛋白线粒体转位与线粒体DNA缺失肿瘤细胞多药耐药产生的关系

线粒体DNA缺失细胞(ρ~0细胞)拮抗化疗药物诱导的凋亡,但其确切机制尚不明确。本研究探讨P-gp线粒体转位与人肝癌细胞(SK-Hepl)mtDNA缺失细胞(ρ~0SK-Hep1)多药耐药产生的关系。以SK-Hep1、ρ~0SK-Hep1和转线粒体细胞SK-Hep1Cyb为研究对象,CCK-8方法检测细胞对药物敏感性;AnnexinV/PI双染法及DAPI染色法检测细胞凋亡;Westernblot检测P-gp表达;激光共聚焦显微镜结合免疫荧光检测P-gP细胞内分布。结果显示,SK-Hep1、ρ~0SK-Hep1和SK-Hep1Cyb细胞对多柔比星(DOX)的IC_(50)分别为0.62±0.02μg/ml、4.93±0.17μg/ml和0.57±0.02μg/ml。SK-Hep1、ρ~0SK-Hep1和SK-Hep1Cyb细胞凋亡率分别为1 1.25%±1.36%、4.75%±0.98%和14.50%±1.57%,ρ~0SK-Hep1对细胞凋亡有明显抗性。Western blot检测发现ρ~0细胞内P-gP、Bax、Bcl-2表达增加,Bcl-2/Bax比值增加。免疫荧光共定位显示,ρ~0细胞线粒体内P-gP...     

APC蛋白、GSK3β在吸烟小鼠气道上皮损伤修复中的动态变化

为了探讨结肠腺瘤性息肉病（adenomatous polyposis coli,APC）蛋白、糖原合成酶激酶3β（glycogen synthase kinase3β,GSK3β）在吸烟致气道上皮细胞（airway epithelial cell,AEC）损伤修复中的作用,本实验建立了吸烟导致AEC损伤修复的小鼠模型,采用HE染色、免疫组织化学染色、免疫荧光共聚焦成像和Western blot方法,观察损伤修复过程中APC蛋白、GSK3β在AEC中表达及分布的动态变化.结果显示：（1）随着吸烟时间延长,AEC形态学上呈现损伤（1、4周）、修复（8周）、再损伤（12周）的变化.（2）免疫组化染色显示：AEC中APC蛋白表达在吸烟1周时较对照组明显增强,4周时较对照组明显减弱,8、12周时均较4周时增强但与对照组无差异;对照组GSK3β表达较强,吸烟组表达较对照组均减弱.Western blot检测小鼠肺组织中APC蛋白、GSK3β的表达变化与免疫组化结果一致,磷酸化GSK3β（p-GSK3β）在吸烟组的表达较对照组均有不同程度增高,尤以吸烟1周时明显.（3）荧光共聚焦成像显示：对照组APC蛋白在AEC胞质内均匀分布,吸烟1、8周时APC蛋白定位发生改变,呈簇状聚集于AEC腔面和侧面质膜下;GSK3β在对照组和吸烟组AEC胞质内均匀分布,无定位改变.由上述结果可见,吸烟致小鼠AEC损伤修复过程中APC蛋白表达及在胞质内分布呈动态变化,同时伴有GSK3β表达下调和磷酸化水平增高,提示二者可能通过参与修复过程中细胞迁移、分裂增殖等活动,在气道上皮损伤修复过程中发挥重要作用.     

海芒果叶中三萜类成分的研究

采用多种柱色谱等分离纯化手段对海芒果叶中的三萜类成分进行分离,得到7个化合物,通过理化性质和波谱方法鉴定化合物为熊果醇(1),(23Z)-9,19-cycloart-25-ene-3β,24-diol(2),大戟醇(3),乌苏酸(4),2α-羟基乌苏酸(5),乙酰乌苏酸(6),α-香树脂醇(7)。化合物1～6均为首次从该属植物中分离得到。     

发光管芯引导插管在感染手术气道处理中的应用

目的:观察和评估发光管芯在感染手术患者麻醉常规气管内插管和预测困难气管内插管的适用性与安全性,并比较改变光棒前端弯曲角度的临床实用效果。方法:选择136例ASA I~Ⅲ级全麻下行择期手术的肝炎后肝硬化患者,其中正常气道120例,可顺利气管插管,120例患者按照插管时弯曲光棒角度不同随机分为A组(60°)和B组(90°);困难气道插管患者分为C组(90°)。分别记录各组插管时间、插管次数、插管的成功率、插管期间血流动力学变化以及术后并发症情况,同时测量医生与患者呼吸道之间的距离。结果:A、B和C组的一次插管成功率分别为100%、96.6%和81.2%,时间分别为(12.3±3.8)s、(13.2±4.1)s和(18.2±5.5)s,三组各自的插管总成功率均为100%。而且改变光棒前端角度的A组插管时间均较B、C组短,发现光棒插管对循环功能的影响小,术后并发症少,医生与患者呼吸道之间的距离为(34±4)cm。结论:在感染手术患者气管插管过程中使用发光管芯引导插管成功率高、对患者的循环影响低且术后并发症少,更为重要的是降低了医务人员与传染性患者近距离接触的机率。     

钾通道活化剂对豚鼠气道平滑肌电压依赖性钾通道特性的影响

钾通道活化剂可激活钾离子通道并松驰支气管平滑肌,在急性分离的豚鼠支气管平滑肌细胞上,用膜片钳技术的细胞贴附式和内面向外式研究了其对电压依赖性钾通道的直接作用。结果证实：在全细胞记录条件下,卡吗克林和拉吗克林不影响静息膜电位。但在去极化时可使通道电导从７５．２±５．１ｐＳ分别增大到８５．９±１１．８ｐＳ和８２．１±５．５ｐＳ。通道动力学特性也发生了改变,通道平均开放时间的τｏ２值延长和开放概率显著增加,其中拉吗克林的作用更为强。两者均可诱发通道出现多级开放。表明这两类活化剂可使去极化时钾离子外流增加。     

喹乙醇在鲤体内的药物代谢动力学及组织浓度

采用高效液相色谱法测定了鲤血浆及组织中喹乙醇的浓度。该法采用C18色谱柱,流动相为甲醇-三蒸水(15：85),检测波长为372nm,样品用15％的三氯乙酸沉淀蛋白,离心取上清液进样。该法灵敏、简便、准确、喹乙醇在0．2—25．6μg／mL浓度范围内线性关系良好,检测限为0．04μg／g,平均回收率为85．93％-100．2％,不同浓度水平的日内和日间精密度测定结果均小于10％。以30mg／kg鱼体重的剂量口灌给药,通过对喹乙醇在鲤体内的血药浓度经时曲线过程分析,发现其符合-级吸收-室开放模型,主要动力学参数如下：消除相半衰期T1／2k5．876h,吸收相半衰期T1／2h1．466h,达峰时间Tp3．913h,达峰浓度Cmax30．25ug／／mL,血药浓度-时间曲线下面积AuC406．92mg／L．h;并对用药后组织药物浓度和单次、多次灌药后肌肉中喹乙醇的残留量及以原型排出体外的喹乙醇进行了测定,获得了单次灌药后鲤肌肉、肝脏、肾脏和多次灌药后鲤肌肉中喹乙醇的代谢规律,测得原型药物排出体外的量占总灌药量的6．9％。该项研究全面了解了喹乙醇在鱼体内的药动学特征,对确定合理的临床用药方案以及无公害水产品中药物残留监测提供了可靠的理论依据。     

检测脂肪酸化胰岛素放射免疫分析方法的建立

目的:建立一种高灵敏度、高特异性、操作简单快捷的放射免疫分析法(RIA),用于检测比格犬血浆中的脂肪酸化胰岛素。方法:所用试剂盒主要以豚抗胰岛素抗体为主要特异性试剂,利用均相竞争抑制原理,采用平衡竞争法对比格犬血浆进行直接测定。在该系统中加入未标记的标准品或样品,则标记抗原和非标记抗原将竞争有限且定量的抗体结合位点。结果:建立了检测脂肪酸化胰岛素的RIA法并进行了确证,方法的线性范围为3.125~800μU/mL,最低检测限为3.125μU/mL,批内和批间精密度分别为4.5%~7.0%和3.9%~7.6%,冻融稳定性和稀释稳定性等良好。结论:方法学确证结果表明,本研究建立的脂肪酸化胰岛素RIA检测方法符合新生物制品临床前药代动力学研究指导原则要求,可用于脂肪酸化胰岛素在临床前药代动力学试验的检测。     

葡萄糖神经酰胺合成酶与肿瘤多药耐药

多药耐药（multidrug resistenee,MDR）是肿瘤化疗失败的主要原因,多年来医学界一直致力于多药耐药机制的研究。神经酰胺信号系统在细胞凋亡中的作用逐渐引起人们的重视,神经酰胺是细胞凋亡过程中的第二信使,葡萄糖神经酰胺合成酶（glucosylceramide synthase,GCS）可以催化神经酰胺糖基化,使其转变为无细胞毒性的葡萄糖神经酰胺,进而促进鞘糖脂的合成,大量研究表明细胞内GCS水平的增高与MDR表型有关。     

傣药“雅糯妙”（肾茶）正丁醇部位的化学成分研究

目的：对肾茶正丁醇部位进行系统分离和化合物鉴定,为探索肾茶药理活性物质基础研究奠定基础;方法：采用多种分离纯化技术（硅胶柱层析色谱、反相硅胶柱色谱、SephadesLH-20、半制备型高效液相色谱等）对肾茶正丁醇部位化学成分进行系统的分离纯化,得到单体化合物;运用电喷雾质谱（ESI—MS）、核磁共振氢谱（1HNMR）、核磁共振碳谱（13CNMR／DEPT）和二维核磁共振谱（HSQC,HMBC）对所得单体化合物进行结构鉴定。结果：从肾茶正丁醇部位中共分离得到9个化合物,分别鉴定为：原儿茶酸甲酯（1）、原儿茶醛（2）、原儿茶酸（3）、3,4．二羟基苯乙酸甲酯（4）、3,4一二甲氧基乙酸甲酯（5）、2,5-二羟基苯甲醛（6）、苯甲酸（7）、咖啡酸（8）、迷迭香酸（9）。结论：肾茶正丁醇部位主要化学成分为酚醛、芳香酸及其衍生物,除分离得到之前献报告的咖啡酸、迷迭香酸等外,还首次分离鉴定4个化合物（1,4,5,6）,其中化合物6为首次从植物中分离得到,并首次对该化合物核磁数据进行了归属;化合物1、4、5均为首次从肾荼属植物中分离得到。