鸡传染性支气管炎病毒S1基因与猪IgG Fc基因在HeLa细胞中的融合表达

根据Genbank中发表的猪IgG Fc段基因及IBV S1基因序列,设计并合成引物。以猪肝组织总RNA为模扩增出猪IgG Fc基因,以含全长IBV M41 S基因的质粒为模板扩增出IBV S1基因,分别克隆至T载体。DNA测序表明,所获得的IBV S1基因大小为1.5 kb,IgG Fc大小为1kb,序列正确。将IBV S1与IgG Fc基因串连,插入含有人组织型纤维蛋白溶酶原激活物分泌信号肽序列(tPA)真核表达载体pcDNA3.1-tPA上,在HeLa细胞上进行瞬时融合表达。经免疫荧光和斑点杂交检测,表达产物同时具有IBV S1蛋白和IgG Fc活性。     

分析植物组织中海藻糖的气质联用及毛细管气相色谱法

介绍一种用1-甲基咪唑为溶剂和催化剂、盐酸羟胺和乙酸酐为肟化和乙酰化试剂,对植物样品中海藻糖等糖类物质进行乙酰化衍生化后的气相色谱分离、质谱鉴定的分析方法.以核糖醇为内标,通过校准曲线对植物组织中的海藻糖进行定量分析.此法测定海藻糖的最低量可达8.17×10-11g,适于植物样品中微量海藻糖的分析测定.     

大鼠肝线粒体中的脂肪酸分析

用双 2 乙基己基酚酞酸酯 (DEHP)诱导大鼠肝过氧化物酶体增殖 ,然后用蔗糖密度梯度离心法分离大鼠肝线粒体 ,用毛细管气相色谱法测定肝线粒体中的脂肪酸含量。测定结果 :所测 1 4种脂肪酸的总量 ,青年正常组大于青年诱导组 (P <0 .0 1 ) ,青年正常组大于老年正常组 (P <0 .0 5 )。不饱和脂肪酸与脂肪酸总量的比例 ,老年诱导组大于老年正常组 (P <0 .0 5 ) ,青年正常组大于老年正常组 (P <0 .0 5 )。长链脂肪酸与脂肪酸总量的比例 ,老年正常组小于老年诱导组 (P <0 .0 5 )。结果表明 ,用DEHP诱导大鼠肝过氧化物酶体增值 ,影响肝线粒体脂肪酸正常代谢 ,使线粒体膜结构发生变化 ,这种变化 ,青年鼠与老年鼠不同     

婴幼儿呼吸道合胞病毒感染的治疗

呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus RSV)是引起婴幼儿毛细支气管炎最重要的病原体。其主要临床表现为喘息。部分患儿可出现反复喘息发作而发展为哮喘。对RSV感染尚无特效治疗药物,仍然以支持对症治疗为主,目前的研究热点是中西医结合治疗,反义基因治疗,高渗盐水雾化吸入治疗等。     

无胶筛分毛细管电泳分离DNA片段的现状与展望

毛细管电泳已DNA片段分离分析的重要手段。本简述了毛细管电泳中采用无胶筛分介质分离DNA片段的机理研究,介绍了筛分介质近年的研究发展状况,依据分离介质的化学组成,分单聚物、共聚物和混聚物等3个部分进行了评述,并对其发展前景进行了展望。     

鸡传染性支气管炎病毒(IBV)广西流行株3'端非编码区序列分析

本研究应用RT-PCR方法扩增出分离自广西的26株鸡传染性支气管炎病毒(IBV)以及参考株M41和疫苗株H120、Ma5和4/91的3'端非编码区(3'UTR)的cDNA,并对其进行了克隆、序列测定、比较及其系统进化分析。序列分析结果表明,与Beaudette株的3'UTR序列相比较,26株分离的IBV中有1株和3株的分离株3'UTR序列分别插入了23个和2个碱基,另外有12株、6株、1株、2株和1株的分离株3'UTR序列分别缺失了1个、2个、22个、29个和84个碱基,不同毒株之间碱基数量最大相差达107个碱基。系统进化分析结果表明,26株分离株可分为4群,其中21株属于第Ⅰ群,与经典疫苗株H120的核苷酸同源性均较低(54.4%～75.5%);3株与4/91同属于第Ⅱ群;1株与H120同属于第Ⅲ群;另外1株单独属于Ⅴ群。综上所述,广西流行IBV的绝大部分毒株在3'UTR序列上与目前常用的疫苗株相比都发生了很大的变异,而且存在多种形式的碱基缺失和插入现象。由此,我们认为流行株的变异可能是疫苗不能提供有效保护的主要原因。     

花粉破壁法对花粉蜂蜜酒中氨基酸含量的影响

以蜂蜜为主料,加入花粉,经过调配、发酵、过滤、陈酿后获得氨基酸含量丰富的酒精饮料。花粉破壁分别采用超声破碎法、酶法和温差破壁法这几种不同方式处理,并添加于蜂蜜发酵液中,经酒精发酵,制得富含活性成分的花粉蜂蜜酒。最后利用毛细管电泳法来测定成品酒中的氨基酸,通过分析优化出最佳的花粉破壁方法。研究结果表明花粉经过温差破壁法处理后加入发酵液中,其成品的氨基酸含量最高。该产品不仅营养价值高,风味独特,而且还具有良好的保健作用。     

毛细管束法分离土壤稀有放线菌

描述了一种改进的从土壤中分离稀有放线菌的毛细管法。本法能在较低的稀释条件下,利用放线荫孢子和孢囊的疏水性、游动孢子在水中的运动性和趋化性(包括趋氧性)。从而大大提高稀有放线菌的检出率。     

3个X-STR基因座荧光标记复合扩增

为研究DXS6803、DXS981和DXS68093个基因座多态性及其在法医学中的应用,建立X染色体基因座（DXS6803、DXS981和DXS6809）的荧光复合扩增体系。用荧光标记引物PCR技术复合扩增3个基因座,并用ABI PRISM 3100毛细管电泳及其软件进行基因分型。结果在中国汉族340名无关男性个体及195名无关女性个体中,DXS6803、DXS981和DXS6809三个基因座分别发现了13、12、11个等位基因,男性个体共检出183种单倍型,单倍型多样性为0．9926。结果表明这3个基因座有较高的多态性信息,在个体识别和亲权鉴定（特别是在缺失双亲的特殊检案）中有重要的应用价值。     

不同表型的重度稳定期COPD患者生活质量和营养状况的比较分析

摘要 目的：分析不同表型重度稳定期慢性阻塞性肺病(chronic obstructive pulmonary disease，COPD)患者生活质量及营养状况差异以指导临床干预。方法：选取上海市杨浦区市东医院2017年1月至2018年6月呼吸内科门诊重度（Ⅲ级）慢性阻塞性肺病的稳定期患者79例，按照临床表型分为慢性支气管炎表型（chronic bronchitis，CB）组（48例）与非CB组（31例），进行肺功能检查和微型营养评定量表（mini nutritional assessment, MNA）、慢性阻塞性肺病评估量表（COPD Assessment Test, CAT ）、改良英国医学研究委员会呼吸困难评级量表(Modified Medical Research Council Dyspnea, MMRC）、日常生活活动能力量表（Activity of Daily Living Scale, ADL）评分，测量握力和患者6分钟步行距离，进行比较分析。结果：COPD非CB组的MNA评分、CAT评分、ADL评分、mMRC评分均优于CB组（P<0.05），6分钟步行距离也优于CB组（t值为2.256，P<0.05）。CB组MNA评分与FEV1/预计值、FVC、6分钟步行距离、ADL评分、握力存在显著正相关性（r值分别为0.441、0.379、0.442、0.511、0.316，P<0.05），与CAT评分、mMRC评分有显著负相关性（r值分别为-0.385、-0.460，P<0.05）；非CB组MNA评分与CAT评分呈显著负相关性（r值为-0.376，P<0.05），而与FEV1、FVC、6分钟步行距离、mMRC评分、ADL评分无显著相关性（P>0.05）。结论：非CB表型的重度稳定期COPD患者的生活质量、营养状况均优于CB表型患者。CB表型的COPD患者可能需要更多的营养支持以改善患者的生活质量。