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141.
PCR-DGGE技术在农田土壤微生物多样性研究中的应用 总被引:43,自引:6,他引:43
变性梯度凝胶电泳技术(DGGE)在微生物生态学领域有着广泛的应用。研究采用化学裂解法直接提取出不同农田土壤微生物基因组DNA,并以此基因组DNA为模板,选择特异性引物F357GC和R515对16S rRNA基因的V3区进行扩增,长约230bp的PCR产物经变性梯度凝胶电泳(DGGE)进行分离后,得到不同数目且分离效果较好的电泳条带。结果说明,DGGE能够对土壤样品中的不同微生物的16S rRNA基因的V3区的DNA扩增片断进行分离,为这些DNA片断的定性和鉴定提供了条件。与传统的平板培养方法相比,变性梯度凝胶电泳(DGGE)技术能够更精确的反映出土壤微生物多样性,它是一种有效的微生物多样性研究技术。 相似文献
142.
变性梯度凝胶电泳法研究断奶仔猪粪样细菌区系变化 总被引:39,自引:4,他引:39
利用PCR和DGGE技术分析了12头仔猪在断奶后其粪样细菌区系的变化。粪样细菌16S rDNA的V6~V8可变区经PCR扩增,扩增产物经DGGE电泳后再进行相似性分析。结果表明,仔猪断奶当天粪样 DGGE谱带少,同窝仔猪间图谱相似。断奶后,随着断奶时间的推移,每头仔猪的DGGE图谱带逐渐增多,变得复杂和多样,仔猪个体间DGGE图谱差异逐渐增大。仔猪是否同窝以及所采食日粮类型对DGGE图谱没有明显影响。相似性分析还表明,日粮中添加寡果糖的仔猪在断奶后第1周,其粪样微生物区系变化迅速,而后缓慢。 相似文献
143.
毛细管电泳在DNA分析中的应用 总被引:3,自引:0,他引:3
简要介绍了CE技术原理,综述毛细管电泳在DNA分子微量检测、片段分离、基因突变及高通量DNA分析与测序中的应用和进展。 相似文献
144.
抗菌肽CM4组分的K562癌细胞染色质DNA断裂作用的SCGE研究 总被引:14,自引:0,他引:14
单细胞凝胶电泳法(singe cell gel electrophoresis,SCGE)是一种快速,敏感的检测单个哺乳动物细胞DNA断裂的技术,也叫彗星实验(comet assay)。此实验首次通过SCGE法观察抗菌肽M4组分对人髓样白血病K562细胞和正常人白细胞核染色质DNA的影响,从而进一步研究抗菌肽抗癌作用的机制。荧光显微镜观察显示经抗菌肽CM4组分处理过的K562癌细胞核染色质DNA出 相似文献
145.
146.
氯化钇和氯化镨引起的人淋巴细胞DNA分子损伤的研究 总被引:10,自引:2,他引:10
用单细胞凝胶电泳法检测了稀土化合物氯化钇和氯化镨对人外周血淋巴细胞的DNA损伤效应。结果表明,与对照相比,3种不同浓度的氯化钇和氯化镨均可引起淋巴细胞DNA受损后DNA迁移率的显著升高,受损伤细胞的百分率与对照差异明显,提示氯化钇和氯化镨具有一定的遗传毒性。 相似文献
147.
免疫蛋白质组学及疫苗靶位筛选 总被引:2,自引:0,他引:2
蛋白质组学自建立起即向生命科学的其他研究领域渗透,形成了多样的交叉学科。免疫蛋白质组学即由蛋白质组学与蛋白质免疫印迹技术相结合而产生的一个新研究方向,在免疫原性蛋白质研究及疫苗靶位筛选中展示出广泛的应用前景。该文就免疫蛋白质组学的形成、主要研究技术体系及其进展、在免疫原性蛋白质鉴定、新型高效候选疫苗靶位发现等方面进行概述。 相似文献
148.
用一高分辨率的凝胶电泳系统从延长破碎时间的蓝藻类囊体膜增溶物中分离出14条绿色的带。按照电泳迁移率的增加顺序,自上而下分别是CPIa,CPIb,CPIc,CPId,CPIe,CPIf,CPIg,CPIh,CPa1,CPa2,CPa3,CPa4,CPa5和FC。CPa1,CPa2,CPa3,CPa4和CPa55种叶绿素蛋白复合体的吸收光谱相似,它们在蓝区的吸收峰位子436nm,而红区的吸收峰则位于670—673nm附近。它们的低温荧光发射光谱亦很相似,其荧光发射峰都位于685nm处。因此它们都属于光系统Ⅱ叶绿素a蛋白复合体.跟传统电泳相比,该系统对光系统Ⅱ的分离能力提高了1.5倍。 相似文献
149.
目的:建立快速高效检测胃癌患者胃癌组织及癌旁正常组织中p16基因突变的方法。方法:采用PCR扩增p16基因第二外显子易发生突变片段,扩增样品纯化后经95℃变性;以毛细管电泳(CE)分析法结合单链构象多态性(SSCP)对60例胃癌患者p16基因突变情况进行分析。结果:分析结果表明只有3例低分化腺癌患者存在基因突变,测序表明p16基因第二外显子碱基序列AGAC发生碱基A丢失。结论:p16基因突变可能导致胃癌的发生,但不起主导作用;CE-SSCP分析方法具有快速、灵敏、准确的特点,可用于胃癌组织中p16基因的突变分析。 相似文献
150.
用毛细管电泳技术检测DNA点突变 总被引:1,自引:0,他引:1
毛细管电泳(CE)是90年代初发展起来的新技术,具有分辨率高、重现性好、灵敏度高、快速和易于实现自动化的特点。后来又发展了激光诱导荧光检测器(LIF),大大提高了分析灵敏度,对微量样品如单细胞分析等,具有很大的优势。通常,利用CE技术可以在20min内分析完成几千个碱基的DNA片段。CE可以应用于DNA点突变的检测,目前在PCR基础上利用CE技术对DNA已知点突变及未知点突变的检测发展十分迅速。1.已知点突变的检测1.1 扩增抗拒突变系统PCR(ARMSPCR)和短串联重复PCR(STRPCR) ARMSPCR和S… 相似文献