实时荧光核酸恒温检测技术（SAT）在甲型流感病毒动物模型检测中的应用

评价实时荧光核酸恒温检测技术（SAT）对H1N1和H3N2两种甲型流感病毒小鼠模型肺组织匀浆液的检测效能。小鼠滴鼻感染不同浓度H1N1、H3N2病毒液30μL,感染96h后取肺组织匀浆液分别进行SAT检测及抗原血凝效价测定。结果表明,SAT检测的病毒拷贝数基本与抗原血凝效价测定结果一致,但灵敏度提高10^4倍。与血凝实验比较,SAT检测具有灵敏度高、特异性强、结果准确、高通量自动化的优势,有利于甲型流感动物模型的建立,为实验室筛选抗甲型流感病毒药物奠定基础。     

病毒样颗粒抗原的表达、纯化、组装和鉴定

病毒样颗粒(Virus-like particles,VLPs)是由一种或多种病毒结构蛋白组装成的的颗粒,具有与病毒颗粒相似的外部结构和抗原性,但不含病毒基因。以预防乙型肝炎病毒、乳头瘤病毒和戊型肝炎病毒感染为目的的三种VLP疫苗已被批准在人体应用。可采用细菌、酵母、昆虫细胞、哺乳动物细胞、植物细胞系统表达VLP抗原。表达的VLP抗原可经裂解、粗提、浓縮和精制四个基本步骤纯化。解聚/重组装处理可能增强VLP抗原的效力和稳定性。在研制和生产VLP疫苗的过程中要对VLP抗原的品质、含量、效力和纯度进行检测。     

Molecular Assessment and Taxonomic Status of the Rapid Racerunner （Eremias velox complex） with Particular Attention to the Populations in Northwestern China

The rapid racerunner,Eremias velox,is a widely distributed lizard from the northern Caucasus across entire Central Asia eastward to China.It is increasingly common to accept E.velox as a species complex in its entire range.To date,published morphological and molecular systematic hypotheses of this complex are only partially congruent,and its taxonomic status and evolutionary history are still far from clear.The mitochondrial cytochrome b gene and12S rRNA sequences were used to evaluate the taxonomy of this complex,with particular attention to the phylogenetic placement of populations in northwestern China.Examination of the phylogenetic analyses recovers seven distinct,biogeographically discrete,and well-supported clades,revealing genetically identifiable populations corresponding to some previously morphology-defined subspecies.Chinese E.v.roborowskii appears to have split from other Central Asian rapid racerunner lizards well before differentiation occurred among the latter taxa.Specifically,we corroborate that there are two subspecies occurring in China,i.e.,E.v.velox and E.v.roborowskii.We recommend a novel subspecific status for the phenotypically and genetically distinct populations in southern Aral Sea region of Uzbekistan previously assigned to E.v.velox.Finally,each of the three independently evolving lineages from Iranian Plateau should be recognized as three species new to science under the general lineage concept.     

一种基于数字免疫原理的伤寒沙门菌高灵敏度检测方法

目的 设计一种基于数字化免疫显色原理的检测方法,实现伤寒沙门菌的高灵敏度快速检测.方法 以伤寒沙门菌为检测对象,选取氨基磁珠对目标细菌进行富集,以偶联特异性抗体的量子点对目标细菌进行特异性荧光标记;设计制作反应腔室,在液相条件下完成对目标细菌的富集和特异性荧光标记;通过荧光显微成像和荧光特征自动提取,实现对目标细菌的"...     

炭疽杆菌检测方法的研究现状与展望

炭疽是严重威胁人类健康的烈性传染病,其病原体为炭疽芽孢杆菌。炭疽芽孢杆菌在我国公布的《人间传染的病原微生物名录》中被列为第二类病原微生物(高致病性病原微生物),其芽孢可作为生物战剂和生物恐怖的原材料,因此,发展灵敏、高效的炭疽杆菌检测方法十分重要和紧迫。按检测的靶标分类,针对炭疽杆菌的检测方法主要有四大类:针对炭疽杆菌芽孢的检测方法,针对细菌繁殖体的检测方法,针对炭疽杆菌基因的检测方法和针对炭疽毒素蛋白的检测方法。其中,针对炭疽杆菌芽孢和细菌繁殖体的检测已经有比较成熟的方法,但其在特异性以及临床的实用性方面难以令人满意;针对炭疽杆菌基因的检测技术在特异性和灵敏度上有较大的提高,但在临床诊断等方面还有欠缺;而针对炭疽毒素蛋白的检测技术的发展,使得直接对炭疽杆菌的主要致病因子的检测成为可能,这对于临床诊断以及流行病学研究具有重要意义。本文对当前炭疽杆菌检测方法的最新进展做了简要的归纳,关注了不同检测方法的适用范围和检测能力,并展望了相关领域的发展趋势,希望能为从事炭疽杆菌检测方法研究的同行提供参考和帮助。     

制作Flash动画检测生理盲点

讨论了一种使用Flash动画检测生理盲点的程序和方法。使用flash动画检测时,人眼与计算机屏幕保持一定的距离,一眼闭合,另一眼正视屏幕中的"十字符号";在"红心黑人组合"移动过程中,人眼会在一定时候产生看不见"人"的现象。在计算机屏幕刻度尺上读出从开始"看不见"到"又看见"之间的距离,得到盲点在屏幕上投射区域的横径。将预设距离与测得的盲点投射区域的横径代入公式,即可得到盲点的实际横径。     

杨梅铜锌超氧化物歧化酶基因(MrCu/Zn-SOD1)的原核表达及活性鉴定

为获得高表达杨梅(Morella rubra)铜锌超氧化物歧化酶(MrCu/Zn-SOD1)的工程菌,本实验采用RT-PCR技术从杨梅果实中分离扩增了MrCu/Zn-SOD1的cDNA序列(456bp),将该基因重组到原核表达载体pGEX-2T中,酶切、测序分析表明,重组质粒pGEX-MrCu/Zn-SOD1结构正确。重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达。IPTG诱导表达分子量约41kD融合蛋白GST-MrCu/Zn-SOD1。诱导表达后的菌体超声裂解液经谷胱甘肽亲和层析纯化,得到高纯度的GST-MrCu/Zn-SOD1。采用氯化硝基四氮唑蓝法和黄嘌呤氧化法分析其活性。结果表明,GST-MrCu/Zn-SOD1具有特异性SOD酶活性。     

《癌症研究》：检测基因变化或可预测乳腺癌

英国一项新研究发现,一个基因的状况与乳腺癌风险有关,通过血液检测可以在乳腺癌发病前数年就探知这个基因的异常变化。将来有望在此基础上开发出预测乳腺癌风险的方法。     

MTT法用于药物对L2细胞毒性的实验研究

目的：评价噻唑蓝（MTT）法检测药物对细胞的毒性作用的可靠性。方法：大鼠肺泡上皮L2细胞以叔丁基对苯二酚（TBHQ）10．100μM,BsO以1-10mM分别处理,用MTT法检测细胞活性、JC-1（5,5’,6,6’-四氯．1,1’,3,3’-四乙基苯并咪唑羰花青碘化物）荧光染料法检测细胞线粒体电位改变、台盼蓝排斥实验检测细胞死亡率,分析各指标的情况。结果：在处理剂量范围,MTT法检测到的光密度（OD）值未能达到一般判断的半数抑制浓度（ic50）水平,最高抑制率仅达到30％左右;台盼蓝排斥试验检测数据表明TBHQ的LC50值为50μM,丁硫氨酸亚砜胺（BSO）为5mM;利用JC-1荧光染料判断的半数凋亡剂量分别为50μM和7mM。结论：MTT法作为最常采用的细胞生长抑制检测手段,但在某些特定实验中可能不能客观地反映细胞的活性,建议多种方法结合进行评价。     

《PLoS综合》：科学家开发出检测流感病毒新技术

日本理化研究所日前宣布,其科研小组开发出一种检测流感病毒的新技术,灵敏度相对大幅提高,可在发病后的很早阶段确认感染。有助于及时防止流感蔓延。