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991.
《微生物学免疫学进展》2016,(2)
目的研究Wnt5a对成骨前体细胞分泌和分化功能的影响,并对其分子机制进行初步探讨。方法 Wnt5a刺激成骨前体细胞(MC3T3-E1)后,用双抗体夹心ELISA法检测细胞上清中骨保护素(Osteoprotegerin,OPG)、IL-6、IL-1β及TNF-α的表达水平;用碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)检测试剂盒及实时定量PCR法检测ALP的表达量及活性;通过实时定量PCR方法检测Ror2基因表达水平,应用Western blot检测细胞JNK蛋白表达变化。结果 Wnt5a抑制了OPG的表达,增加了IL-6的分泌,但并没有改变IL-1β和TNF-α的表达量;Wnt5a上调了ALP的表达量及活性,促进了Ror2基因水平的表达,并上调了细胞内JNK蛋白水平。结论 Wnt5a通过调节成骨前体细胞OPG、IL-6、ALP和JNK的表达和分泌,可加重骨破坏和关节炎症,Wnt5a与类风湿关节炎(Rheumatoid arthritis,RA)骨破坏和关节炎症进展有关。 相似文献
992.
人体内的细胞可以分为生殖细胞和体细胞。生殖细胞能够连续地从一代传到下一代,从这个意义上来讲是"永生"的。体细胞由生殖细胞分化而来,为生殖细胞提供生存环境,并将生殖细胞传给下一代,然后就被丢弃,这是所有的生物体都会衰老死亡的根本原因。干细胞则是生殖细胞的延伸。生殖细胞是如何完全清除环境因素的负面影响并永葆青春的,现在还是一个谜。科学研究的不断进步已经打破了生殖细胞和体细胞的界限,体细胞也可以转化为生殖细胞,这些研究有望揭开生殖细胞的永生之谜。 相似文献
993.
农杆菌转化的小冠花发状根的诱导及其植株再生 总被引:6,自引:0,他引:6
利用野生型发根农杆菌15834菌株感染小冠花15日龄无菌苗子叶和下胚轴切段,建立了高效的发状根培养及其体细胞胚胎发生再生体系。发状根可直接从受伤的外植体表面产生,也能在外植体诱导的愈伤组织上发生,在无外源激素的MS固体和液体培养基上,转化根能自主生长,表现出典型的发根特征。用适宜浓度的乙酰丁香酮处理对数生长期的农杆菌菌液2h,感染预培养2d的子叶获得了最高的转化频率(87.4%)。在附加0.2mgL2,4_D,0.5mgLNAA和0.5mgLKT的MS培养基上,发状根能100%形成胚性愈伤组织,并于含0.5mgLKT,0.2mgLIBA和300mgL脯氨酸的MS培养基上顺序经过体细胞胚胎发育的各个典型时期,转换成完整植株。再生植株除具有发达的侧根外,其它形态特征与未转化植株未见明显的差异,但在获得的5个转化克隆中,其中1个的发状根及其再生植株叶片中有毒物质3_硝基丙酸的含量显著下降,分别为未转化对照的57.68%和58.17%。冠瘿碱纸电泳检测和rolB基因PCR扩增检测均证明农杆菌Ri质粒上的T_DNA已经整合到小冠花转化细胞的基因组中。 相似文献
994.
以DNAStar5.01软件,对鹿源BVDV基因E0蛋白特性进行了分析。结果表明E0蛋白由227个残基构成,等电点为7.61。E0蛋白中有与地衣类植物核苷酸酶的保守区域相似序列,维持催化活性所必需的氨基酸残基区域在28-40和71-89处,催化活性的氨基酸为His30、His79,且该序列高度保守。E0蛋白氨基酸亲水性与抗原性指数成平行相关,BVDV各毒株间非常相似,亲水性与抗原性指数都较高的区域有8-16,23-29,59-67,70-81,96-109,114-122,127-134,137-143,165-172,186-198和213-221,适合研制亚单位基因工程疫苗。 相似文献
995.
996.
997.
应用RNA干扰技术体外抑制兔成纤维细胞HGPRT的表达及其核移植研究 总被引:2,自引:0,他引:2
次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖基转移酶( hypoxanthine guanine phosphoribosyltransferase,HGPRT )的功能缺失与痛风、肾结石和雷纳综合症(Lesch-Nyhan Syndrome)等疾病相关.制作HGPRT基因表达降低的模式动物,将有利于人们对这种疾病的发病机理和治疗做进一步的研究.构建了针对HGPRT基因表达的shRNA干扰载体,并将质粒转染兔成纤维细胞,获得携带该干扰片段的转基因细胞系,经PCR鉴定转基因成纤维细胞克隆阳性率为83.3%.RT-PCR及Western blot检测结果表明转基因干扰成纤维细胞系HGPRT mRNA和蛋白质表达量明显降低.最后,以转基因成纤维细胞进行核移植,囊胚率为27.8%,与正常来源的成纤维细胞囊胚率相比较差异不显著.说明,通过RNAi可稳定干扰兔成纤维细胞HGPRT基因的表达,为进一步通过核移植技术建立HGPRT RNAi转基因兔模型创造条件. 相似文献
998.
999.
对梅花鹿源BVDV基因E0进行了克隆和序列分析。结果表明,梅花鹿源BVDV基因E0的大小为681bp,与报道9株BVDV(VEDEVAC、Bega、C24V、ILLC、NADL、OSLOSS、R1935、SD-1、Y546)和7株猪瘟病毒(ALD、Bres-cia、c、GPE、JL、LN9912、SM)及3株羊边界病毒(BD31、C413、BDVX818)相比,核苷酸序列的同源性依次为98.6%~84.8%、76.1%~74.7%、77.0%~76.7%。梅花鹿源BVDV为Ιb基因亚型。 相似文献
1000.
柑橘与枳属间体细胞杂种再生及其对脚腐病抗性的评价 总被引:3,自引:0,他引:3
Page橘柚 (CitrusreticulataBlanco×C .paradisiMacf.)胚性细胞悬浮系原生质体与枳 (Poncirustrifoliata (L .)Raf.)叶肉原生质体经电场诱导融合 ,4~ 5个月再生 15 0余棵小植株。再生植株根系发达 ,叶片具三叶特征。随机检查 2 0余株再生苗根尖染色体数目 ,表明都为四倍体 (2n =4x =36 )。随机取 7株进行RAPD分析 ,表明被检测植株都为杂种。用引起脚腐病的寄生疫霉菌 (PhytophthoraparasiticaDastar)毒素接种体细胞杂种及双亲叶片 ,结果表明 ,Page橘柚中度感病 ,枳高抗 ,体细胞杂种为抗病类型。 相似文献