桔小实蝇的研究进展

桔小实蝇Bactrocera dorsalis是一种世界性检疫害虫,在我国属于二类检疫害虫。桔小实蝇可危害250多种水果和蔬菜。文章综述了桔小实蝇的危害、分类鉴定、生物学和生态学等的研究进展,并对桔小实蝇的防治措施进行了探讨。     

fruitless在桔小实蝇求偶和交配行为中的作用

【目的】fruitless(fru)是昆虫求偶和交配行为中的关键基因,但是其在桔小实蝇Bactrocera dorsalis中的具体功能尚不清楚。本研究旨在明确fru在桔小实蝇求偶交配行为中的作用,进一步明确fru的生物学意义。【方法】根据NCBI上桔小实蝇fru的预测序列设计两端引物,以桔小实蝇羽化10 d已交配的成虫头部cDNA为模板克隆fru基因的全长cDNA,并对其编码蛋白的结构域进行预测。通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)技术检测该基因在桔小实蝇交配前后表达量的变化。待合成fru基因的dsRNA后,注射到羽化9 d后的桔小实蝇雄成虫腹部进行RNAi,分别于注射后48 h和72 h取样,检测fru基因的相对表达量;并于RNAi后72 h进行求偶交配行为观察,测定桔小实蝇的交配频率和交配持续时间。【结果】克隆获得桔小实蝇fru的全长cDNA,长2 865 bp,编码954个氨基酸,预测蛋白分子量104.1 kD,等点为6.01。该基因所编码的蛋白具有特殊结构域,分别为一个BTB (Broad-complex, Tramtrack and Bric-a-bric)结构域和两个...     

桔小实蝇雌成虫对寄主挥发物β-石竹烯的行为反应

寄主植物挥发性化合物往往对昆虫产卵场所的选择具有重要的影响,为了明确桔小实蝇Bactrocera dorsalis众多寄主中是否存在特定的挥发物能够引诱桔小实蝇雌成虫产卵,本研究对桔小实蝇3种寄主(番石榴、橙子和芒果)果实的挥发物进行了鉴定,并测试了相关挥发物对桔小实蝇产卵行为的影响.研究结果表明3种寄主果实均能引诱桔小实蝇产卵并且β-石竹烯是3种寄主果实中共有的挥发物;Y型嗅觉仪和四臂嗅觉仪测试均表明低浓度β-石竹烯(9 μg/mL)对桔小实蝇雌成虫具有引诱作用,但高浓度β-石竹烯对桔小实蝇没有引诱作用;增加寄主番石榴果实中β-石竹烯的含量也会显著降低果实对雌虫产卵的诱集效果.本研究证实了特定浓度的β-石竹烯在桔小实蝇产卵行为中的作用,为开发该虫防治中的推拉策略提供了一种思路.     

桔小实蝇V-ATPase G亚基基因的克隆及组织表达特异性分析

空泡型ATP酶（vacuolar-type H⁺-ATPase, V-ATPase）作为质子泵几乎在所有的真核生物细胞中发挥重要作用。本研究利用RT-PCR和RACE技术获得了桔小实蝇Bactrocera dorsalis (Hendel)V-ATPase G亚基序列全长, 命名为BdorATPG。测序结果表明, BdorATPG阅读框全长354 bp, 编码117个氨基酸。氨基酸序列比对表明, BdorATPG的N端序列与其他物种的ATPG亚基对应区域具有较高的序列一致性。BdorATPG与拟暗果蝇Drosophila pseudoobscura ATPG亚基的氨基酸序列一致性最高, 为88.9%。三维结构模建结果表明, BdorATPG N端（第1~59位氨基酸）序列为α-螺旋结构, 亲水性和疏水性氨基酸在螺旋两侧呈对称分布。BdorATPG在不同组织中的荧光定量PCR分析表明, BdorATPG在各组织中都有表达, 其中在触角中的表达量最高; 在雄虫生殖节中的表达量是雌虫中的6.04倍。结果提示BdorATPG可能在雄虫生殖生理过程中发挥重要作用。     

榴莲果肉挥发物对橘小实蝇雄虫的引诱作用

【目的】实蝇类雄成虫对某些含有甲基丁香酚或覆盆子酮等特殊化合物的花类具有强烈的趋性。具有强烈气味的水果挥发物对果实蝇属昆虫的引诱作用尚未有研究。【方法】在杨桃园研究榴莲、菠萝蜜、菠萝及番荔枝4种新鲜水果气味对橘小实蝇的引诱作用,利用顶空固相微萃取和气质联用技术(GC-MS)提取并分析榴莲果肉挥发物成分。【结果】结果显示,榴莲果肉挥发物对橘小实蝇雄虫的引诱效果最显著;榴莲果肉挥发物共得到22个峰,鉴别到20种化合物。绝大部分为酯类物质(>90%),少数为醇类(0.50%)、醛类(0.45%)和含硫化合物(4.23%);诱捕试验显示,2-甲基丁酸乙酯对橘小实蝇雄虫的引诱数量显著高于2-甲基丁酸甲酯、丙酸丙酯、二甲基硫醚、辛酸乙酯、己酸甲酯以及榴莲鲜果肉。【结论】本试验结果将为下一步研发高效桔小实蝇引诱剂提供依据。     

桔小实蝇对多杀霉素的抗药性风险评估

桔小实蝇Bactrocera doralis (Hendel)是华南地区果蔬重要害虫,近年来危害严重,对农业造成巨大的经济损失.本研究采用阈性状分析方法,对桔小实蝇敏感品系对多杀霉素抗性进行选育,计算了桔小实蝇对多杀霉素的抗性现实遗传力,评估了抗药性产生的风险.结果表明:经过16代选育,桔小实蝇对多杀霉素抗性增加了7.05倍(LC50从0.60 mg/L增加到4.23 mg/L),现实遗传力为0.1774.结果显示桔小实蝇对多杀霉素抗性发展较慢.     

桔小实蝇国内研究概况

本综述了桔小实蝇的研究概况,包括桔小实蝇的分布、寄主、为害情况、种类、生物学、生态学、生理生化、经济重要性评价、综合防治等方面。     

桔小实蝇对敌百虫抗性稳定性及再增长趋势

通过室内试验,研究了用LC₅₀及LC₉₀两种浓度敌百虫汰选14代建立的不同程度高抗性水平的桔小实蝇Bactrocera dorsalis抗性品系TrR₅₀和TrR₉₀在停止使用药剂后的抗性衰退规律,以及抗性衰退到原有水平的1/3时再用药汰选的抗性再增长规律。结果表明：两抗性品系对敌百虫抗性均不稳定,但抗性衰退速率不同,TrR₉₀完全隔离药剂4代后,抗性已衰退至原有水平的1/3,而TrR₅₀完全隔离药剂7代后,抗性才衰退至原有水平的1/3,但随后两品系抗性衰退均减缓,到19代后抗性均还处于低水平抗性阶段,无法衰退至敏感水平。通过对其抗性衰退趋势进行方程拟合,结果表明两品系抗性衰退均符合S型曲线模型。抗性再增长试验结果表明：桔小实蝇两抗性品系对敌百虫抗性再增长趋势不同,TrR₅₀继续使用药剂汰选,经过6代选育,抗性迅速上升,接近原有的抗性水平,随后保持平稳增长; 而TrR₉₀继续使用药剂汰选,经过9代选育,抗性才迅速上升,经过12代选育,抗性才接近原有的抗性水平。通过对两品系抗性再增长趋势进行方程拟合,结果表明两品系抗性再增长趋势不同,TrR₅₀品系抗性再增长趋势符合逻辑斯蒂模型,而TrR₉₀品系则符合二次曲线模型。     

桔小实蝇雄成虫联系性嗅觉学习

【目的】为了探究桔小实蝇 Bactrocera dorsalis (Hendel)雄成虫的嗅觉学习能力。【方法】本研究采用经典性嗅觉条件反射训练法（classical olfactory conditioning）在室内对固定的羽化后14-17日龄的桔小实蝇雄成虫进行气味与食物的联合学习训练, 即薄荷精油和10%蔗糖溶液联合的奖赏性训练（appetitive conditioning）以及甲基丁香酚(methyl eugenol, ME)和饱和盐溶液联合的惩罚性训练（aversive conditioning）,并以伸喙反射行为（proboscis extension reflex, PER）作为学习与否的判定标准。【结果】经过奖赏性训练后,桔小实蝇雄成虫对薄荷精油的伸喙反射率可从0%增加至68%;而经过惩罚性训练后,桔小实蝇对甲基丁香酚的伸喙反射率可从100%降低至36.54%,且这种伸喙反射率的变化是通过气味条件刺激（conditioned stimulus）和食物非条件刺激（unconditioned stimulus）的对称性联合而产生的。【结论】结果表明,桔小实蝇雄性成虫具有较强的联系性嗅觉学习能力,并且两种刺激的联合是形成学习记忆的必要条件。     

桔小实蝇肌球蛋白轻链2基因的克隆及表达分析

肌球蛋白轻链在生物的运动过程中具有重要作用, 本研究利用RT-PCR和RACE技术获得了桔小实蝇Bactrocera dorsalis （Hendel）肌球蛋白轻链2 (myosin light chain 2, MLC2)的cDNA全长序列, 命名为BdorMLC2。测序结果表明, BdorMLC2开放阅读框全长669 bp, 编码222个氨基酸残基。在线软件SMART分析显示, BdorMLC2具有2个Ca²⁺结合基序（EFh）结构域, 可以结合Ca²⁺, 属于肌钙蛋白C超家族成员。氨基酸序列比对表明, BdorMLC2与其他昆虫的肌球蛋白具有较高的序列一致性, 其中与黑腹果蝇Drosophila melanogaster MLC2的序列一致性高达93.2%。BdorMLC2在不同组织和时期的荧光定量PCR分析表明, BdorMLC2在桔小实蝇雄虫胸部的含量最高, 在前足、中足、后足和翅中也有较高的表达; BdorMLC2几乎在桔小实蝇发育的各个时期都有表达, 刚羽化成虫的表达量显著高于其他发育阶段。结果提示, BdorMLC2可能与桔小实蝇的肌肉收缩运动密切相关。本研究为深入研究桔小实蝇肌球蛋白的功能提供了理论依据。