中国苗族人群中细胞色素P450 2C19基因多态性的研究

为研究细胞色素P4502C19在中国苗族人群中的基因型,采用聚合酶链式反应与限制性内切核酸酶片段长度多态性技术分析了98例无血缘关系苗族人群的基因型。结果显示50人为CYP2C19野生型纯合子（wt/wt）;39人为CYP2C19m1杂合子（wt/m1）;9人为CYP2C19m1突变型纯合子（m1/m1）。与国内外相关报道比较,本实验得出的CYP2C19m1突变频率与文献报道相符。 Abstract：In order to study the cytochrome P450 2C19 gene polymorphism in Miao population, the genotypes of ninety-eight unrelated Miao subjects were studied by polymera se chain reaction and restricted fragment length polymorphism (RFLP). The result s showed that fifty were homozygous for wild-type (wt/wt); thirty-nine wer e heterozygous for the CYP2C19m1 (wt/m1);nine were homozygou s for CYP2C19m1(m1/m1).The frequency of CYP2C19m1 was in agreement with that of other published data.     

CAD与ICAD的最新研究进展

在细胞凋亡中,除了人们早期研究发现的可导致DNA断裂的DNaseⅠ,DNaseⅡ,DNaseγ以及cyclophilins等因素以外,最近人们又发现了一种新的可导致DNA断裂的染色质固缩的分子－CAD及其抑制剂I－CAD,本 文详细介绍了CAD与ICAD的基因结构,分子生物学特性,以及CAD,ICAD之间的相互作用机理,同时对CAD的活化方式及其在细胞凋亡中作用的最新研究进展进行了详细的概述,为以CAD为基础的细胞凋亡研究提供了重要的指导作用。     

穴居狼蛛毒中磷酸单醌酶和核酸酶的研究

本文分别用对硝基酚磷酸酯、3-[32p]标记的RNA和大肠杆菌噬菌体入DNA作底物测定了新疆产穴居狼蛛毒中与核酸代谢有关的酶,发现此毒中含有磷酸单酯酶、核糖核酸酶和脱氧核糖核酸酶。     

CRISPR/Cas9技术在感染性疾病中的应用

成簇的规律间隔的短回文重复序列及其相关蛋白9〔clustered regularly interspaced short palindromic repeat(CRISPR)/CRISPR-associated protein 9(Cas9),CRISPR/Cas9〕是一种新兴的基因编辑技术,与以前的三大基因编辑技术——归巢核酸内切酶、锌指核酸酶和转录激活因子样效应物核酸酶技术相比,其在靶向特异性、操作简便性、治疗彻底性、应用广泛性等方面具有更大的优势和发展潜力。艾滋病、乙型肝炎、疟疾等感染性疾病的治疗一直是医学上的重大难题,科学家正努力尝试利用CRISPR/Cas9技术解决这些医学难题。本文主要综述了CRISPR/Cas9技术在这些感染性疾病中应用的研究进展。     

马尾松毛虫蛋白质、核酸酶和羧酸酯酶与耐药性的关系

马尾松毛虫(Dendrolimus punctatus Walker)幼虫蛋白质含量、羧酸酯酶和多酚氧化酶活力与虫龄大小成正相关;氰戊菊酯处理后,兴奋期的蛋白质含量和羧酸酯酶活力上升,到抑制期均降低到正常虫体的水平,而多酚氧化酶的变动不大。正常虫体中脱氧核糖核酸酶(DNase)和核糖核酸酶(RNase)的活力存在差异:DNase从3—5龄幼虫随虫体增大而上升,到6龄时明显降低;RNase与虫龄大小成负相关;氰戊菊酯处理后,DNase便开始下降并低于正常虫体的水平,而RNase在兴奋期上升,到抑制期下降亦低于正常虫体水平。结果说明,除多酚氧化酶外,蛋白质、核酸酶和羧酸酯酶均与耐药性存在一定的相关性,研制酶的抑制剂具有实用意义。根据毒力测定结果,马尾松毛虫幼虫随虫龄增大而耐药力增加,氰戊菊醋对5龄幼虫是3龄的2.8倍,6龄是4龄的2.3倍。因此,掌握在4龄前进行药物防治是合理的。     

大肠杆菌D－木糖异构酶基因的序列分析

大肠杆菌D-木糖异构酶基因由含D－木糖操纵子的质粒px0100被克隆到pwRl3质粒上。以Bal31核酸酶逐步缩短DNA片段的方法,获得了若干个含有不同大小DNA片段的亚克隆,并在质粒上直接测定序列,从中获得了1．6kbDNA片段的核苷酸全序列。其中包括长度为1320bp编码440个氨基酸的蛋白质。此外,在其5’端尚有209个核苷酸和3’端82个核苷酸,它们分别含有核糖体结合位点SD序列和D－木糖异构酶基因转录终止区。     

在金黄色葡萄球菌核酸酶测活体系中Ca~(2+)与底物DNA的结合

将携带金黄色葡萄球菌核酸酶(SNase)基因的质粒pFOG405转化到大肠杆菌SE6004中,获得分泌表达的SNase,在该酶的测活体系中,观察到激活剂Ca~(2+)与底物DNA微弱结合,引起底物DNA的UV光谱在260nm附近明显下降。在Ca~(2+)浓度为10mM时,底物DNA紫外区CD光谱在270—280nm和210—230nm处〔θ〕值减少,〔θ〕值为零的点从260nm移至257nm。这一结果表明,Ca~(2+)与底物DNA在缺少SNase的情况下仍能结合,引起DNA分子构象变化。     

人工核酸内切酶介导的新一代基因组编辑技术进展

对基因组特定位置进行针对性修饰的实验方法称为基因组编辑技术。近年出现的ZFN、TALEN、CRISPR/Cas等一系列人工核酸内切酶逐渐形成了新一代基因组编辑技术,极大地促进了基因组靶向修饰技术的发展,并在基因功能研究、基因治疗等领域开始发挥巨大作用。文中对这一技术的基本原理、发展历程和应用方式进行了简要总结。     

嗜热古菌Archaeoglobus fulgidus RecJ核酸酶的表达纯化及酶学特征

[目的]克隆表达嗜热古菌Archaeoglobus fulgidus(A.fulgidus)来源的RecJ核酸酶基因(ORF编号AF_0699,NCBI数据库基因登陆号为AF_RS03550),对该重组蛋白的核酸酶活性及酶学特征进行鉴定和分析.[方法]将A.fulgidus RecJ(AfuRecJ)核酸酶在大肠杆菌中...