支原体污染细胞的处理方法

<正> 在细胞培养技术中,支原体污染细胞系是一常见问题。受污染细胞的生长和代谢均受到影响,在用该细胞作免疫学试验时。就有可能产生异常结果.尤其在单克隆抗体制备中,污染支原体的骨髓瘤或杂交瘤细胞会导致融合失败或抗体分泌能力下降以至丧失。支原体污染细胞的危害之大,研究建立控制支原体污染的方法也就受到学者们的关注。     

核酸序列重复片段的统计分析

对核酸序列编码区的重复片段进行了统计分析。发现不同物种的序列具有近似相等的约化重复长度和次数,研究了重复区内碱基分布的特点,并讨论了此结果可能的生物学涵义。     

Digoxigenin标记核酸探针分子杂交技术探讨

Dig标记和检测试剂盒中的封阻试剂配制成0.05%、0.1%、0.3%、0.5%、0.7%、0.9%六种浓度,65～68℃温度时,溶解时间分别为10、15、20、35、40、45分钟;预杂交,在免疫测定中进行封阻,背景反应最小,其次是不预杂交,在免疫测定中进行封阻,再次是预杂交,在免疫测定中不封阻;标记探针保存在-20℃,至少可稳定18个月,同一探针重复使用三次可获得满意效果.以上结果表明,DigDNA标记和检测系统将代替~(32)p标记及其检测系统.     

烟草愈伤组织继代培养与分化期间核酸代谢的比较研究

Changes in the contents of DNA and RNA, RNA species, the synthesis rates of DNA and RNA, and the activity of DNase and RNase were investigated in the callus of tobacco (Nicotiana tabacum L. cv. Willow Leaf) during subculture and differentiation. The contents of DNA and RNA were higher in differentiating callus than that in subcultured callus. After day 12, the contents of DNA and RNA in differentiating callus rose continuously while the contents of DNA and RNA in subcultured callus remained constant. Changes in RNA species and its relationship to total RNA level were also analyzed. At the stage of shoot primordium formation in differentiating callus, the activity of RNase increased markedly and the synthesis rate of RNA increased continuously; while the RNase activity and the synthesis rate of RNA in subcultured callus were much lower during the same period. During the period of shoot growth, the synthesis rate of DNA in differentiating callus was elevated compared to that in subcultured callus. The results above suggested that the metabolism of nucleic acids in differentiating callus was more active than that in subcultured callus.     

小麦中T—2毒素的污染调查

采用酶联免疫吸附测定法(ELlSA),调查了我国部分地区1990年国产小麦T—2毒素的污染状况。调查结果表明,在330份样品中,有264份检出T—2毒素,占样品总数的80％。样品中毒素含量最高达1122．Oppb,平均含量为53．3ppb。在引起食物中毒的48份小麦样品中,检出高含量的T—2毒素(84．5—1064．4Ppb)。我国小麦中T—2毒素的污染水平与小麦赤霉病的流行密切相关。     

水稻普矮病毒基因组第十片段cDNA的克隆及其体外转录

由提纯的水稻普矮病毒(Rice Dwarf Virus,简称RDV)中分离出其基因组dsRNA,以人工合成的分别与RDV第十片段(RDV—S10)3’末端互补的两段核苷酸作为引物,合成并克隆S10全长sDNA,体外转录成RNA。用同位素标记的其cDNA作为探针,打点杂交,能检测出浓度为2xl0-11g的病毒核酸和直接测出1．25×10-4g染病水稻中的病毒核酸。     

用核酸杂交法检查北京地区幼儿园正常儿童尿中人巨细胞病毒DNA

以克隆的人巨细胞病毒(Human Cytomegalovirus,简称HCMV)DNA片段做探针,用核酸杂交方法检查了50例北京地区幼儿园正常儿童的尿标本。查出HCMV DMA阳性者24例,占48％。在两个群体和两个年龄组之间,阳性检出率有显著性差异。利用探针可查出同源DNA5～10pg,而不与其它病毒或细胞DNA杂交。标记不同的探针,使用不同的固定方法,其敏感性不同。此法可在分子水平上查出HCMV基因,比分离病毒更迅速敏感。     

胶州湾污染海域半知菌群体结构多样性时空动态变化及与生境的关系（英文）北大核心CSCD

【目的】揭示胶州湾典型污染海域半知菌群体结构多样性动态变化与生境的关系。【方法】根据以往对近岸污染调查记录,分别确定胶州湾海泊河、李村河入海口为中度、重度污染采样站位,石老人潮间为轻度污染对照站位,利用PCR-DGGE指纹图谱方法,研究该生境半知菌群体结构多样性季节动态变化与污染的关系。【结果】结果证明,污染指标除总氮含量外,其他各项指标含量在三站位的变化趋势为石老人潮间带最低,海泊河居中,李村河含量最高;与石老人站位相比,海泊河、李村河站位污染指标在四季变化较显著。首次证明在重金属和氮磷严重超标的海域,仍存在数量和种类较多的半知菌。PCR-DGGE指纹图谱结果显示,同一站位相似污染程度采样点之间DGGE指纹图谱比较一致,不同站位、不同季节之间指纹图谱存在明显的差异。优势条带割胶测序分析显示,3个站位存在大量的不可培养真菌,青霉属为半知菌优势种,重度污染的李村河入海口除半知菌外,存在较大量的阿米巴虫、腐霉等动物病原菌。【结论】污染海域的半知菌群体结构与生境污染程度及季节具有较密切的联系。