DNA免疫及其在微生物学中的应用

ＤＮＡ免疫是直接将目的基因注入机体以表达目的抗原,并诱生免疫应答的一项新技术。本文对ＤＮＡ免疫技术的起始、目前的应用及发展前景作了综述及评价。     

博安霉素与DNA相互作用的分子机理研究

通过光谱分析,粘度测定及＾１ＨＮＭＲ研究证实,博安霉素（ＢｌｅｏｍｙｃｉｎＡ６,ＢＬＭＡ６）是通过双噻唑其嵌插入碱基对之间与ＤＮＡ结合,同时测定了ＢＬＭＡ６与ＤＮＡ的结合常数,结合位点数并与博霉素Ａ２（ＢＬＭＡ２）,Ａ５（ＢＬＭＡ５）进行了比较,证实了末端胺基对ＢＬＭＡ６与ＤＮＡ结合的贡献,琼脂糖凝胶电泳对ＢＬＭＡ６及其Ｃｕ（Ⅱ）,Ｆｅ（Ⅱ）络合物断裂ＤＮＡ的研究表明,在ＤＮＡ断裂中某种氧自由基的     

用生物素化重组质粒探针检测产蛋下降综合症病毒核酸

用ＥＤＳ－７６标准毒株感染鸭胚后,提取病毒核酸,经ＰｓｔＩ酶切后,与质粒ｐＴ７／Ｔ３α－１９重组,并转化到大肠杆菌ＤＨ５α中,筛选出一个插入片段为３１８ｂｐ的重组质粒,并命名为ｐＴＥＺＰ３。用生物素标记该重组质粒后,分别对正常鸭胚尿囊液、各地分离的ＥＤＳ毒株和禽类易感的几种病毒进行核酸杂交试验,结果该探针对实验中收到的几种ＥＤＳ分离毒均产生阳性反应,而不与正常鸭胚尿囊液和其它几种禽类病毒交;该探针     

Chromosomal localization of ribosomal DNA sequences in an apple rootstock using a digoxygenin detection system

A 6kb rDNA probe comprising the 18S coding plus spacer sequences has been hybridized to the metaphase chromosomes of apple rootstock cultivar MM106 demonstrating the localization of ribosomal gene arrays in the vicinity of the telomeric regions of the short arms of chromosomes 6 and 14.The in situ results using digoxygenin labelling coupled to an alkaline phosphatase immunoassay were confirmed by silver staining for NORs and nucleoli.This study demonstrates the feasibility of molecular cytogenetic analysis of very small chromosomes(1.0-2.7μm） of apple.     

Affinity chromatography—dependent selection （ACDS） of genomic DNA fragments bound specifically to bacterial synthesized Myc／Myn proteins

This paper describes an approach to seek for mouse c-Myc/Myn proteins-bound specific sequences among genomic DNA.cDNA fragment of myn gene was obtained through RT-PCR technique from RNA of NIH3T3 cells.DNA fragments encoding BR/HLH/LZ structure of Myc and Myn proteins were cloned in frame into pGEX-2T vector respectively.Fusion GST-Myc and GST-Myn synthesized in E.coli hosts showed affinity to CACGTG E-box DNA and subsequently interacted with genomic fragments prepared through whole-genome-PCR.A PCR-assisted procedure which combines protein-DNA interaction and affinity chromatography was designed to enrich Myc/Myn bound DNA.At least two genomic DNA fragments obtained exhibit specifical binding capacity to Myc/Myn complex but not to GST alone.Significance of the work and of the technique itself as well asidentification of the DNAs are discussed.     

高效毛细管电泳在DNA序列分析中的应用

高效毛细管电泳在ＤＮＡ序列分析中的应用种康（兰州大学化学系,兰州７３００００）ＡＰＰＬＩＣＡＴＩＯＮＯＦＨＩＧＨ－ＰＥＲＦＯＲＭＡＮＣＥＣＡＰＩＬＬＡＲＹＥＬＥＣＴＣＴＯＲＨＯＲＥＳＩＳＯＮＤＮＡＳＥＱＵＥＮＣＩＮＧ￥ＣｈｏｎｇＫａｎｇ（Ｄｅｐａｒｔ...     

非洲紫罗兰叶片脱分化过程中核酸蛋白质和滨粉含量动态的研究

本文测定了非洲紫罗兰（Ｓａｉｎｔｐａｕｌｔａｉｏｎａｎｔｈａ）叶片脱分化过程中核酸、蛋白质和波粉的含量。结果表明：发生脱分化的叶片中的蛋白质和淀粉含量均低于对照,而ＲＮＡ含量则高于对照,ＤＮＡ含量无明显差异。叶片培养的第一天内,发生脱分化的叶片中的蛋白质含量明显下降,对照中的蛋白质含量上升。脱分化过程中,淀粉含量有一个上升、下降、再上升的变化过程,对照中淀粉含量一直上升。     

原位分子杂交研究肾综合征出血热尸检组织中汉坦病毒M和SRNA的分布

本文以核酸原位分子杂交法研究了国内不同地区ＨＦＲＳ尸检病例组织中病毒ＲＮＡ的分布和定位。结果在１９例病例组织中均可检测到病毒ＲＮＡ。陕西及沈阳地区病例,阳性部位主要是各脏器上皮及实质细胞。江西地区病例,病毒ＲＮＡ主要出现于各脏器组织内血管壁及毛细血管内皮细胞。广州一例,病毒ＲＮＡ主要分布于肝脏灶性溶解性坏死区域,肺泡壁和肾间质血管等部位。病毒ＲＮＡ主要定位于细胞胞浆,呈颗粒状或全浆阳性,也出现于部     

酪氨酸羟化酶基因载体－pCMVTH 质粒的构建及在大鼠骨骼肌内的表达

为用转基因方法治疗巴金森氏病大鼠模型,本研究采用分子克隆技术,将合成多巴胺的关键酶－酪氨酸羟化酶（ＴＨ）的基因,克隆进入以巨细胞病毒ＣＭＶ为启动子的载体质粒内,经限制性内切酶定位分析证实该重组的ＤＮＡ质粒的可靠性。携带ＴＨ基因的ＰＣＭＶＴＨ质粒以ＬＩＰＯ－ＦＥＣＴＩＮ介导,在培养的原代骨骼肌细胞中高效表达。本研究为进一步用转基因的细胞植入脑内以治疗巴金森氏病打下一定基础。