SNP分子标记及其在木本植物遗传育种的应用

木本植物因其生命周期长、基因组杂合度高、基因组较大、遗传背景不清晰等特性,制约了其研究进程。随着现代生物技术的发展,DNA分子标记技术在木本植物研究领域的应用越来越多,其中单核苷酸多态性(SNP)作为第三代分子标记技术以其高效、快速、稳定、可靠等诸多优点得到广泛应用。本文简述SNP标记的特点、开发方法、检测方法及其在木本植物遗传多样性和亲缘关系分析、品种鉴定、连锁图谱构建和辅助育种等方面的研究进展,为更好地应用SNP技术开展木本植物研究提供参考。     

利用ISSR分子标记构建濒危植物水青树核心种质

基于全国26个居群的174份水青树Tetracentron sinense种质,利用14条ISSR引物,采用UPGMA聚类法进行多次逐步聚类,利用三种取样策略(随机取样策略、位点优先取样策略和偏离度取样策略)构建初始核心种质,并将各遗传多样性指标进行比较分析,从而确定构建水青树核心种质的最佳方法。利用14条ISSR引物扩增出180个条带,其观测等位基因数(Na)、有效等位基因数(Ne)、Nei’s基因多样性指数(H)与Shannon信息指数(I)分别为1.6944、1.3912、0.2321和0.3509,说明水青树具有较低的遗传多样性。采用位点优先取样策略构建的核心种质各遗传多样性指数均大于随机取样策略和偏离度取样策略。利用位点优先取样策略构建了78 份核心种质资源,保留了44.83%原种质样品,遗传多样性指数Na、Ne、H和I的保留率分别为98.69%、100.01%、99.27%和98.67%,比较完好地保留了原种质的遗传多样性和遗传变异。因此,位点优先取样策略是构建水青树核心种质的最佳取样策略。     

人γ型基因工程干扰素中残余DNA的检测

采用地高辛标记探针,以核酸杂交法检测人γ型基因工程干扰素(IFN-γ)制品中残余DNA含量,结果表明,自制的二组DNA标准品相应量间显示的色斑相差悬殊,提示高蛋白含量对痕量残余DNA的检测干扰较大,添加IFN-γ的DNA标准品比纯DNA标准品更合理,以此测得各样品均符合WHO要求(<100pg/剂量),方法敏感性为4pg.     

水对生物驻极体猪骨压电系数d_（33）测量影响的研究

研究了水在生物驻极体的压电过程中的作用,通过测量猪肩胛骨和软骨组织的纵向压电系数ｄ３３得出的结论是：水不仅能影响压电系数的测量,而且对压电效应的产生也起很大作用。水的含量及存在状态不同,压电系数也不同。     

渗透促进剂对5－DSA标记裸鼠皮肤角质层影响的ESR研究

通过测定５－唑烷氮氧自由基硬脂酸（５－ＤＳＡ）标记裸鼠皮肤角质层的电子自旋共振（ＥＳＲ）谱,研究某些渗透促进剂如月桂酮（ＡＺ）、油酸（ＯＡ）、丙二醇（ＰＧ）、二甲基亚砜（ＤＭＳＯ）等对裸鼠皮肤角质层的影响。促渗剂处理皮肤后,标记物序参数降低,各向同性超精细分裂偶合常数增大,前者表明保渗剂能够引起皮肤角质层细胞间脂质排列有序性降低,流动性增大;后者表明标记物周围脂质区域极性增大。     

两种非放射性标记方法在染色体原位杂交中敏感性的比较

通过原位杂交比较了地高辛配基和生物素标记探针,检测染色体单拷贝基因的敏感性。结果表明：在打点检测条上地高辛配基可检出３０ｆｇ低限探针ＤＮＡ,生物素为１ｐｇ。经原位杂交地高辛配基可检测出单拷贝基因,生物素未成功。     

普通大麦和球茎大麦抗病种间杂种的产生及其同工酶标记

以二棱大麦（Ｈｏｒｄｅｕｍ ｖｕｌｇａｒｅ Ｌ．）“苏啤１ 号”为母本与四倍体球茎大麦（Ｈ． ｂｕｌｂｏｓｕｍＬ．）“ＧＢＣ１４１”杂交, 并通过幼胚培养获得１１ 株三倍体Ｆ１ 植株． 三倍体Ｆ１ 植株与二倍体母本二棱大麦“苏啤１ 号”回交, 获得７ 株二倍体回交后代ＢＣ１． ７ 个回交后代株系通过大麦黄花叶病病圃鉴定, 其中ＢＣ１－２株系抗大麦黄花叶病． 利用聚丙烯酰胺凝胶电泳对父本、母本和ＢＣ１－２株系进行了同工酶分析,结果表明二倍体二棱大麦与四倍体球茎大麦的过氧化物酶同工酶差异显著,并且在ＢＣ１－２株系幼根的过氧化物酶同工酶谱中,发现一条来自父本球茎大麦“ＧＢＣ１４１”的过氧化物酶谱带,该酶带的相对迁移率（Ｒｆ）为０．４７, 重复性好并且易于检测．由于回交后代ＢＣ１－２抗大麦黄花叶病, 又带有来自球茎大麦特异的幼根过氧化物酶谱带作为易于检测的同工酶标记,因此该回交后代株系可以作为大麦抗病育种工作重要的抗源．     

秦岭大熊猫的嗅味标记与发情场植被调查

在１９９５年春大熊猫发情季节,对秦岭南坡的一个大熊猫繁殖小组的发情场进行了植被以及嗅味树,嗅味标记的调查。     

BAS—时间分辨免疫荧光分析检测丙型肝炎抗体

本文介绍将丙肝抗原包被于微量滴定条孔上,使待测丙肝抗体与生物素化抗人ＩｇＧ产生免疫反应,再与Ｅｕ３＋标记的链亲合素产生亲合反应。将ＢＡＳ引入检测方法中,建立了ＢＡＳ－ＴＲＩＦＭＡ检测抗－ＨＣＶ,提高了检测方法的特异性和敏感性