全文获取类型
收费全文 | 8569篇 |
免费 | 376篇 |
国内免费 | 3649篇 |
出版年
2024年 | 71篇 |
2023年 | 240篇 |
2022年 | 289篇 |
2021年 | 318篇 |
2020年 | 318篇 |
2019年 | 331篇 |
2018年 | 209篇 |
2017年 | 272篇 |
2016年 | 304篇 |
2015年 | 365篇 |
2014年 | 559篇 |
2013年 | 418篇 |
2012年 | 594篇 |
2011年 | 704篇 |
2010年 | 599篇 |
2009年 | 606篇 |
2008年 | 970篇 |
2007年 | 559篇 |
2006年 | 474篇 |
2005年 | 592篇 |
2004年 | 683篇 |
2003年 | 547篇 |
2002年 | 511篇 |
2001年 | 461篇 |
2000年 | 323篇 |
1999年 | 296篇 |
1998年 | 223篇 |
1997年 | 148篇 |
1996年 | 119篇 |
1995年 | 119篇 |
1994年 | 92篇 |
1993年 | 46篇 |
1992年 | 44篇 |
1991年 | 52篇 |
1990年 | 25篇 |
1989年 | 22篇 |
1988年 | 11篇 |
1987年 | 12篇 |
1986年 | 14篇 |
1985年 | 14篇 |
1984年 | 7篇 |
1983年 | 8篇 |
1982年 | 4篇 |
1981年 | 8篇 |
1965年 | 1篇 |
1963年 | 2篇 |
1950年 | 10篇 |
排序方式: 共有10000条查询结果,搜索用时 437 毫秒
101.
人白细胞介素-3基因在酿酒酵母中的分泌表达 总被引:4,自引:0,他引:4
利用PCR突变方法,改造了人白细胞介素-3(hIL-3)cDNA,在成熟蛋白编码顺序5'端前突变入了XbaⅠ酶切位点和酵母类胰蛋白酶加工位点Lys-Arg的密码子。改造后的hIL-3cDNA插入大肠杆菌-酵母穿梭质粒pVT102u/α,使其准确融合于α-交配因子前导序列之后,并置于启动子ADH1调控之下。转化入酿酒酵母宿主菌S-78筛选后,30℃培养48h,上清能明显促进hIL-3依赖细胞TF-1生长。上清中分泌表达的hIL-3经ELISA鉴定并定量,其表达量大于1.0mg/L。~3H-TdR掺入法测定上清中hIL-3活性为1.8×10~3u/ml。 相似文献
102.
运用差异展示分离特异性表达的基因 总被引:3,自引:0,他引:3
在高等生物中含有约100000个不同的基因,其中仅有15%的基因在任何个体细胞中均表达.因此分离特异的目的基因便显得十分重要.差异展示是通过部分扩增mRNA的逆转录产物、经测序胶电泳,分离到差异性表达的基因.它与消减杂交相比是分离特异表达基因的更有效的手段.虽然这种方法在实际运用中存在着这样或那样的困难,但随着对这种技术的不断改进,它将会有越来越广泛的用途. 相似文献
103.
104.
噬菌体短肽库的构建及其随机短肽的多样性 总被引:1,自引:0,他引:1
噬菌体短肽库是将随机合成的寡核苷酸序列通过与单链噬菌体外壳蛋白基因融合,从而将随机短短肽表达于噬菌体的表面,将体外随机化学合成的寡聚核苷酸序列重组到单价噬菌体表达载体,构建了噬菌体短肽库,证明其库容为2×10^7集落形成单位,重组率为93%。 相似文献
105.
应用基因重组技术,把编码EB病毒早期蛋白BCRF1基因重组于真核表达载体pSG5中,并使该基因在乳地鼠肾(BHK)传代细胞中获得良好表达,表达率为0.5%,血清学实验证实,鼻咽癌,类风湿性关节病人和正常人血清中均不同程度地含有IgG/BCRF1抗体,抗体阳性率分别主92%,86%和77%,几何平均滴度(GMT)分别是:1:16.35,1:14.72和1:10.15。两组病人和正常人血清中IgA/B 相似文献
106.
107.
108.
109.
本文综述了近年来对链霉菌酪氨酸酶基因的研究。由酪氨酸酶合成黑色素是链霉菌属各个种的共同特性,并受到酪氨酸酶基因的控制。链霉菌几个种的酪氨酸酶基因已克隆到,其产黑色素的特性使之作为重要的标记基因得以广泛应用,同时,该基因在链霉菌的不同种及不同属的微生物中得到了高水平的表达。链霉菌酪氨酸酶基因表达调控的分子机制也得到较深入的研究。 相似文献
110.
采用基因工程方法制取人胸腺素α原获得成功。用20ug/ml植物血球凝集素(PHA)和500U/ml重组人白细胞介素2(IL-2)联合刺激人胎儿胸腺细胞,从中提取总RNA,经反转录PCR获得了人胸腺素α原cDNA;将之克隆入pUC19中,序列测定表明与已报道序列一致,进一步将之亚克隆入原核表达载体pBV220,转化大肠杆菌DH5a.观察到在不改变氨基酸编码的前提下,增加胸腺素a原上游引物中A、T含量,可以明显提高胸腺素α原的表达量,同时,不同培养基对它的表达也有影响。胸腺素α原在大肠杆菌中以可溶形式表达,不需复性。初步活性测定显示,它可明显刺激人外周血淋巴细胞E-玫瑰花结形成率。重组人胸腺素α原在大肠杆菌中表达,为其临床应用及基础研究奠定了基础。 相似文献