铅致大鼠记忆受损及海马AChE阳性纤维的改变

本实验采用明暗箱被动回避反应和穿梭箱条件性回避反应测定, 探讨了铅对大鼠学习与记忆的损害作用。应用酶组织化学方法观察了铅致大鼠海马的结构改变。行为测定显示, 大鼠饮１０％ 醋酸铅水液之前和之后, 其进洞潜伏期 （ｓｔｏｐｔｈｒｏｕｇｈ ｌａｔｅｎｃｙ, ＳＴＬ） 与对照组无明显差异, 而饮醋酸铅水液后, 其条件性回避反应率（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｅｄ ａｖｏｉｄａｎｃｅ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｒａｔｅ, ＣＡＲＲ） 较对照组明显下降（ｄ４－ ｄ１４, Ｐ＜ ００５）, 表明大鼠饮醋酸铅水液后长时记忆不受影响, 而短时记忆受到损伤。组织化学反应染色显示实验组海马腔隙分子层内ＡＣｈＥ阳性纤维面积百分数较对照组明显减少（Ｐ＜ ００５）, 且纤维变细, 膨体减少。推测铅致大鼠短时记忆能力下降, 可能与海马内胆碱能纤维减少有关。     

第四脑室注射Orexin-A对大鼠饮食摄取条件性位置偏爱的影响

目的:探讨第四脑室注射orexin-A(OXA)对大鼠饮食摄取条件性位置偏爱的影响。方法:将30只大鼠随机分成3组,即对照组,低剂量组和高剂量组,第四脑室分别注射生理盐水(NS)、orexin-A或orexin-A受体拮抗剂SB334867,观察大鼠按压杠杆获取蔗糖的次数和最高频率的变化。再选择30只大鼠,第四脑室注射orexin-A和SB334867,观察大鼠对高脂饮食(HF)食物的摄入量。另选取30只大鼠第四脑室注射orexin-A或SB334867,将大鼠置于条件位置偏爱箱来检测大鼠对HF条件性位置偏爱的变化。结果:与对照组相比,24小时禁食大鼠,第四脑室注射orexin-A,可显著增加大鼠按压杠杆获取蔗糖的次数和最高频率(P0.05)。而SB334867可显著降低大鼠按压杠杆获取蔗糖次数以及最大频率(P0.05)。第四脑室注射orexin-A,可使大鼠HF摄入量显著增加(P0.05),第四脑室注射SB334867,不影响大鼠HF摄入量,但会抑制普通饮食的摄入(P0.05)。第四脑室注射orexin-A能增强对HF饮食位置偏爱性的表达,注射SB334867后会显著抑制大鼠对HF饮食位置偏爱性的表达(P0.05)。结论:第四脑室注射Orexin-A可影响大鼠摄食行为,增加高脂饮食的摄入量,增强对HF饮食位置偏爱性的表达。     

鲆鱼类必需氨基酸的评价比较

为了优化鲆鱼类的营养结构及饲料配制,本文利用氨基酸分析及统计学分析研究了同规格鲆鱼类氨基酸组成模式。结果表明,两者必需氨基酸/总氨基酸为47%~48%、必需氨基酸/非必需氨基酸是87%~93%,相对稳定,符合FAO/WHO氨基酸理想模式;大菱鲆必需氨基酸的组成模式为苏氨酸4.17,异亮氨酸4.06,赖氨酸8.78,苯丙氨酸4.06,蛋氨酸2.72,缬氨酸4.22,亮氨酸8.06,组氨酸2.33,精氨酸5.94。牙鲆必需氨基酸的组成模式为苏氨酸4.10,异亮氨酸4.00,赖氨酸8.85,苯丙氨酸3.70,蛋氨酸2.85,缬氨酸3.95,亮氨酸7.85,组氨酸1.95,精氨酸6.20。鲆鱼类营养价值较高,必需氨基酸组成模式接近。     

咸味觉厌恶模型大鼠鼓索神经对味觉刺激的电生理反应特性

目的:探索大鼠咸味觉厌恶建立后外周鼓索神经(CT)对咸味觉及其他味觉刺激的电生理反应特性的改变。方法:将14只SD成年雄性大鼠分为咸味觉厌恶模型组(CTA)和对照组(n=7/group)。实验第1日给予大鼠30min的0.1mol/LNaCl饮食,随后CTA组和对照组大鼠分别腹腔注射2ml0.15mol/LLiCl和同等量生理盐水。在第2、3和4日,测量两组大鼠每天30min内对NaCl和蒸馏水饮用量。于第4日行为学测试后,分别记录CTA组大鼠和对照组大鼠CT对口内给予系列浓度NaCl溶液、0.3mol/LNaCl与0.1mmol/L阿米洛利(一种舌上皮钠通道阻断剂)混合液和其他四种基本味觉刺激溶液的电生理反应。结果:与对照组相比,CTA组大鼠CT对系列浓度NaCl和其他4种基本味觉刺激的电生理反应特性没有发生明显变化(P>0.05);舌上皮钠通道阻断剂阿米洛利强烈抑制CTA大鼠对NaCl的反应(P<0.01)。结论:条件性咸味觉厌恶模型大鼠CT对各种味觉刺激的电生理反应特性没有发生明显改变。     

脂肪细胞Npy4r促进高脂饮食诱导肥胖

脂肪组织的神经支配与调节在能量代谢稳态的维持中发挥重要作用。神经肽Y(neuropeptide Y, NPY)及其脂肪细胞受体信号通路促进高脂饮食诱导的肥胖,其中NPY受体1(NPY receptor Y1,NPY1R)与受体2(NPY2R)是主要的NPY外周受体。NPY受体4(NPY4R)也在脂肪组织表达,然而尚不清楚其是否参与肥胖的发生发展机制。本研究建立了NPY及其受体的免疫荧光成像技术和脂肪细胞回复性表达Npy4r小鼠。根据对不同部位脂肪组织的荧光显微术观察,发现NPY在肩胛间棕色脂肪和皮下脂肪的围绕血管区域以点状形式表达,NPY系统的各受体在脂肪组织的空间分布上具有明显的组织特异性：NPY1R在棕色脂肪、主动脉周围脂肪和性腺脂肪较为富集,NPY2R在棕色脂肪和主动脉周围脂肪较为富集,NPY4R在棕色脂肪与性腺脂肪较为富集。继而通过比较脂肪细胞回复性表达Npy4r小鼠与全身Npy4r基因静默小鼠在高脂喂食下的体重与糖代谢,发现脂肪细胞Npy4r促进高脂饮食诱导的肥胖(P <0.0001)。本研究明确了NPY及其受体NPY1R、 NPY2R和NPY4R在不同部位脂肪组织的蛋...     

茅台酒糟对关岭牛和杂交牛氨基酸含量的影响

[目的]研究茅台酒糟对关岭牛和杂交牛氨基酸含量的影响,旨在为开发新型饲料资源及茅台酒糟在养牛生产中合理利用提供数据支撑。[方法]选取健康的关岭牛15头、杂交牛10头,关岭牛随机分为3个处理组,分别为对照组、干酒糟组和湿酒糟组,杂交牛随机分为两个组：对照组、湿酒糟组,每个处理组5次重复,每个重复1头牛。短期育肥120d后采集背最长肌测定氨基酸含量。[结果]与对照组相比,茅台湿酒糟能显著提高关岭牛和杂交牛肌肉中氨基酸含量,关岭牛中,苯丙氨酸含量提高了19%,赖氨酸含量提高了17%,苏氨酸含量提高了17.7%,组氨酸含量提高30%,天冬氨酸和酪氨酸含量显著提高了18%、19.5%;杂交牛中,苯丙氨酸的含量极显著提高了15.7%,苏氨酸、亮氨酸含量极显著提高15.3%和13.3%,蛋氨酸、赖氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、组氨酸含量分别显著提高20%、13.4%、10%、11.6%和11.6%,谷氨酸、天冬氨酸、丙氨酸、甘氨酸、酪氨酸含量分别显著提高14.7%、16.4%、13.1%、15.4%和14.2%;湿酒糟组中关岭牛与杂交牛相比,蛋氨酸含量趋势显著高于关岭牛(P=0.086);组氨酸含量显著高...     

基于前额联络皮层脑电信号的海洛因戒断大鼠个体觅药行为状态识别

目的:探究海洛因诱导位置偏爱大鼠不同行为状态下额叶联络皮层(Fr A)无线遥测脑电新的分析方法,以期能精确实时识别海洛因诱导大鼠个体的强迫性觅药行为。方法:清洁级Wistar大鼠30只,于前额皮层行电极埋藏术后,随机分为手术对照组(n=10)和海洛因诱导组(n=20);海洛因诱导组皮下注射海洛因0.5 mg/(kg·d),之后每日递增0.25 mg/kg,连续注射7 d,对照组同时间注射等量生理盐水;利用CPP视频系统结合脑电无线遥测技术,同步记录白-黑箱穿梭、黑箱停留、黑-白箱穿梭、白箱停留四种行为状态下已成瘾大鼠Fr A区脑电信号,辨识原始脑电中含肌电等噪声信号区域,针对性的给以小波分解及振幅阈值消噪预处理,提取不同行为状态下脑电数据的样本熵值及与4个节律频率对应的小波系数标准差值,利用支持向量机算法(SVM)实现对海洛因成瘾大鼠个体不同行为状态的实时识别。结果:SVM对20只经海洛因诱导产生明显药物依赖的大鼠个体白-黑穿梭、黑箱停留、黑-白穿梭、白箱停留四种不同行为状态的实时分类识别率均值都达到80%左右,其中与觅药行为关联最紧密的黑-白穿梭状态实时识别率均值达到83.88%。结...     

条件性RNA干扰技术研究进展

RNA干扰(RNA interference,RNAi)是一种由与靶基因同源的双链RNA引起的,具有序列特异性的转录后基因沉默技术。目前,RNAi已被广泛应用于基因功能的研究中。为了使基因沉默具有时空特异性,可以通过构建基于Cre重组酶的Cre/lox P系统、可被小分子药物诱导的Tet诱导系统以及两者组合形成的高级诱导RNAi系统来条件性的控制小发夹状RNA(sh RNA)的表达,使其靶基因的表达可受外界调控,在特定组织细胞中或者特定的生长发育时期被抑制,从而更好地进行基因功能研究。目前,条件性RNAi基因沉默策略具有多样化,精确性和组合式的特点。本文就条件性RNAi基因沉默技术的多元策略做一综述。     

骨形成蛋白4条件性RNA干扰小鼠的建立

为研究骨形成蛋白4(Bone morphogenetic protein 4, BMP4)在骨骼发育中的作用, 我们以含有LoxPneo的pBSK/U6载体为骨架, 构建小鼠BMP4条件性RNAi(conditional RNA interference), CRNA; 载体(BMP4CRNAi), 经KpnⅠ和AflⅢ双酶切获取针对bmp4并含neo基因的目的干扰片段, 纯化后的目的片段显微注射入0.5 d的FVB/NJ小鼠受精卵, 并植入同期发情的假孕母鼠中, 获取G0代转基因小鼠; 利用PCR对G0代转基因小鼠基因型进行鉴定, PCR阳性的小鼠与FVB/NJ小鼠交配, 最终获取稳定传代的BMP4CRNAi小鼠。稳定传代的BMP4^CRNAi小鼠与成骨和软骨前体细胞表达Cre的转基因小鼠(Col2a1-Cre)交配, 获取BMP4^Col2a1-CRNAi小鼠。分离BMP4Col2a1-CRNAi小鼠原代软骨细胞, 提取总RNA, 利用半定量RT-PCR检测RNA干扰效率。小鼠基因型鉴定结果表明：成功获得条件性RNAi转基因小鼠; BMP4干扰效率检测结果表明：在软骨细胞中BMP4的干扰效率为81％。以上结果表明, 我们成功制备了BMP4^CRNAi小鼠和BMP4^Col2a1-CRNAi小鼠, BMP4^CRNAi小鼠与不同Cre转基因小鼠交配, 可以研究BMP4在不同细胞、组织和器官的功能, BMP4^Col2a1-CRNAi小鼠的获得为研究BMP4在软骨发育中的作用提供了合适的动物模型。     

以更有营养的玉米为目标的基因工程

培养玉米细胞的能力是进行遗传选择的基础。选择遗传变异体的方法参照了微生物学家研究细菌所常用的方法,尽管在细节上是不一样的。 格林与他的同事发现,在培养中加入赖氨酸与苏氨酸,就会抑制玉米细胞的生长。加入某些部分代谢小径是共同的其它氨基酸(如蛋氨酸),或它们的代谢前体就可以解