人类成为造物主？

世界各国的神话传说里,都有一个制造世间万物的造物主。现代科学证明,世间的生物是一步一步地由低等向高等进化而来的,神造万物真的只是人类美好的想象吗?如果真的有那么一天,生命被制造了出来……随着基因科学的逐步发展,一些生物学家企图成为造物主,开始在实验室里制造生命。近年来,人造细胞和人造细菌都获得成功,基     

柽柳金属硫蛋白基因的克隆及序列分析

用木麻黄(Casuarina glauca)的金属硫蛋白基因(metallothionein 1)氨基酸序列对柽柳ESTs序列本地数据库进行tBlastn检索,获得了柽柳金属硫蛋白基因全长cDNA序列,去除polyA后该基因全长366 bp,其中5′非翻译区97 bp,3′非翻译区59 bp,开放读码框(ORF)长210 bp,编码70 个氨基酸组成的多肽,蛋白分子量为6.793 kD,理论等电点为4.99,含10个Cys,集中分布在肽链的N端和C端。BlastP同源性分析表明该基因与花生同源性最高,与小豆同源性最低。该基因的EST序列在GenBank登录(登录号：CV792539)。     

C3d3通过促进脾脏B细胞高表达CXCR4增强hCGβ DNA免疫体液免疫效应

本文旨在探讨分子佐剂C3d3与hCGβ融合在基因免疫中增强抗hCGβ体液免疫效应的机制。分别用质粒pCMV4-hCGB-C3d3、pCMV4-hCGβ和pCMV4免疫BALB/c小鼠,间接ELISA法检测免疫小鼠外周血IgG/IgA类抗hCGβ抗体水平;ELISPOT分析免疫鼠脾脏组织IgG/IgA类抗体分泌细胞水平(ASC);RT-PCR分析免疫鼠脾脏B细胞趋化因子受体表达,RT-PCR和FCM分析CXCR4表达水平;RT-PCR和ELISA检测脾脏组织CXCL12表达水平。结果显示,pCMV4- hCGβ-C3d3免疫组外周血IgG类抗hCGβ抗体水平明显高于pCMV4-hCGβ免疫组;而IgA类抗hCGβ抗体水平在两组间无明显差异。pCMV4-hCGβ-C3d3免疫组脾脏组织IgG类ASCs水平明显高于pCMV4-hCGβ组;两组间IgA类ASCs水平无明显差异。经pCMV4-hCGB、pCMV4-hCGβ- C3d3免疫鼠脾脏B细胞CXCR4表达明显高于对照组;且pCMV4-hCGβ-C3d3组明显高于pCMV4-hCGβ免疫组。CXCR4~ 细胞与ASCs呈正相关,r=0.966,(P<0.05)。pCMV4-hCGβ-C3d3和pCMV4-hCGβ组脾脏组织CXC L12表达均显著高于对照组。结果表明,分子佐剂C3d3与hCGβ基因融合,在基因免疫小鼠后能够显著升调节脾脏ASCs CXCR4表达,从而可能增强抗hcGβ基因疫苗的体液免疫效应。     

热休克蛋白90β在结肠癌组织中的表达及其意义

目的：了解热体克蛋白90β（HSP90β）在结肠癌组织中的表达,并探讨其与肿瘤临床病理特征之间的关系。方法：运用SP免疫组织化学染色方法检测72例结肠癌组织和30例癌旁正常组织中HSP90β的表达情况,分析其与结肠癌临床病理特征之间的关系。结果：HSP90β在结肠癌组织、癌旁正常组织中的表达阳性率分别为30／72（41．67％）、5／30（16．67％）,两者间差异有统计学意义（P〈0．05）,HSP90β的表达水平与肿瘤的病理学分级之间有相关性（P〈0．05）,随着结肠癌分化程度的降低,HSP90β的阳性表达率升高,HSP90β与肿瘤Duke’s分期之间无相关（P〉0．05）。结论：HSP90β在结肠癌组织中的表达阳性率明显高于癌旁正常组织,HSP90β的高表达可能参与了结肠癌的恶性转化,有望作为结肠癌基因治疗的一个新靶点。     

结直肠癌中HSP60和HSP27表达的免疫组织化学研究

目的1观察热休克蛋白60和热休克蛋白27在结直肠癌中的表达及意义。方法：收集结直肠癌80例,其中淋巴结转移40例（转移组）,无淋巴结转移40例（无转移组）;另外,在结直肠癌80例中,有结直肠腺瘤（腺瘤组）以及距肿块15cm以上的正常肠粘膜（对照组）各40例。应用免疫组织化学SP法检测组织中蛋白的表达。结果：HSP60的表达主要定位在癌细胞胞浆,在对照组、腺瘤组、非转移组、转移组中的表达阳性率分别为25％、30％、57．5％、90％,组间比较发现,对照组与转移组、腺瘤组与转移组、转移组与非转移组（x^2=10．912,P〈0．001）的HSP60阳性表达率存在统计学差异;而对照组与腺瘤和非转移组间以及腺瘤与非转移组间无统计学差异。HSP27的表达主要定位在癌细胞的胞浆,在对照组、腺瘤组、非转移组、转移组的表达阳性率分别为5％,35％,50％,90％,组间比较发现,对照组分别与无淋巴结转移组、淋巴结转移组;腺瘤组分别与转移组;非转移组与转移组间存在统计学差异,腺瘤与非转移组间无统计学差异。HSP60和HSP27表达间无统计学相关。结论：HSP27表达可能与结直肠癌发生和转移相关。而HSP60的表达可能在结直肠癌转移中具有重要意义。     

大鼠Otos基因RNA干扰质粒体的构建

目的:构建其基因Otos的RNA干扰质粒载体,为研究Otospiralin在内耳的生理功能奠定基础。方法:在GenBank中查到大鼠Otos基因的序列,输入到相应的设计软件中,以此设计引物序列,经过PCR扩增,酶切后,克隆于pAVU6 27载体并行酶切鉴定。结果:构建的鼠Otos shRNA载体经过测序鉴定,所得和预期相符。结论:重组质粒pAVU6 27-Otos的成功构建为下一步研究打下良好的基础。     

FMR-1基因中CGG重复序列扩增条件的优化

目的:优化PCR扩增条件,建立一种有效检测脆性X综合征的方法。方法:在常规PCR的基础上,采用耐高温酶替代法、碱基替代法,同时加入有机溶剂DMSO等,对表型正常的人群进行FMR1基因CGG重复序列检测。结果:改良PCR法可以提高G C富集区扩增效率,并取得了较好的效果。结论:建立了一种扩增FMR-1基因中CGG重复序列的可行方法。     

金皮猪肉质相关组织学特征与CAST基因HinfI多态性的关系研究

本实验选择具有优良肉质的本地金华猪与肉质较差的引进品种皮特兰猪杂交所产的金皮F2代为研究对象,利用PCR-RFLP的方法检测金皮F2代猪CAST基因型的频率,并以肌球蛋白重链（MHC）免疫组织化学、过碘酸希夫反应和苏木精-伊红等多种组织学方法,研究猪背腰最长肌的肌肉组织学特性,并对其进行图像分析,在此基础上采用SAS分析其相互关系。结果发现．PAS染色后肌纤维可区分为三种类型。PAS阴性（Ⅰ）、PAS反应强阳性（Ⅱ-a）和PAS反应强度中间型（Ⅱ-b）。利用肌球蛋白重链单克隆抗体MHCs和MHCf染色结果表明．金皮F2代杂交猪背腰最长肌MHCs阳性（慢肌）纤维的比例为7．62％,快肌纤维为92.38％。CAST基因的扩增产物具有524bp和632bp两个Hinfl多态性片段,定义等位基因为A（114＋192＋400＋632bp）,B（114＋192＋400＋524bp）。AA、BB和AB基因型频率分别为0．1795、0．5897和0．2308,A和B的基因型频率分别为0．4743和0．5256。AA、BB和AB单型对眼肌面积．系水率、pH值、导电率等参数均无显著的影响。CAST基因的HinfI多态性对肌纤维的轴比有显著影响,AA单型有产生较多轴比较大（近似椭圆形）肌纤维的倾向．而BB则控制形成更多的轴比更小（近似于圆形）的肌纤维。具有AA单型的个体具有更多的肌间结缔组织．而具有BB单型的个体的肌间结缔组织较少．AB单型的个体介于两者之间。