木瓜凝乳蛋白酶的分离纯化及部分酶学性质研究

目的：从木瓜蛋白酶粗酶中分离木瓜凝乳蛋白酶,并对其部分酶学性质作初步研究。方法：采用离子交换层析分离木瓜凝乳蛋白酶,通过温度、Na^ 、Ca^2 及其它金属离子等来研究其对酶性质的影响。结果：经离子交换得到了在PAGE中呈单一区的木瓜凝乳蛋白酶,该酶在37℃保温24h后其活力只有原来的7．5％,低浓度的Na^ 、Ca^2 、K^ 、Cu^2 对其有激活作用。结论：木瓜凝乳蛋白酶的分离纯化及酶学性质都值得进一步研究。     

新型冠状病毒PLpro蛋白酶结构与功能的生物信息学分析

2019年12月,由新型冠状病毒(SARS-CoV-2)引起的新型冠状病毒肺炎(COVID-19)在中国武汉暴发。SARS-CoV-2的基因组编码2种病毒蛋白酶,即木瓜样蛋白酶(Papain-like protease,PLpro)和3C样蛋白酶(3C-like protease)。其中PLpro是SARS-CoV-2复制酶复合体(RC)形成的重要调节蛋白分子,对于病毒基因组转录和复制至关重要。因此,将SARS-CoV-2 PLpro作为药物的靶点对COVID-19的治疗具有积极意义。本研究应用生物信息学工具分析新型冠状病毒的木瓜样蛋白酶的结构和功能,首先利用BLAST和BioEdit获取SARS-CoV-2 PLpro蛋白酶(SC2-PLpro)及其同源蛋白的氨基酸序列,并利用BLAST和MEGA 6.0进行同源性分析。之后,利用ProParam和Proscale分别对SC2-PLpro蛋白酶的理化性质、亲水性和疏水性进行分析。然后,通过SOMPA、ScanProsite和InterPro分别预测SC2-PLpro蛋白酶的二级结构和功能区域,进一步利用SignalP 4.0和TMHMM对SC2-PLpro蛋白酶的信号肽和跨膜区进行分析。最后,通过SWISS-MODEL对SARS-CoV-2 PLpro蛋白酶进行三级结构同源建模。结果显示,对SARS-CoV-2 PLpro蛋白酶与已报道的PLpro蛋白酶进行多序列比对后,发现SARS-CoV-2 nsp3的746~1063段氨基酸与多种冠状病毒PLpro蛋白酶氨基酸序列高度相似。同时,同源性分析发现SARS-CoV-2与蝙蝠冠状病毒的PLpro蛋白酶具有同源性,其中与QHR63299、AVP78030相似性最高。对SC2-PLpro进行理化性质预测结果显示,其由318个氨基酸所组成,为稳定亲水性蛋白。二级结构预测结果显示SC2-PLpro主要含有α-螺旋、延伸链、β-转角、无规卷曲,四种结构贯穿整条氨基酸链。进一步进行功能分析,发现其具有完整的催化三联体、锌结合域、泛素样N末端结构域,故推测该蛋白具有去泛素化的功能。然后,信号肽假说和跨膜结构域分析结果表明,SC2-PLpro既不是分泌蛋白,也不属于跨膜蛋白。本研究提示,生物信息学分析SC2-PLpro为稳定性亲水蛋白,属于非跨膜蛋白,比较保守,具有去泛素化的功能,利用此功能可以进一步规避宿主的固有免疫反应。通过制备PLpro蛋白酶小分子抑制剂,可能有助于治疗新型冠状病毒肺炎。     

皱皮木瓜愈伤组织诱导与快速繁殖

以皱皮木瓜(Chaenomeles speciosa)当年生枝条的茎尖和茎段为外植体进行离体培养与快速繁殖。结果表明: 芽萌发及愈伤组织诱导的最佳培养基是MS+2.0 mg.L^-1 6-BA+1.0 mg.L-¹ NAA; 愈伤组织分化最佳培养基是MS+1.0 mg.L^-1 6-BA+0.05 mg.L^-1 NAA; 芽增殖最佳培养基是MS+1.0 mg.L^-1 6-BA+0.05-0.1 mg.L^-1 NAA, 其增殖系数为6.59; 最佳生根培养基是1/2MS+1.0 mg.L^-1 IAA, 生根率为86.7%; 采用珍珠岩二步移栽, 成活率可达90%以上。     

耐盐园林树种—沂州木瓜

地处黄河入海口的山东省东营市的河口社区,20多年前是无人居住的滨海盐碱滩地,如今已是绿树成荫,芳草花香。1995年被评为国家级住宅示范小区,成为新兴的石油工业城镇。多年来,当地已引种的园林植物有400余种,其中100余种是耐盐碱、适应性强的优良树种。 蔷薇科木瓜属的沂州果用木瓜,在0.3％至0.5％的盐碱土环     

皱皮木瓜开花结果习性观察初报

对长阳所产皱皮木瓜的开花结果习性作了形态上的描述。先开花后展叶,花序为聚伞花序,花果枝为特化的短缩叶丛枝,梨果发育分两个时期:幼果发育期和果实生长期。     

Characters of Cysteine Endopeptidases in Wheat Endosperm during Seed Germination and Subsequent Seedling Growth

The endopeptidases （EPs） in wheat endosperm during seed germination and subsequent seedling growth were characterized by gradient-polyacrylamide gel electrophoresis with gelatin copolymerized into the gel. Four cysteine EPs （EP1, EP2, EP3 and EP4） were detected in wheat endosperm during the 7 d growth after seed imbibition. The results also showed that the activities of all of these EPs increased continuously, and EP2 first appeared and had the highest proteolytic activity among the four EPs in this experimental process. The optimum pH and temperature of all four EPs were 4.0 and 40.0 ~C. All EPs were completely inhibited by 25 μmol/L E-64 and had no good thermal stabilities, especially EP1. In addition, these EPs had different substrate specificities to albumins, globulins, gliadins and glutenins; the main storage proteins of mature wheat endosperm. Among them, EP2 had the highest proteolytic activities on globulins, gliadins and glutenins, and might be the most important and specific EP with potential to be tightly correlated with seedling development.     

木瓜药理成分及产品开发研究进展

为了进一步研究和开发利用木瓜资源,介绍了不同种类木瓜的主要药理成分的功能作用、含量,比较了不同种类的木瓜在营养成分和生物功能物质上的差异,同时对木瓜资源可开发的相应产品进行了简单综述.并针对木瓜资源利用的制约因素进行分析.     

木瓜微粉及其对胆酸钠和重金属吸附特性研究

研究了吸附时间对木瓜微粉吸附胆酸钠的影响,并分别对金属混合液浓度、模拟人体胃肠环境的pH条件、木瓜粉的粒径对木瓜微粉吸附混合液中Cu2+、pb2+、Cd2+、Hg2+的能力进行分析,以明确木瓜微粉及其体外对胆酸钠、Cu2+、Pb2+、Cd2+、Hg2+的吸附特性.结果显示:(1)随粉碎时间的延长,微粉所占的比例增大,粒径分布更加均匀,粉碎过程中存在粉碎一团聚一再粉碎的动态变化.(2)木瓜微粉对胆酸钠的吸附随吸附时间的延长,吸附量显著增加,粗粉和粉碎10、60 min得到的微粉A、C在30 min内对胆酸钠(0.2%)吸附达到了平衡,粉碎30 min得到的微粉B在吸附60 min时对胆酸钠仍有显著的吸附能力.(3)在试验范围内,木瓜微粉B对Cu2+、Pb2+、Cd2+、Hg2+的最适吸附浓度分别为3.00、3.00、1.00、0.01 μg/mL.(4)在pH为7时对Cu2+、Pb2+、Cd2+、Hg2+的吸附率分别比pH为2时高出40.85%、21.07%、27.33%、66.38%.(5)不同粒径的木瓜粉对Cu2+的吸附率随粒径的减小而降低,对Hg2+的吸附率则增加,但对Pb2+和Cd2+的吸附率没有显著差异.研究表明,木瓜微粉在体外具有良好的吸附胆酸钠、Cu2+、Pb2+、Cd2+、Hg2+作用,可广泛用于食品和药品中.     

茎点霉和叶点霉两属的新种及国内新记录种

本文对采自东北地区的115份茎点霉(Phoma)和叶点霉(Phyllosticta)的标本进行分类研究,有新种2个和国内新记录种9个。新种是木瓜生叶点霉(Phyllosticta chaenomelesicola L.Yu et Bai)和草玉铃生叶点霉(Phyllosticta convallaricola L.Yu et Bai)。新种有拉丁文和汉文描述及图。对新记录种作了简要介绍。模式标本保存于沈阳农业大学植保系真菌标本室(HMSAU)。     

木瓜中齐墩果酸的提取分离及含量测定

有渗漉法对木瓜中的齐墩果酸进行了提取,用层析柱法对提取物进行分离,方法较简便。并以标准品作对照,采用薄层比色法对其进行含量测定,该法操作简便,结果稳定。经测定木瓜中的游离齐墩果酸的含量为0．935％。