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132.
转基因动物整合位点的研究进展 总被引:9,自引:1,他引:8
转基因动物整合位点克隆及相关序列特征研究是探索外源基因整合机制和整合稳定性的重要手段。转基因整合位点序列的克隆方法主要有:个体基因组文库筛选法、反向PCR法、热不对称交互式PCR法和质粒回收法。4种方法各有优缺点,可根据不同条件选用。克隆到的整合位点序列表明,整合位点可能存在一定的共同特征。
Integration Sites of Transgenes in Transgenic Animals
WU Bo,ZHU Zuo-Yan
State Key Laboratory of Freshwater Ecology and Biotechnology,Institute of Hydrobiology,
Chinese Academy of Science,Wuhan 430072,China
Abstract:To study the mechanism of transgene ' s integration in the host genome,first step is to clone the integration-site sequence.The method employed for this purpose includes selection from genomic pool,IPCR,TAIL-PCR and plasmid rescued.Different method fits different cases depending on how the transgenics have been produced.The data of integration-site sequences showed some similar features existed.
Key words:transgene; integration site; clone method 相似文献
133.
基因枪的使用方法介绍 总被引:10,自引:0,他引:10
基因枪法是一种新型的遗传转化手段[1-3]。所谓遗传转化是指通过某种途径或技术将外源基因导入受体细胞的基因组中,并使之在受体细胞中表达。人们可利用一个特定的目的基因,如抗虫、抗病基因等进行转化,使转基因植物在保持原有的各种优良农艺性状的同时,又能增加新的目的基因所控制的性状。一般遗传转化主要有两类:一类是农杆菌介导法,一类是DNA直接转化法。DNA直接转化技术包括化学方法和物理方法,如电击、微注射、超声波和基因枪法。基因枪法,又称生物弹法或微粒枪法、微粒轰击法,是依赖高速度的金属微粒将外源基因引入活细胞… 相似文献
134.
135.
Meta分析及其在生态学上的应用 总被引:25,自引:2,他引:23
1Meta分析的概念和它的发展应用Meta分析(Meta-Analysis)是一种定量综合研究结果的方法.这种方法的思想起源于本世纪30年代,60年代用于教育、心理等社会科学领域,1976年由Glas命名为术语“Meta-Analysis”[1]。G... 相似文献
136.
蝰蛇咬伤致肾功能损害28例报告 总被引:3,自引:2,他引:1
在蝰蛇咬伤致多脏器损害中,以肾功能损害发生率最高,危害性较大。我院1990年1月至1998年5月,采用中西医结合的综合性抢救治疗方法,共收治了49例蝰蛇咬伤病人,其中合并肾功能损害与衰竭28例,无1例死亡,治愈率100%,效果满意,现报告如下。1临床... 相似文献
137.
根据基因库中的顺序,设计了胶质细胞源神经营养因子(GDNF)基因的PCR引物,以此从人基因组DNA中扩增并克隆了GDNF的编码序列,经DNA测序确认后,该片段克隆到表达质粒pET-3a中,转化大肠杆菌BL21(DE3).培养的重组菌经IPTG诱导,在T7启动子调控下表达出hGDNF蛋白.经电泳分析表明GDNF主要存在于细菌包涵体中.从培养菌中制备包涵体,经充分洗涤,溶解于含8mol/L尿素的变性缓冲液中.经SP-Sepharose柱层析分离,梯度洗脱,以15%SDS-PAGE检查含GDNF的部分.将含单体GDNF部分进行复性,再次用SP-Sepharose离子柱分离同源二体GDNF.最后经SDS-PAGE制备电泳纯化,纯度大于95%.经N端测序表明序列正确.经测定,每升培养菌可得约10mg纯化的GDNF. 相似文献
138.
免疫分析法具有简便、快速、准确等特点,广泛应用于医学、食品、环境等领域检测,将免疫分析方法与纳米材料相结合可以提高免疫分析的性能。与传统纳米材料相比,上转换纳米颗粒(upconversion nanoparticles,UCNPs)具有光稳定性好、发光寿命长和狭窄及可调整的发射带等优秀的光学性质,与免疫分析相结合可显著降低背景噪声,提高分析灵敏度。本文简要介绍了UCNPs的发光机制,对UCNPs的合成和表面修饰方法进行了总结,并详细论述荧光共振能量转移、内滤效应、磁分离技术、上转化连接免疫吸附技术和上转换免疫层析技术五种基于UCNPs的免疫检测技术,最后对该技术所面临的挑战和前景进行总结和展望,以期为UCNPs免疫检测技术的发展提供理论指导。 相似文献
140.
非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)在西方国家较为常见,近年来在我国的发病呈上升趋势,且发展逐渐低龄化。非酒精性脂肪性肝病患者可能因持续性肝损伤而导致纤维化进展,可与慢性病毒性肝炎和酒精性肝病一样发展到终末期肝硬化,并出现肝硬化严重并发症,也有可能发展成肝癌,最终需要肝移植治疗。它严重危害人类的健康,影响人类的生活及生存质量。多因素的发病机制使其愈来愈被人们所重视,研究和了解非酒精性脂肪性肝病的流行病学、发病机制、诊断及治疗方法,对人类非常重要,如果在疾病的早期,也就是单纯性脂肪肝阶段就对疾病进行干预,这样可以取得很好的治疗效果,NAFLD是人类在本世纪需要面对的疾病之一,因此研究它的发病机制及治疗方法是非常必要的。 相似文献