炭末明胶改良安瓿法应用研究

为了证实炭末明胶改良安瓿管法替代其他方法检测细菌是否产明胶酶,实验中采用营养明胶法、X线胶片法和炭末明胶改良安瓿管法对486株质控菌株、临床分离菌株进行明胶液化试验。结果显示,以营养明胶法培养的359株呈阳性反应,X线胶片法274株呈阳性反应,炭末明胶改良安瓿法423株呈阳性反应。营养明胶法明胶液化平均天数为3.3d,而炭末明胶改良安瓿法明胶液化平均天数仅为1.5d。炭末明胶改良安瓿法由于简单快捷,易于观察,而且试剂用量小、能够室温长期保存,该方法值得推广应用。     

明胶中细菌内毒素的检测

作者通过鲎试验法检测多种来源、多个批号的药用明胶中细菌内毒素含量并进行合格批号的干扰试验,证明明胶对鲎试剂有干扰作用,其作用表现为浓度越高干扰越大。抗增液无助于消除明胶对鲎试剂的干扰,而有效的稀释可克服这种干扰。并对明胶及含明胶成份的生物制品在细菌内毒素检测中的限值确定及其试验影响进行了讨论。     

苦味酸法测定A型肉毒毒素中的明胶含量

目的注射用A型肉毒毒素中加入明胶作为稳定剂,建立并验证定量检测注射用A型肉毒毒素中明胶含量的方法。方法通过苦味酸与明胶特异性作用,产生强的吸收,采用紫外-可见分光光度计用外标法来检测注射用A型肉毒毒素中的明胶含量。结果通过一定浓度苦味酸与明胶作用,用分光光度计在520 nm处测定吸光度,检测限可以达到2.5 mg/L,检测范围可以达到10~100 mg/L。结论该方法具有良好的特异性、准确度、精密度和灵敏度,对于测定注射用A型肉毒毒素中的明胶含量有较好的参考价值。     

血清中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白、胱抑素C联合红细胞分布宽度对脓毒症患儿急性肾损伤的预测价值

摘要 目的：研究血清中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）、胱抑素C联合红细胞分布宽度（RDW）对脓毒症患儿急性肾损伤（AKI）的预测价值。方法：选取我院从2016年1月～2019年1月收治的脓毒症患儿154例。将所有患儿根据是否合并AKI分为AKI组67例和非AKI组87例。分析两组临床资料的差异,检测并比较血清NGAL、胱抑素C以及RDW水平。采用多因素Logistic回归分析脓毒症患儿发生AKI的影响因素。采用受试者工作特征（ROC）曲线分析血清NGAL、胱抑素C以及RDW预测脓毒症患儿AKI的效能。结果：AKI组与非AKI组在年龄、小儿危重病例评分（PCIS）、儿童重症监护室（PICU）停留时间、第三代小儿死亡危险评分(PRISM-Ⅲ)、肌酐（Cr）方面比较差异均有统计学意义（P＜0.05）。AKI组血清NGAL、胱抑素C以及RDW水平均高于非AKI组（P＜0.05）。经多因素Logistic回归分析发现：脓毒症患儿发生AKI的危险因素有PICU停留时间≥15 d、PRISM-Ⅲ＞32分、Cr＞100 μmol/L、血清NGAL＞220 ng/mL、血清胱抑素C＞1.55 mg/L以及RDW＞14%（均OR＞1,P＜0.05）;而防止脓毒症患儿发生AKI的保护因素包括年龄＞50月、PCIS＞70分（均OR＜1,P＜0.05）。经ROC曲线分析发现：血清NGAL、胱抑素C以及RDW联合检测预测脓毒症患儿AKI的曲线下面积、灵敏度、特异度以及约登指数均高于上述三项指标单独检测。结论：脓毒症合并AKI的患儿血清NGAL、胱抑素C以及RDW水平异常升高,且联合检测以上指标对脓毒症患儿AKI的预测价值较高,具有一定临床应用价值。     

SHEEC食管癌细胞中NGAL基因的功能

中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白 (neutrophilgelatinase associatedlipocalin ,NGAL)是脂质运载蛋白(lipocalin)家族的一个新成员 ,可能是人类的一种新的癌基因 ,但是在肿瘤中的功能不清楚。以往研究发现NGAL基因在SHEEC食管癌细胞中显著过表达 ,表明该细胞是一种用来揭示NGAL基因在肿瘤中功能的良好模型。采用反义封闭技术 ,同时结合裸鼠成瘤实验等研究了反义封闭NGAL基因转录对SHEEC食管癌细胞的浸润和分裂增殖等行为的影响。结果发现 ,反义封闭NGAL基因转录不但可以有效地降低SHEEC细胞分泌的基质金属蛋白酶 9和基质金属蛋白酶 2的活性 ,而与此同时裸鼠成瘤细胞的浸润行为也相应地受到了明显抑制 ,然而SHEEC细胞端粒的长度、拓扑异构酶II的含量以及细胞增殖指数等未发生明显变化。表明NGAL基因在食管癌细胞SHEEC中的功能可能主要是通过明胶酶在促进肿瘤细胞的浸润中发挥作用 ,而可能与肿瘤细胞分裂增殖的相关性不明显     

骨关节炎患者血清中基质金属蛋白酶-2、-9的明胶酶谱分析

为探讨基质金属蛋白酶-2、-9在骨关节炎发病中的作用,应用明胶酶谱分析方法研究其在骨关节炎患者血清中的表达水平。实验对象为27例膝骨关节炎患者,对照组为7例外伤骨折患者。结果发现病例组血清中基质金属蛋白酶-2和-9的表达水平均明显高于对照组(P<0.05)。该结果显示基质金属蛋白酶-2和-9可能在骨关节炎的发病过程中均起着重要的作用。     

明胶颗粒凝集试验联合ELISA法在梅毒检测中的应用价值

目的 分析明胶颗粒凝集试验(TPPA)联合酶联免疫吸附试验(ELISA)在梅毒检测中的应用价值。 方法 选择我院2015年1月至2018年12月收治的128例疑似梅毒患者为研究对象,将其中43例临床确诊患者纳入梅毒组,余下85例为非梅毒组,全部受试者均接受ELISA法联合TPPA检测,比较单独ELISA法和ELISA联合TPPA检测的结果。 结果 梅毒组患者中ELISA法诊断阳性35例,阴性8例;ELISA联合TPPA诊断阳性42例,阴性1例;ELISA法假阳性率14.63%(6/41),明显高于ELISA联合TPPA法的2.33%(1/43),差异有统计学意义(χ2=4.163,P=0.041)。ELISA联合TPPA诊断梅毒的特异性、敏感性、阴性预测值及阳性预测值分别为98.82%、97.67%、98.82%、97.67%,均显著高于单独ELISA检测的92.94%、81.40%、90.80%、85.37%,差异均有统计学意义(χ2=143.650、6.081、5.575、4.163,P结论 ELISA适用于大批量梅毒筛查,TPPA法的特异性及敏感性高,可作为梅毒血清抗体检测的确认试验。二者联合检测能够提高梅毒诊断效能,具有较高的应用价值。     

蚕丝蛋白和明胶复合组织工程材料与肝细胞相容性的实验研究

目的:研究蚕丝蛋白-明胶三维材料支架对人永生化肝细胞系QZG贴附及增殖的影响。方法:采用四氮唑盐比色法(MTT)、细胞计数法检测QZG细胞在纯蚕丝生物材料上与在蚕丝蛋白-明胶复合材料上的增殖情况,用扫描电镜观察QZG细胞在两种三维生物材料上的贴附与增殖情况。结果:QZG细胞可以在蚕丝蛋白生物材料贴附及增殖,在引入明胶的蚕丝蛋白材料上细胞贴附更紧密,增殖更明显。结论:蚕丝蛋白与明胶复合材料支架具有良好的细胞贴附性能,通过改进在肝组织工程应用方面将具有一定应用前景。     

凯式定氮法替代苦味酸法测定注射用A型肉毒毒素中明胶含量的可行性研究

目的 探究采用凯式定氮法替代苦味酸法测定注射用A型肉毒毒素(botulinum toxin type A for injection)明胶含量的可行性,以期对注射用A型肉毒毒素明胶含量测定方法的变更起到借鉴作用。方法 通过专属性、准确度、重复性、中间精密度和耐用性验证,确认采用凯式定氮法测定注射用A型肉毒毒素明胶含量的数据可靠性;对凯式定氮法与现有苦味酸法测定注射用A型肉毒毒素明胶含量的结果采用配对t检验和Bland-Altman分析进行统计学分析,确定2种测定方法的一致性。结果 注射用A型肉毒毒素中右旋糖酐20、蔗糖、A型肉毒毒素复合物对明胶含量测定无干扰,该方法专属性良好;准确度回收率位于95%～99%之间;重复性RSD为0.73%;中间精密度RSD为2.10%;且耐用性良好,可采用凯式定氮法进行注射用A型肉毒毒素明胶含量的测定。同时与现有苦味酸法相比,配对t检验无统计学差异;Bland-Altman分析,2种方法测量的差值均位于测量差均值的95%置信区间内,说明2种方法一致性良好。结论 可采用凯式定氮法替代苦味酸法进行注射用A型肉毒毒素明胶含量的测定。     

血清RBP4、NGAL、Klotho蛋白在慢性肾脏病病情监测及预后评估中的价值

目的:探讨血清视黄醇结合蛋白4(retinol binding protein 4,RBP4)、中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(neutrophil gelatinase-associated lipocalin,NGAL)、Klotho蛋白在慢性肾脏病病情监测及预后评估中的价值。方法:收集我院2017年5月～2019年2月收治的297例慢性肾脏病患者为研究对象,依据肾小球滤过率(GFR)分为1期24例、2期46例、3期128例、4期66例、5期33例,并依据临床转归情况分为肾功能稳定组104例和肾功能恶化组193例;同期选择门诊健康体检者251例作为对照组。比较各组血清RBP4、NGAL、Klotho蛋白表达情况,并分析慢性肾脏病患者血清RBP4、NGAL、Klotho蛋白和GFR的相关性。结果:慢性肾脏病组血清RBP4、NGAL水平高于对照组,Klotho蛋白低于慢性肾脏病组(P0.05)。慢性肾脏病5期者血清RBP4、NGAL水平高于4期、3期、2期及1期者,Klotho蛋白低于4期、3期、2期及1期者,差异有统计学意义(P0.05)。慢性肾脏病患者血清RBP4、NGAL和GFR呈负相关,Klotho蛋白和GFR呈正相关(P0.05)。肾功能恶化组血清RBP4、NGAL水平高于肾功能稳定组,Klotho蛋白低于肾功能稳定组,差异有统计学意义(P0.05)。结论:血清RBP4、NGAL及Klotho蛋白表达水平的变化对了解慢性肾脏病患者病情程度及预后评估中有重要的参考价值,建议临床予以重视。