Werner综合征小鼠模型在早衰与肿瘤研究中的应用

Werner综合征(Werner syndrome, WS)是一种罕见的人类常染色体隐性遗传疾病, 一直以来该病作为研究人类早老综合征的典型病例而受到关注。Werner蛋白(WRN)是Werner综合征中突变的核蛋白, 最近的生化及遗传学研究证明WRN在DNA复制、DNA损伤修复以及端粒的维持方面起着重要的作用。文章综述了Werner综合征的分子遗传学机理及端粒和WRN在Werner综合征发病中的重要作用。通过双敲除Wrn与端粒酶基因建立的小鼠模型忠实地再现了人类Werner综合征, 这种Werner综合征小鼠模型因其同时具有早衰与肿瘤表型而在研究人类肿瘤及衰老的相关性中起到的独特作用。     

子宫切除对绝经前妇女卵巢功能的影响

目的:通过比较行子宫切除保留卵巢与未进行子宫切除绝经前妇女的卵巢功能,评估子宫切除后卵巢功能早衰风险.方法:选取解放军总医院妇产科2004～2007年收治的120例因患女性生殖系统良性疾病接收全子宫切除保留双侧卵巢的妇女为手术组,及135例未行子宫切除的绝经前妇女为对照组,每年对纳入对象进行血清检测以及问卷调查,详细记录数据4年.以血清FSH＞40 U/L为发生卵巢功能衰退,以危险率描述发生卵巢功能早衰的风险,利用COX比例风险模型进行统计学分析.结果:接受全子宫切除保留双侧卵巢的妇女中有20例(16.67％)发生卵巢功能早衰,对照组有15例(11.11％)发生卵巢功能早衰,具有统计学差异.与对照组相比,手术组发生卵巢衰竭的HR值1.92 (95％ CI 1.29～2.86,P＜0.01),其中单纯子宫切除的患者发生卵巢衰竭的HR值1.74 (95％ CI 1.14～2.65,P＜0.05),全子宫并附带单侧卵巢切除的妇女发生卵巢早衰的HR值2.93 (95％ CI 1.57～5.49,P＜0.01).结论:绝经前子宫切除可能增加发生卵巢功能早衰的风险,但其导致卵巢功能早衰的原因尚不明确,手术或子宫基础疾病均可能参与了卵巢功能早衰的发生.     

水稻早衰突变体LS-es1的基因定位及候选基因分析

衰老是植物发育末期自主发生且不可逆的适应性反应, 叶片早衰相关分子机制研究对水稻(Oryza sativa)遗传改良以及抗衰老品种培育有重要意义。LS-es1是通过EMS诱变粳稻品种TP309获得的稳定遗传的早衰突变体。对LS-es1及其野生型的表型观察和生理生化分析表明, LS-es1叶片中积累了大量活性氧且细胞死亡更多, 同时LS-es1与产量相关的农艺性状均显著下降, 这也验证了LS-es1早衰的特征。对LS-es1及其野生型幼苗进行外源激素处理, 结果表明LS-es1对水杨酸(SA)、脱落酸(ABA)和茉莉酸甲酯(MeJA)更敏感。用图位克隆方法将LS-es1基因定位在水稻第7号染色体长臂46.2 kb区间内, 该区间共包括8个开放阅读框(ORF)。对该区间内的基因进行生物信息学分析, 结果发现Os07g0275300和Os07g0276000两个候选功能基因与早衰途径相关, 并且这2个基因的表达量在野生型和突变体中差异较大。研究结果为进一步克隆LS-es1基因并深入研究其生物学功能奠定了基础。     

不同整枝方式对棉花源库关系的调节效应

以去叶枝留早果枝的正常整枝方式为对照,于2005—2006年研究了整枝对大田棉花源库关系的调节效应.结果表明：去叶枝去早果枝（Ⅰ）、留叶枝去早果枝（Ⅱ）和留叶枝留早果枝（Ⅲ）3种整枝方式都显著促进了棉花叶面积扩展,最大叶面积系数分别比对照平均提高了10.3%、28.3%和9.5%,导致叶面积载荷量减少,源库比降低.Ⅰ和Ⅱ处理显著提高了叶片叶绿素含量,降低了始絮期的黄叶率和功能叶的C/N,表现出显著地延缓衰老的作用,但Ⅱ处理易导致贪青晚熟;而Ⅲ处理对衰老的延缓作用不大.Ⅰ处理的籽棉产量与对照相当,Ⅱ处理比对照降低了6.4%~15.6%,Ⅲ处理比对照增产6.3%.表明去早果枝和留叶枝皆是调节棉花源库关系、碳氮代谢和延缓棉花早衰的有效手段.     

化疗损伤性卵巢功能早衰小鼠动物模型的研究

目的探索建立化疗损伤性卵巢功能早衰动物模型的适宜方法及最佳时间。方法以70只ICR雌性小鼠为研究对象,腹腔连续注射顺铂7~14 d,观察不同剂量和时间条件下顺铂对小鼠的体重、卵巢功能、肝肾毒性及卵巢组织抗氧化系统各指标的变化。结果顺铂可引起小鼠体重明显下降,卵巢功能减退,出现肝肾毒性,并可引起卵巢抗氧化及氧化损伤指标的异常,与对照组比较均有明显差异。结论3.0~4.0 mg/(kg.bw)的顺铂作用7 d后即可引起小鼠出现明显的卵巢功能衰退、肝肾损伤,氧化损伤是顺铂产生其毒性作用的可能机制之一。该模型的生殖内分泌和病理组织学变化,与人类化疗损伤性卵巢功能早衰病变过程相似。     

Chk2在Bmi1缺失所致的肾脏早衰和纤维化中的作用和机制研究

摘要 目的：探究细胞周期检测点激酶2（cell-cycle checkpoint kinase 2,Chk2）在B淋巴瘤Mo-MLV插入区1（B cell-specific MLV integration site-1,Bmi1）缺失所致的肾脏早衰和纤维化中的作用及可能的机制。方法：取5周龄WT、Bmi1^-/-、Chk2^-/-、Bmi1^-/-Chk2^-/-小鼠肾脏,采用HE染色观察肾脏结构变化,采用免疫荧光和Masson染色观察肾脏纤维化情况,采用衰老相关β半乳糖苷酶（Senescence-associated β-galactosidase,SA-β-gal）染色观察肾脏衰老情况,采用免疫组化染色和western blot观察肾脏超氧化物歧化酶1（Superoxide Dismutase 1,SOD1）、超氧化物歧化酶2（Superoxide Dismutase 2,SOD2）表达水平和定位。从5周龄WT、Bmi1^-/-、Chk2^-/-、Bmi1^-/-Chk2^-/-小鼠肾脏皮质中提取和分离原代肾小管上皮细胞,采用免疫荧光和western blot检测其SOD1、SOD2表达水平。结果：与WT小鼠肾脏组织相比,Bmi1^-/-小鼠肾脏组织表现为体积变小、肾脏皮质厚度减少、肾小球数量减少,β-gal活性增加,SOD1和SOD2水平降低;与Bmi1^-/-小鼠肾脏相比,Bmi1^-/-Chk2^-/-小鼠肾脏体积增大、肾脏皮质厚度增加,肾小球数量增多,β-gal活性降低,SOD1和SOD2水平增加。与WT小鼠肾脏皮质原代肾小管上皮细胞相比,Bmi1^-/-小鼠肾脏皮质原代肾小管上皮细胞中SOD1和SOD2水平;与Bmi1^-/-小鼠肾脏皮质原代肾小管上皮细胞相比,Bmi1^-/-Chk2^-/-小鼠肾脏皮质原代肾小管上皮细胞中抗氧化指标SOD1和SOD2增加。结论：Chk2通过抑制肾小管上皮细胞的抗氧化能力促进Bmi1缺失所致的肾脏早衰和纤维化。     

短季棉早熟不早衰生化性状的遗传分析

用5个早熟不早衰的短季棉品种和5个早衰的短季棉品种进行双列杂交,并对亲本、F1和F2代于2001年和2002年田间试验研究与短季棉早熟不早衰有关的抗氧化系统保护酶(SOD、POD和CAT)、叶绿素及激素(生长素和脱落酸)的遗传特性。结果表明：抗氧化系统保护酶CAT、POD和SOD存在着不同的遗传特性,CAT酶以加性上位性效应为主,其次为显性效应;POD酶以加性效应为主,其次为加性上位性效应;SOD酶活以显性效应为主,其次为加性上位性效应;IAA以显性效应为主,其次为加性效应;ABA以加性效应为主,其次为显性效应。且这些生化性状的遗传率较高,在后代能稳定遗传;同时棉株在不同发育时期体内生化性状表达不同,在花铃期CAT、POD和SOD酶以显性效应为主,其次为加性上位性效应,加性效应表达量很小;棉株体内生化性状的表达也是相互联系、相互制约,CAT酶与POD酶存在着遗传和表型负相关,与SOD酶存在着遗传和表型正相关;POD酶与SOD酶存在着遗传和表型负相关;抗氧化系统保护酶与激素之间存在着复杂的遗传关系。因此,研究生化性状的遗传特性和表达特征,为选育短季棉早熟不早衰新品种和生化性状的QTLs定位提供理论依据。