姜黄素的提取及其甲基化研究

以姜黄为原料,用70%的乙醇进行粗提,正丙醇进行两次重结晶得醇的姜黄素.再以此纯的姜黄素为原料,用乙醚和甲醇溶解,以过量的CH3I为甲基化试剂,在pH=12～14的条件下进行反应10 h,用氨水沉淀,过滤,水洗至中性,烘干,在经层析柱分离得到一种黄色针状物,经鉴定为一新化合物,即纯的二甲基姜黄素,分子式为C23H24O6,收率为35%以上.     

阿魏酸和水杨酸对枣皮红色素理化性质的影响

以枣(Jujube)皮为原料,经酶解和微波超声波处理后提取红色素,研究酰基化剂(Acylating agent)对红色素理化性质的影响.结果显示,枣皮红色素分别与阿魏酸和水杨酸形成的复合物对光和部分金属如Na+、Ca2+和Fe3+稳定;在pH 1～7范围内不稳定,pH 9～14范围内稳定.结果表明,阿魏酸和水杨酸与枣皮红色素复合后产生的酰基化产物有助于红色素分子的稳定.     

细胞穿透肽Tat-LK15介导siRNA的转染效率和细胞毒性研究

通过与Lipofectamine TM RNAi MAX(Lipo)比较,探讨细胞穿透肽Tat-LK15对人肾上皮细胞(human embryonic kidney 293T cells,293T)和大鼠视神经节细胞(retinal ganglion cell line,RGC-5)转染小干扰RNA(small interference RNA,si RNA)的效率和细胞毒性,为后期实验提供依据。以羧基荧光素(carboxyfluorescein,FAM)标记的si RNA为报告基因,不同剂量的Tat-LK15(Tat-LK15组)和Lipo(Lipo组)为转染试剂,分别转染293T和RGC-5细胞。转染24 h后荧光显微镜观察FAM荧光强度,计算转染效率,并以CCK-8法检测细胞毒性。随着Tat-LK15和Lipo剂量的增加,si RNA转染效率逐渐提高。当Tat-LK15与si RNA配比为2∶1(μg/μg)时,RGC-5细胞的转染效率达到最高((87.3±4.5)%),低于Lipo与si RNA配比为5∶1(μL/μg)时的最高转染效率((96.2±3.2)%(P0.05));作用于293T细胞时,两转染试剂的最高转染效率没有统计学差异(P0.05)。转染试剂剂量增加,Lipo细胞毒性显著增加,而Tat-LK15毒性无明显变化。转染效率最高时,Lipo(5μL)组293T和RGC-5的细胞存活率仅为((77.8±4.1)%,(73.4±7.7)%)显著低于Tat-LK15(2∶1)组同种细胞的存活率((91.0±3.7)%,(90.0±6.1)%)(P0.05)。Tat-LK15可有效地转染si RNA,细胞毒性低,安全性突出,有一定的应用前景。     

四种氨基酸原料细菌内毒素检查法的研究

依据中国药典2000年版“细菌内毒素检查法”,通过鲎试剂的干扰试验,研究注射用氨基酸原料中细菌内毒素检查法的可行性。结果在2~16倍稀释级下,L-缬氨酸(c=2.5%)和L-异亮氨酸(c=2.5%)对鲎试剂无干扰,检测细菌内毒素的鲎试剂灵敏度≤5.0×102EU.L-1,而在16倍稀释级范围内,L-脯氨酸(c=4.5%)和L-亮氨酸(c=2.0%)对鲎试剂检查法有抑制作用。结论为注射用L-异亮氨酸和L-缬氨酸用灵敏度为5.0×102EU.L-1的鲎试剂检查其细菌内毒素方法可行,可以代替家兔法检查热原。     

如何正确估计蛋白质SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳的样品加样量

在做蛋白质的SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS—PAGE）时,使用的仪器设备、做胶和制样的方法都差不多,但结果却五花八门,相去甚远。有的条带清新,背景干净,令人赏心悦目;有的却条带模糊、肥瘦不均,其貌不扬;有的甚至歪歪扭扭,画成了地图。看来并不困难的操作,结果为什么会有如此之大的区别？除了试剂质量、制胶过程和跑胶的具体细节外。失败的主要原因往往在于样品制备的缺陷和加样量不适当。只有在样品制备良好、加样量又适当的情况下,     

斐林试剂与双缩脲试剂的比较

斐林（Fehling）试剂与双缩脲试剂都主要由NaOH和CuSO42种成分配制而成,常用于某些物质的定性或定量鉴定。然而当它们用于鉴定物质时有如下不同之处。     

薯蓣皂素的节水生产工艺研究

盾叶薯蓣是我国特有的甾体激素类药源植物,其根茎所含的薯蓣皂素是合成多种甾体激素的前体物质。本文在预发酵酸水解的基础上探讨不同盐酸浓度、不同加水量以及不同中和试剂对薯蓣皂素提取率的影响,旨在降低生产过程中的耗水量。实验结果表明:HCL浓度为2.5 mol/L时,薯蓣皂素提取率最大,为2.408%;皂素含量随加水量的减少而减少;最佳的中和试剂为CaO。     

新品了望

PCR试剂的缓冲液 Thermo Fisher Scientific宣布Thermo Scientific Thermo-Start系列热起始RCR试剂现提供Reddymix缓冲液可进行更方便,无误差的配置．改善了反应的再现性。缓冲液含有惰性红色染料增加了试剂和塑料容器之间的对比度从而一眼就可以方便的判断是否准确移液。该试剂为每个反应含有正确体积提供了再次保证增加了实验的再现性。缓冲液内含有的红色染料和沉淀剂使终PCR产物可以直接进行琼脂糖凝胶上样,减少了PCR后处理步骤．节省了可观的时间。     

2-氯汞-4-硝基苯酚对人肌肌酸激酶巯基的修饰

本文用含汞试剂MNP修饰人肌肌酸激酶,结果表明,人肌肌酸激酶有6个可反应巯基。MNP首先修饰了一对与活力无关的非必需巯基,增大MNP摩尔比,则进一步修饰另外四个与活性有关的巯基。修饰酶的差吸收光谱、荧光光谱表明这三对巯基的微环境各不相同。其中第二对巯基很可能是位于活性部位的必需巯基,而第三对巯基则是由于第二对巯基,也就是必需巯基,被修饰后,微区构象发生改变而暴露出来的。比较MNP修饰人肌肌酸激酶、鸡胸脯肌肌酸激酶、兔肌肌酸激酶的结果,探讨了MNP对肌酸激酶的修饰以及人肌肌酸激酶可反应巯基的化学微环境。