柑桔始叶螨与柑桔全爪螨染色体制备方法与核型探讨

采用一种新的染色体制备方法,成功地制备和观察了柑桔始叶螨和柑桔全爪螨的中期染色体。柑桔始叶螨的核型n=4、2n=8,柑桔全爪螨的核型n=3、2n=6或n=4、2n=8。C显带与扫描电镜结果显示,柑桔始叶螨与柑桔全爪螨为全着丝粒染色体,并存在混倍性现象。     

Identification of FANCA as a protein interacting with centromere-associated protein E

This study sought to isolate and identify proteins that interact with centromere-associated protein E （CENP- E）, provide new clues for exploring the function of CENP-E in cell cycle control and the pathogenesis of tumor. Yeast two-hybrid screen and regular molecular biologic techniques were undertaken to screen human HeLa cDNA library with the kinetochore binding domain of CENP-E. The bait from the C-terminus of CENP-E was created by subcloning methods to find out optimal candidate proteins that interact with the kinetochore binding domain of CENP-E. Eight novel CENP-E interacting proteins including Homo sapiens Fanconi anemia complementation group A （FANCA） were obtained. In yeast two-hybrid assay, the N-terminal 260 amino acids of FANCA were found to be necessary and sufficient for the interaction with the C-terminus of CENP-E. The interaction was confirmed by in vitro glutathione S-transferase pull-down assay and in vivo coimmunoprecipitation assay. Our finding of the interaction of CENP-E with FANCA demonstrates that CENP-E and FANCA may play important roles in the functional regulation of the mitotic checkpoint signal pathway.     

基于比较核型分析方法追溯百合族 (百合科) 二型性核型的起源

百合族具有非常一致的二型性核型,由4条长染色体以及20条短染色体组成。目前有两个假说解释其二型性核型的来源,着丝粒横裂和多倍化。但是,具体是哪一种机制起主要作用仍然不清楚。根据文献以及自己的实验结果,我们整理并重新分析了百合亚科和美德兰亚科所有属的核型资料。比较核型分析结果表明,来自单条染色体的特征、染色体臂数、核型不对称性以及染色体的相对长度诸方面的证据都支持着丝粒横列是百合族核型进化的主要机制,但不能排除其它的机制也在起着作用,如臂间倒位和易位。臂间倒位和易位可能在郁金香族的核型进化中起着主要的作用。另外,本研究还报道了三个种的核型,粗茎贝母 (Fritillaria crassicaulis)、准格尔郁金香 (Tulipa suaveolens) 和尖果洼瓣花 (Gagea oxycarpa)。     

小鼠的克隆着丝粒（SFA）DNA的鉴定

着丝粒是真核染色体上的重要细胞器,是真核染色体作为基因载体行使其遗传功能的关键结构。着丝粒DNA首先是从酵母中分离克隆并被用以构建酵母人工染色体。鉴于真核有丝分裂机制研究和构建高等动物人工染色体研究的需要,从分离和检定过的小鼠着丝粒DNA库中筛选出6＃着丝粒DNA（SAF DNA）,并用荧光原位杂交法（FISH）对其进行了在染色体上的定位检定。用缺口平移法和PCR法分别标记了SFA DNA和SFA DNA中的小鼠寡份卫星DNA作为探针,分别与小鼠腹水癌细胞和小鼠929细胞进行原位杂交;并用荧光抗体显示杂交信号的位置。结果：SFA DNA在两种细胞的中期染色体上的杂交信号都位于亚末端的初级缢痕处,表现为单一粗大的斑块。寡份卫星DNA在两种细胞的中期染色体上的杂交信号亦都位于亚末端的初级缢痕处,但极大多数的斑点均表现为成对的细小斑点。初级缢痕正是染色体着丝粒所在的物征性部位。故以上结果说明定位于该部位的克隆的6＃SFA DNA,和其中的小鼠寡份卫星DNA都来源于小鼠着丝粒DNA。     

遗传学教学中难点问题的简化

如何以简单明了的语言解决教学中遇到的难点．是每一位授课教师孜孜不倦,努力寻求的目标在长期的教学实践中．笔者对怎样帮助学生理解并解决好遗传学课程中,链孢霉的2对基因连锁产生的7种基本子囊型的得来,怎样解决好2基因与着丝粒间相对距离和排列次序的问题．总结出以下经验,使同学们在遇到这样的问题时,能举一反三,事半功倍,收到了良好的效果。     

染色体着丝粒中结构蛋白CenpB的基因在乳腺癌组织中的活跃表达

利用Northern印迹技术对31例乳腺癌组织块及每一例病人的癌旁正常(非癌性)组织块进行分析,发现多数情况下(87．1％)癌组织中着丝粒蛋白CenpB mRNA过表达;组织原位杂交分析表明,在CenpB mRNA过表达的乳腺癌组织中,呈现出比癌旁正常组织更强的杂交信号;用免疫印迹法研究同样的标本,结果与RNA水平上的研究高度一致。结果显示,CenpB基因的过表达可能与乳腺细胞恶性增殖有关。     

恶性血液病中着丝粒和着丝粒周染色体重排的研究进展

用染色体特异的卫星DNA探针进行染色体荧光原位杂交(FISH)分析恶性血液病,发现着丝粒和着丝粒周染色体的重排并非罕见.分子生物学技术和基因组计划的发展,促进了对异染色质分子本质的研究.本文就着丝粒和着丝粒周异染色质的分子结构及其重排机制作一综述。 Abstract:Fluorescence in situ hybridization(FISH) analysis with chromosome-specific satellite DNA probes of various hematopoietie malignancies have revealed that centric and pericentric chromosome rearrangements occurred more frequently than hitherto admitted.The development of molecular biology and genome project have fostered much interest in the structure and function of centromeric heterochromatin.In this paper,recent advances in molecular structure and rearrangement mechanisms of centric and pericentric heterochromatin are reviewed and future study is also discussed.     

着丝粒蛋白U(CENPU)在卵巢癌中的高表达及其临床病理学意义

目的 探索着丝粒蛋白U(centromere protein U,CENPU)在卵巢癌组织中表达情况和与卵巢癌细胞增殖和迁移的关系及其相关机制.方法 应用免疫组织化学和Western blot检测卵巢癌组织和癌旁组织、卵巢癌细胞和正常卵巢上皮细胞中CENPU的表达;沉默卵巢癌细胞CENPU后,应用CCK-8、Trans...     

着丝粒核小体结构研究进展

着丝粒是构成真核生物染色体的必需元件。在细胞有丝分裂或减数分裂时,微管通过动粒与染色体着丝粒连接,参与细胞分裂的染色体分离与分配过程,使染色体平均分配到子细胞中。构成着丝粒的基本单位是着丝粒特异的核小体,与常规核小体不同的是着丝粒核小体中的组蛋白H3被其变种——着丝粒组蛋白H3所替换。最近几年,着丝粒核小体的结构成为细胞生物学研究的热点之一。该文综述了最近在多种真核生物研究中,通过体外和体内实验,提出的着丝粒核小体结构的八聚体、六聚体、同型四聚体以及半八聚体模型,并对着丝粒核小体结构的动态模型与功能的关系进行了探讨。     

中国云南果蝇属暗果蝇种组的核型分化

观察了新近发现于我国云南的果蝇属暗果蝇种组(Drosophila obscura species group)种类D．luguensis、D．dianensis和D．limingi的有丝分裂中期核型,并将3个种的核型与各自的近缘种类进行了比较。D．luguensis具2n=12条染色体,包括3对中央着丝粒(V形)染色体、2对近端着丝粒(棒状)染色体以及1对微小(点状)染色体。其中X和Y染色体均为中央着丝粒染色体。D．dianensis和D．limingi具2n=10条染色体,包括1对大的V形常染色体,1对小的V形常染色体,2对J形(亚中着丝粒型)常染色体和1对点状染色体。其中X染色体为J形,Y染色体为短棒状。基于核型比较的结果以及D．sinobscura亚组地理分布的资料,结合种间系统发育关系研究结果,认为D．luguensis可能保留了该亚组祖先种类的核型。D．sinobscum的核型(2n=12：2V,1J,2R,1D)可能由一个pre-“sinobscura-hubeiensis”谱系的一个分支通过臂间倒位演化而来,而D．hubeiensis的核型(2n=10：4V,1D)可能由该谱系的另一分支通过着丝粒融合(2对近端着丝粒常染色体的融合)而形成。推测在D．dianensis和近缘欧洲种D．subsilvestris(2n=12：3V,2R,1D)间、D．limingi和东亚近缘种D．tsukubaensis(2n=12：3V,2R,1D)间的物种分化过程中,可能有相似的染色体变异类型发生。