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91.
用PCR方法从AcMNPV基因组中扩增到ORF60基因,插入原核表达载体pET-28a(+),构建pETAc60质粒,再将该质粒转化大肠埃希菌BL21,在IPTG诱导下表达了分子量约为16 ku的融合蛋白.用纯化的表达产物免疫新西兰大白兔制备了多克隆抗体,应用该抗体检测了AcMNPV感染的昆虫宿主细胞(Si9)中ORF60基因的表达,结果显示:在感染后的细胞中有2条分子量分别约为33 ku和17 ku蛋白质带能与所制备的抗体发生特异性反应.间接免疫荧光分析发现:在病毒感染的晚期,Ac60蛋白同时存在于所感染宿主的细胞核和细胞质中. 相似文献
92.
从尚未涉及的昆虫种类中建立新的细胞系能为基础研究和生物技术应用提供重要资源。本实验通过细胞培养技术, 建立了3株来源于鳞翅目昆虫烟草天蛾Manduca sexta卵组织的新细胞系, 分别命名为QB-Ms1-8, QB-Ms2-2和QB-Ms2-7。这3株细胞已经培养在TNM-FH培养基中, 28℃ 条件下传代培养了约50代, 大部分细胞呈梭形, 细胞群体倍增时间分别为51, 31和49 h。虽然这3株细胞系对苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒(Autographa californica multiple nuclear polyhedrosis virus, AcMNPV)不够敏感, 侵染后96 h感染率在33%~40%之间, 但是QB-Ms2-2细胞与BTI-Tn5B1-4细胞比较, 分泌型碱性磷酸酶(SEAP)活性表达更高。本研究从建立的3株烟草天蛾新细胞系中筛选出SEAP高表达的细胞系QB-Ms2-2, 为进一步细胞克隆和筛选提供了新资源。 相似文献
93.
中国苜蓿育种取得的成就及展望 总被引:1,自引:0,他引:1
综述了我国苜蓿育种取得的成就及展望。到目前为止,已审定登记育成新品种23个,国外引进品种15个,野生驯化品种3个,整理地方品种19个。育成品种具有抗寒、抗病、耐盐、耐牧、高产、早熟等特点。我国苜蓿育种大多采用常规育种技术,生物技术应用相对较少。苜蓿育种工作存在的主要问题有:育成品种少,抗性育种进程缓慢,育种原始材料较少,育种技术单一;提出改进苜蓿育种方法、培育特色品种、加强苜蓿种质资源保护与利用是缩小我国与国外苜蓿育种进程的有效途径。 相似文献
94.
苜蓿根瘤菌(Sinorhizobium meliloti)nodD3P1启动子下游序列的缺失和互补分析 总被引:2,自引:0,他引:2
在苜蓿根瘤菌中,nodD3基因的转录由两个彼此分离的启动子P1和P2控制. 在P1下游是一段由660 bp组成的序列, 接着是nodD3的编码区. 由P1下游序列3′末端开始缺失得到的一系列缺失突变体的遗传分析指出, P1下游+1~+125 nt序列对P1的表达是必须的. 互补分析和结瘤试验指出, ORF2自我抑制P1的表达, 而+1~+125 nt序列可对抗ORF2对P1的抑制作用. 相似文献
95.
苜蓿切叶蜂滞育的诱导因素研究 总被引:1,自引:0,他引:1
苜蓿切叶蜂Megachile rotundata(F.)预蛹的滞育主要受光周期和温度的影响。雌蜂感受光周期的变化是决定子代预蛹是否进入滞育的一个主要因素;当代的幼期,特别是高龄幼虫(约3龄)到预蛹这一阶段所感受的温度变化,对预蛹滞育有很大的影响,此期如果环境温度低于(21.59±1.03)℃,可有超过50%的个体进入滞育。此外,放蜂地区的纬度及蜂的代次对预蛹的滞育亦有重要的影响。 相似文献
96.
97.
Thidiazuron对苜蓿愈伤组织的乙烯生成及其体细胞胚胎发生的影响 总被引:15,自引:0,他引:15
苜蓿叶柄在B5H培养基上诱导并继代所形成的是无色、松软的胚性愈伤组织、内含许多有分生能力的细胞团,当B5H中的KT用TDZ替换时,愈伤组织变绿变硬,出现管状分子和芽原基的分化,其体胚发生能力失,而且其乙烯生成和PAL活性升高。乙烯形成酶的抑制剂CoCl2可以抑制TDZ的上述作用,部分地恢复愈伤组织的体胚发生能力,TDZ对愈伤组织的这些作用可能与其乙烯生成有关。 相似文献
98.
苜蓿根瘤菌结瘤基因(nodABCD1D2D3EFGHPQ)存在于达300~1000Md以上的巨大质粒上。nodD基因(包括nodD1和nodD2基因)的产物与植物分泌的类黄酮进行特异结合,进而在转录水平调节其它nod基因的表达。nodABC、nodH和nodQ基因编码的蛋白质控制NodRm因子的产生,从而决定宿主范围。其中,nodABC基因控制NodRm—1的产生,nodH基因控制NodRm因子硫酸基团的转移,有硫酸基团的NodRm—1在苜蓿上表现有活力,没有硫酸基团的NodRm—2在野豌豆上有活力。 相似文献
99.
100.
钙离子对紫花苜蓿及苜蓿根瘤菌耐酸能力的影响 总被引:2,自引:0,他引:2
土壤酸性是阻碍苜蓿根瘤菌与其宿主紫花苜蓿之间高效共生固氮的重要环境因子.本文研究了Ca2 对紫花苜蓿及苜蓿根瘤菌耐酸能力的影响.结果表明:加入一定浓度的Ca2 (5和10mmol·L-1)能提高苜蓿根瘤菌的生长速率,使苜蓿根瘤菌提前进入对数生长期.中性pH条件下,Ca2 的加入对苜蓿根毛变形率无显著影响;低pH条件下,加入2、5和10mmol·L-1的Ca2 均可提高根毛变形率,Ca2 浓度越高,其影响越显著,说明低pH下Ca2 可能会促进苜蓿根瘤菌与其宿主之间的识别.低pH条件下加入Ca2 可以使苜蓿结瘤提前,结瘤率提高;结瘤动力学检测结果表明,加入一定浓度的Ca2 可以使同期结瘤数增加,越是结瘤后期,环境pH越低,这种表现越明显. 相似文献