肝细胞靶向pH敏脂质体介导的硫代反义寡核苷酸对HCV5‘NCR基因表达的抑制作用

反义寡核苷酸是一种阴离子大分子物质,细胞生物利用度较低且易被细胞溶酶体酶降解,为了增强反义药物在病变靶细胞内的有效浓度,根据受体介导的内吞作用原理,针对肝细胞专一性表达的去唾液酸糖蛋白受体,设计及制备了一种肝靶向性脂质体,这种脂质体同时具有pH敏性.采用竟争抑制实验及鸡红细胞溶血实验分析了其肝细胞靶向性及pH敏性;应用肝靶向pH敏脂质体作为药物运载工具,介导反义寡核苷酸HCV363作用于转基因细胞HepG2.9706细胞,通过荧光素酶活性检测,观察了硫代反义寡核苷酸对HCV 5′NCR调控功能的抑制活性.结果显示,不同浓度半乳糖溶液对5%18-gal脂质体有一定的抑制作用,浓度超过20mmol/L时,达到饱和,最大抑制率为38%;溶血实验显示脂质体与红细胞膜融合作用有显著的pH值依赖性,pH＜6时,血红素释放量明显增加;肝靶向pH敏性脂质体介导的HCV363对HepG2.9706细胞中HCV 5′NCR调控基因具有显著的剂量依赖性抑制作用,浓度为1.0umol/L时,抑制率达86%.综上,所制备的脂质体具有一定的肝细胞靶向性及显著的pH敏感性,这种脂质体能够增强HCV特异性硫代反义寡核苷酸的细胞内抑制活性,这为针对肝炎病毒的反义寡核苷酸的体内活性评价提供了有用的转运体系.     

成年白腰文鸟端脑新生神经元的光镜和电镜研究

应用光镜和电镜放射自显影方法,对成年雄性鸣禽白腰文鸟脑中新生神经元的起源和分布进行研究,结果发现,（１）端脑室带区（ＶＺ）中存在不均匀分布的（＾３Ｈ）标记细胞,大量标记细胞分布在端脑尾侧新纹状体水平（Ｌ１－Ｌ１４）的ＶＺ,形成标记细胞的“热点”区１（２）标记细胞经两次有丝分裂后,大约在肌肉注射（＾３））的第６天后开始从ＶＺ向外迁移,在３０天左以达目的脑区分化成为成熟神经元,这些神经元不均匀分布在端     

ATF-PAI2CD融合蛋白的生物学功能

为了解尿激酶型纤溶酶激活物 (urokinase typeplaminogenactivator,uPA)的氨基末端片段 (amino terminalfrag ment,ATF)和纤溶酶激活物抑制剂 2 (plasminogenactivatorinhibitortype 2 ,PAI 2 )突变体PAI 2CD融合蛋白在大肠杆菌的表达情况及进一步研究其生物学活性、将ATF PAI2CD融合基因与大肠杆菌表达载体pLY 4重组得到表达质粒pZWE ATF PAI2CD ,以其转化大肠杆菌JF112 5 ,经温度诱导 ,ATF PAI2CD获得较高水平表达 ,融合蛋白质以包涵体形式存在 ,占菌体总蛋白质的 15 %。包涵体经洗涤、8mol L尿素溶解、稀释复性及离子交换色谱一步分离 ,纯度达 90 % ,分子量与理论值相符。每升发酵液得重组融合蛋白质 5 0mg。经牛奶板法检测具有纤溶抑制活性 ,比活性达 12 0 0 0IU mg ;应用放射竞争法证实融合蛋白质能与肿瘤细胞表面的uPA受体特异性结合。双功能融合蛋白质的纤溶抑制活性与野生型PAI 2 (或PAI 2突变体 ,PAI 2CD)基本一致 ,与肿瘤细胞表面的uPA受体的结合能力同pro uPA。     

不同生育时期增铵营养对小麦生长及氮素利用的影响

通过两年的田间试验,研究了不同生育时期增铵营养(EAN)对小麦生长和氮素利用的影响．结果表明,田间增铵营养促进了小麦植株的生长和氮素吸收．其中基肥、分蘖期、拔节期EAN提高了小麦的干物质积累量、地上部氮积累量、有效穗数、叶面积指数、叶片叶绿素含量以及小麦的籽粒产量;孕穗期EAN效果不明显;全生育期EAN在促进生长方面的效果并无明显优势,但可有效降低土壤NO3^--N的淋溶损失．与对照相比,EAN提高了氮流效率和吸收效率,但以拔节前处理最为明显．拔节期EAN主要在于改善后期的叶片光合性能,并促进同化物向籽粒的再分配,而基肥和分蘖期EAN主要在于提高有效分蘖数．     

征稿启事

《激光生物学报》是中国遗传学会主办的学术期刊,主要刊登以人类、动物、植物和微生物为实验对象的激光（光）生物学、生物光子学、激光（光）生物医学（含光子中医学、光动力疗法、激光整形美容）、放射生物学（含激光育种、辐射育种、空间育种等）、离子束生物工程及其相关的激光生物技术（含微束照射技术、光镊技术、成像技术、光谱技术、共聚焦扫描显微技术、     

旋转磁场对60Coγ射线放射损伤小鼠肺损伤影响

目的:探讨旋转磁场对放射损伤小鼠肺损伤的影响.方法:132只雄性BALB/c小鼠随机分为正常组(N),单纯磁疗组(M),单纯照射组(R)和照射磁疗组(R+M)4组,R组和R+M组小鼠接受吸收剂量6.0Gy的60Coγ射线全身一次照射,M组及N组不予以照射,M组及R+M组予以磁场处理30 d,每天2次,每次1.5 h,分别于第9,23、30 d测定小鼠湿肺羟脯氨酸含量,并进行小鼠肺光镜、电镜超微结构的观察.结果:N组和M组肺羟脯氨酸含量在3个时间点上都低于R组和R+M组,有明显差别(P均＜0.05).R组和R+M组肺羟脯氨酸含量在3个时间点均无明显差别(P均＜0.05).苏木精-伊红染色结果显示,N组肺组织结构正常;照射后d9,R组及R+M组肺泡壁轻度增厚,普遍肺毛细血管扩张、充血,少量淋巴细胞、中性粒细胞浸润.小鼠肺组织透射电镜观察结果显示,照射后d30,N组及M组肺间质胶原纤维正常无增生;R组及R+M组肺可见肺间质胶原纤维较N组及M组明显增多,但R+M组与R组比较差别不明显.结论:6.0Gy的60Coγ射线照射后小鼠的肺受到了损伤,但磁场没有加重这种损伤且磁疗对正常小鼠无明显肺损伤.     

人工分离花粉生殖细胞的细胞生物学研究

采用压片法从三科七种植物的成熟花粉粒中分离出生殖细胞。干涉差显微术和视频增差显微术观察表明,分离的生殖细胞有完整结构和清晰的图象,并呈现由纺锤形到球形的各种形态;细胞形态的变化与培养基渗透压、微管稳定剂等因素有关。首次获得了生殖细胞的扫描电镜的立体形象。细胞壁化学成分的检测否定细胞壁的存在,微管蛋白的免疫荧光鉴定显示了微管系统的空间分布,生活力的荧光测定证实分离的细胞是生活的。讨论了分离生殖细胞研究的前景。     

MCI-154对大鼠心肌细胞的变力作用

钙增敏剂具有正性肌力作用,同时不增加细胞内钙浓度,因此可避免导致心律失常和最终心肌细胞死亡的钙超载。然而大部分钙增敏剂对心肌舒张功能有损害作用。MCI-154是一种钙增敏剂,但不损害舒张功能。为阐明其变力作用机制,我们应用离子成像技术研究了MCI-154对分离的单个大鼠心室肌细胞钙瞬变和收缩的影响,利用膜片钳技术观察了MCI-154对大鼠心室肌细胞L-型钙电流和Na^ ／Ca^2 交换电流的影响。结果表明：(1)MCI-154在1μmol／L至100μmol／L的浓度范围内对L-型钙电流（ICa-L)无直接影响：(2)MCI-154在轻微增加钙瞬变幅度和缩短心肌钙瞬变TR50和TR90的情况下,呈剂量依赖性地增加大鼠心室肌细胞的缩短;(3)MCI-154剂量依赖性地增加正常大鼠心室肌细胞的Na^ ／Ca^2 交换电流。这些结果提示：MCI-154不仅剂量依赖性地发挥了正性变力作用,对舒张功能也没有损害作用,明显不同于其它钙增敏剂,而且还轻微改善了大鼠心室肌细胞的舒张。其对内向Na^ ／Ca^2 交换电流的激动作用会加快钙内流,导致TR50和TR90的缩短,提示MCI-154是通过正向Na^ ／Ca^2 交换改善舒张功能的。     

碳中和的生态学透视

在简述碳中和概念的基础上, 重点对碳中和的实现途径及生态系统碳汇的重要性进行了评述, 认为碳减排和碳增汇是实现“碳中和”的两个决定因素; 碳减排的核心是节能、调结构、增效和发展清洁能源, 碳增汇的核心是生态保护、建设和管理。由于植被自然生长和生态建设等因素, 中国陆地生态系统发挥了, 并将在未来继续发挥着重要的碳汇作用。为增强生态系统的固碳能力, 作者提出“三优”生态建设和管理原则, 即“最优的生态系统布局、最优的物种配置、最优的生态系统管理”。此外, 文章还对“后碳中和”时代可能出现的问题和挑战进行了展望, 认为碳中和后, 由于气候变化, 特别是大气CO₂浓度增速减缓甚至下降等因素, 可能导致全球性的植被生产力下降, 对此可能带来的新的环境问题需要提前谋划和应对。     

PKB/Akt在高脂诱导鼠肾脏损害中的作用

目的：通过建立高脂血症大鼠模型,探讨单纯高脂对肾脏的损伤机制以及胰岛素传导通路中的关键酶PKB/Akt（丝氨酸/苏氨酸激酶）在高脂所致肾脏损害中的变化和意义.方法：高脂高胆固醇喂养Wistar雄性大鼠,建立胰岛素抵抗模型.分别在4周、8周、12周测定大鼠的肾功,包括血尿素蛋（BUN）,肌酐（CREA）;16周时测定甘油三酯（TG）,胆固醇（TC）,以及血糖（FBS）和胰岛素（FINS）.8周时行胰岛素增敏剂文迪雅（3mg/kg）灌胃干预四周,并行肾脏病理检查,应用免疫组化法监测PKB/Akt在肾脏的表达.结果：高脂喂饲大鼠4周后,进食量开始减少,体重增加减慢;血BUN、血CREA在4周时已升高,至8周时增加更明显（p〈0.001）.文迪雅灌胃四周后肾功改善,但仍高于正常组（p〈0.05）.血TG和血TC较正常组升高显著,统计学差异显著（p〈0.05）.血胰岛素升高,但胰岛素敏感性降低,胰岛素抵抗指数增加显著,提示胰岛素抵抗形成.肾脏免疫组化PKB/Akt的表达呈现为在肾小球和肾小管分布不均,出现PKB/Akt在损伤较重的肾小球不表达,而在损伤较轻的肾小管表达减弱的现象.结论：饮食诱导的高脂血症可导致健康大鼠产生脂质肾毒性损害以及肾功的降低,并可产生胰岛素抵抗.胰岛素传导通路的损害在肾小球和肾小管表达不同,说明其可能是产生肾脏损伤及胰岛素抵抗的又一原因.胰岛素增敏剂可改善胰岛素抵抗及肾功.