Fractogel EMD“触角型”阴离子交换介质用于病毒纯化和去除

Fractogel EMD是合成的聚甲基丙烯酸酯树脂，十几个官能团排布在线形聚合物长链上，称为“触角”，所有的“触角”都是通过共价键结合到聚合物骨架上，生物分子更加容易和“触角型”介质的官能团结合，并且可以大大降低生物分子和介质基质的非特异性相互作用，提高生物分子的回收率。     

野生鹤虱籽的加工及综合利用研究

鹤虱籽为伞形科胡萝卜属二年生草本植物鹤虱(Daucus Carota L.)的种籽。鹤虱高20～120cm,茎直立,分枝少,根生叶有长柄、互生、橙红色的纺锤形根,花白色或黄色,或粉色,或紫红色。籽淡绿色。江苏与湖南等地尚有以伞形科香根芹属植物香根芹(Osmorrhiza aristata(Thumb.)Makino.et Yabe.)的果实作鹤虱使用(因别名都叫野胡萝卜),但不能与D.Carota L.相混淆。鹤虱有野生和家化栽培两种。江苏、河南、湖北、浙江、山西、安徽、     

养殖江蓠化学成分和提取工艺

红藻江篱 Gracilaria verrucosa(Huds.)Papenf.很早在世界上就做为有价值的琼脂原料。为了合理利用江篱的养殖品,在我们试验最初阶段进行了化学成分测定,对该种藻类的工艺特性进行了预评价。江篱的两个变型:长枝江篱 f.procerrima 和丛江篱 f.dura 是在养殖场养殖的,后一变型是自然植丛。     

桔皮果胶提取条件的选择

用酸浸提、酒精沉淀法,从桔皮中提取果胶,通过正交设计分析,获得最佳得率的工艺条件。即果胶浸提液的酸度为pH2,反应时间2小时。沉淀果胶的酒精浓度为50％,其得率是12.6％。     

一种纯化细菌有机磷水解酶的简便方法

Cibacron blue T_3GA与溴化氰活化的Sepharose 4B偶联后,产生一种能有效地分离有机磷水解酶的吸附剂。用0.15mol/L MgCl_2溶液从黄杆菌P3—2细胞抽提出的粗酶液通过柱层析分离,即可得到纯化8倍、酶活性回收率为269.4％的纯酶制品。该酶制品用凝胶电泳测是均一的。     

猪肺血管紧张素转换酶的提纯

本文报道了猪肺血管紧张素转换酶(ACE)的提纯方法及其鉴定,并讨论了方法的改进。肺匀浆经1.6—2.6mol/L硫酸铵沉淀,Sephadex G-200凝胶过滤,DEAE-Sephaeel及羟基磷灰石柱层析步骤,从168克肺中获得4.5毫克酶蛋白纯品。活力回收45.2％,比活力15.6单位/毫克蛋白;和匀浆上清比较,提纯390倍。经聚丙烯酰胺凝胶电泳(pH8.3)鉴定为一条带。按SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)测得其分子量为132,000道尔顿。酶蛋白在-30℃貯存10月,比活力丢失30％。     

人工流产物中HCG的分离与纯化

人绒毛膜促性腺激素(HCG)是生物活性类似于促黄体生成激素的促性腺糖蛋白激素,临床上需要量较大。目前主要是从孕妇尿中提取,但尿中HCG的含量比较低,为了扩大HCG的来源,我们进行了从人工流产物中分离与纯化HCG的研究。 1 材料和方法 1.1 主要试剂和器材 95％乙醇;3mol/L HCl;1/15mol/L醋酸缓冲液pH5.1;0.005mol/L磷酸缓冲液pH7.0;DE-52(Whatman进口分装);HCG标准品(购自北京生物制品检定所);抗HCG单抗酶标盒(卫生部兰州生物制品所提供);HSC-20RB高速离心机(图门);DG3022A型酶标光度计(南京)。 1.2 HCG效价测定 用酶联免疫吸附试验法测     

神经节苷脂纯化方法的改进

神经节苷脂(ganglioside,Gls)的分离与纯化是研究组织细胞Gls组成、含量及代谢的基本手段。由于Gls在神经以外组织中含量甚微,而且因组织、细胞的不同,影响Gls纯化的因素也不同.在实验过程中常常由于方法选择不当致使实验失敗.本文介绍一种改进的方法,它操作简单,适用于大鼠多种组织,因     

人α1/158Ⅴ型(α1c型)干扰素基因在大肠杆菌中的表达及其产物的初步纯化

采用DNA聚合酶链反应(PCR)技术,将本实验室从中国人胎肝细胞染色体DNA中发现和分离的IFN-α1/158V基因的原始克隆,改造成适于进行非融合蛋白原核表达的结构形式,并在大肠杆菌中获得高效表达。测得重组IFN-α1/158V的抗病毒活性为1.9×10~7单位/升菌液。随后又采用以单克隆抗体亲和层析为主的纯化流程对表达产物进行初步纯化,获得了在SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳上呈现单一条带的纯化产物。     

利用带有原核增强子样序列的新型载体在大肠杆菌中高效表达人α肿瘤坏死因子

将去除信号肽的人肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)cDNA插入到带有原核增强子样序列Px的新型表达载体pBV320中,使TNF cDNA 5′端直接置于大肠杆菌trp启动子下游,采用37℃恒温培养,使TNF在大肠杆菌中获得了高效表达,表达活性达1.35(±0.17)×10~6U/L菌液。表达的TNF-α对L929细胞的毒性作用可被抗人肿瘤坏死因子-α的单克隆抗体所中和。表达菌裂解液作SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,显示有一条分子量与TNF分子量吻合、约为17000道尔顿的蛋白带。利用DEAE-Sepharose阴离子交换层析及Sephacryl S-200凝胶过滤对上述重组人TNF-α进行纯化,获得电泳纯产品,比活性为1.48×10~6U/mg。