一种适合稻水象甲双向电泳的蛋白质提取方法

【背景】蛋白样品制备是2-DE蛋白组学研究的关键步骤,无杂质、高纯度的蛋白样品是获得良好的2-DE结果的基础。选择合适于昆虫蛋白组学研究的常规蛋白提取方法是2-DE研究的前提。【方法】通过饱和酚法和TCA-丙酮法提取稻水象甲成虫总蛋白,比较2种方法的优缺点,以回避昆虫组织蛋白提取时可能出现的问题。【结果】TCA-丙酮法的蛋白质产率(14.55μg·mg-1)显著高于饱和酚法(9.30μg·mg-1),2种方法获得的SDS-PAGE条带结果相近,且高丰度表达蛋白在TCA-丙酮中更高表达;饱和酚的2-DE图谱蛋白点清晰,TCA-丙酮法2-DE图谱蛋白点规则但背景模糊,出现多条横纹。【结论与意义】饱和酚法适合稻水象甲成虫蛋白组学的研究。这2种方法也能适用于其他昆虫,但不同的昆虫体内有不同的干扰组分来干扰蛋白质的提取,所以获得的蛋白纯度及提取得率可能并不一样。试验结果说明了2种蛋白提取方法对2-DE研究的影响,并为稻水象甲成虫的蛋白组学研究提供了一定的参考依据。     

拟口蘑属一新种

本文报道产自吉林省舒兰县的拟口蘑属(Tricholomopsis)一新种:舒兰拟口蘑(T.shulanensis X.He)。文中还对作为该属模式种的赭红拟口蘑(T.rutilans)的侧囊体存在与否阐述了意见。     

中国卷叶蛛科一新属新种记述：蛛形纲：蜘蛛目

本文记述采自安徽休宁县齐云山卷叶蛛科(Dictynidae)一新种。因该科内无可容纳此新种的属,故建立齐云蛛属Qiyunia gen.nov.并将新种定名为列氏齐云蛛,新属新种。文内列表比较了洞叶蛛亚科(Cicurininae)布朗蛛 Brommella和旋栓蛛 Lathys两近似属与新属的鉴别特征。     

湖北省盖蛛属二新种：蜘蛛目：皿蛛科

本文记述了采自湖北省神农架林区的盖蛛属Neriene二新种:鹰喙盖蛛 Neriene aquilirostralis,丽带盖蛛 Neriene calozonata。从外生殖器形态结构对新种与其近似种进行了比较。鹰喙盖蛛与人井盖蛛 N.oidedlcata Helsdingen近似;丽带盖蛛与饰斑盖蛛 N.compta Zhu et Sha 近似,但是,它们在外生殖器形态结构上存在显著差异,可以明确将其区分开。     

盎堂拟鲿Pseudobagrus ondon Shaw的重新描述(鲇形目:鲿科)

本文录用了8个水系的盎堂拟鲿标本214尾。分析了实际考察中收集的种群资料。把拟鲿属Pseudobagrus Bleeker中,胸鳍硬刺的前、后缘均有锯齿,前缘的细小;项部有淡色横带纹特征,在生长发育中有幼体和成体,雌鱼和雄鱼的差别,而误定名为盎鲿鱼Pseudobagrus ondon Shaw、信阳(鱼盎)Leiocassissinyanensis Fu 两个种及朝鲜的未定名种 Pseudobagrus sp.Uich。实属同物异名,现依优先权的命名法规,归并为盎堂拟鲿 Pseudobagrus ondon Shaw。论述了归并理由,并给予重新描述。     

陕西七纺器蛛和拉土蛛不同组织酯酶同工酶的比较研究

陕西七纺器蛛(Heptathela shaanxiensis),拉土蛛(Latouchia sp.)均于1987年10月采自陕西泾阳。在同条件下采用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术进行了不同组织的酯酶同工酶比较。实验方法酶液的制备:将饥饿10天的两种蜘蛛按常规解剖,分别取各组织置于研钵内,根据样品重量之差异,分别加入40%蔗糖溶液1—3ml,匀浆过滤,离心(3500rpm×15′)。取上清液作酶源,贮存于4℃冰箱备用,点样时加入适量0.1%澳酚蓝作电泳的指示染料。酯酶同工酶的聚丙烯酰胺疑胶电泳分离和染色、脱色:基本参照邱琼华等(1987)的方法。用日本20M光密度计(波长570nm,狭缝0.4cm)扫描…     

拟石莲花离体叶片的不定芽分化及其和内源激素状况的关系

拟石莲花(Echeveria secunola)离体叶片不定芽的分化位点是离区叶柄主叶脉组织伤口处,通常每叶片分化一个芽,分化率为 100％,在分化过程中,叶柄中的 iPA(核糖基去羟基玉米素)、GA含量及iPA/GA之比值有升高趋势,叶身中则相反。外源激素处理试验表明,玉米素增芽效果显著;吲哚乙酸微弱;赤霉素既促进又阻抑;脱落酸阻抑延迟芽分化。     

大鼠肾近球小管细胞胞饮体膜氢泵活性和水的渗透性转运的特征

本实验采用异硫氰酸-葡聚糖荧光素(fluorescein isothiocyanate-dextran,FITC-dextran)体内标记法,研究大鼠肾近球小管细胞胞饮体(endosome)膜上 H~+-ATP 酶的活性及水的渗透性转运。通过观察在胞饮体外加入一定量 ATP 后,胞饮体内 pH 值的时间反应曲线,从而测定 ATP-依赖的 H~+在胞饮体膜上的转运情况。胞饮体内的酸化速度及 pH 的最低值与加入的 ATP 浓度有关。在加入 ATP 前,胞饮体内的 pH 值为7.4,加入不同浓度的 ATP 后,即[ATP]为0.005,0.05,0.5,5和10mmol/L,胞饮体内 pH 最低值分别为7.30,6.99,6.68,6.38和6.39。此种由 ATP 引起的酸化反应,被0.5mmol/L N-ethylmaleimide(NEM)抑制97%,但不被钒酸盐和 oligomycin 所抑制。实验还同时观察了此种胞饮体水的渗透性转运机制。通过在胞饮体膜内外建立一个蔗糖浓度梯度。观察 FITC-dextran 荧光信号的快速动力学变化过程,从而测定由于渗透压梯度引起的水在胞饮体膜上转运的特征。在230℃时,水的渗透性通透系数(osmotic water permeability coefficient,P_f)为0.03cm/s;加入0.5mmol/L HgCl_2后,水的转运被抑制70%。此抑制反应可被5mmol/L 巯基乙醇(β-Mcrcaptoethanol)完全逆转。上述结果提示:大鼠肾近球小管胞饮体膜含有H~+-ATP 酶和水的转运通道。胞饮