拟草果总黄酮制备纯化及抗炎活性研究

该文在前期研究的基础上,以拟草果的甲醇粗提液为原料,研究拟草果总黄酮成分的纯化方法以及考察拟草果总黄酮的抗炎活性。结果表明:通过静态吸附-洗脱试验,筛选出HP-20为纯化拟草果总黄酮的最佳大孔吸附树脂;以吸附率、解吸率等参数为指标,考察上样液和洗脱液的质量浓度、体积、流速等因素对纯化工艺的影响,确定最佳工艺条件为上样液质量浓度0.5 mg·m L^-1、上样体积流量4 m L·min^-1、上样体积15 BV、洗脱剂乙醇浓度70%、洗脱流速2 m L·min^-1、洗脱剂用量10 BV,在此条件下纯化的总黄酮保留率为65.48%;通过检测获得的拟草果总黄酮对脂多糖刺激的小胶质BV2细胞中白介素(IL)-6水平的影响,发现其可显著下调炎症因子IL-6的表达,具有一定的抗炎活性。     

丛枝菌根真菌对砷胁迫下棉花根系形态和生理特征的影响

以棉花品种'大铃棉69号'为材料,通过室内盆栽试验,将两种丛枝菌根真菌根——内根孢囊霉(Rhizoph-agus intraradices,RI)和摩西斗管囊霉(Funneliformis mosseae,FM)分别接种棉花根部,分析不同土壤砷浓度(0、100、200 mg/kg)条件下丛枝菌根真菌对棉花生长、根系特征...     

响应面优化超声波辅助提取蓝靛果花色苷及抗炎活性研究

[目的]为筛选超声波辅助法提取蓝靛果花色苷的最佳提取条件并对花色苷的抗炎活性进行初步探讨。[方法]以勃利县野生蓝靛果为原料,在单因素试验基础上,利用Box-Behnken软件进行响应面优化分析。采用CCK-8法检测花色苷对巨噬细胞RAW264. 7增殖的影响,采用Griess法检测花色苷对RAW264. 7细胞NO释放能力的影响。[结果]蓝靛果花色苷超声辅助的最佳提取条件为乙醇浓度80%、料液比1∶10、超声功率80 W、超声时间40 min,且花色苷具有抗炎活性。[结论]利用响应面法可获得超声波辅助提取蓝靛果花色苷的最佳工艺参数,在此工艺条件下,花色苷提取量为596. 235 mg/100 g,花色苷提取液(25～400μg/m L)对巨噬细胞RAW264. 7增殖无影响,能够显著抑制NO释放。     

乙肝病毒感染与抗中性粒细胞胞浆抗体相关性分析

目的 探讨乙肝患者病毒复制活动情况与血清抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)的相关性.方法 回顾性分析浙江大学医学院附属第一医院近三年来慢乙肝患者临床资料,排除并发自身免疫性肝病、酒精性肝病、药物性肝病等其他肝病和并发其他病毒感染,完善ANCA检测,共有21例患者纳入.根据乙肝患者入院后检测HBV DNA的拷贝水平,将患者分为HBV复制活动组和合HBV复制非活动组,根据ANCA检出情况又可分为ANCA阳性组和阴性组.采用实时荧光定量PCR检测HBVDNA拷贝水平,间接免疫荧光方法检测血清ANCA水平.结果 21例患者中,HBV复制活动组(11例)中pANCA阳性患者6例(55.5％),而HBV复制非活动组(10例)中pANCA阳性患者0例(0％)(x2=5.198,P=0.023).pANCA阳性组(6例)中HBV复制活动患者6例(100％),而pANCA阴性组(15例)中HBV复制活动患者5例(33.3％)(x2=5.198,P=0.023).而两组患者中肝硬化患者、原发性肝癌患者和ABO血型检测差异无统计学意义(P＞0.05).结论 乙肝病毒活动可能引起血管损害,同时乙型肝炎病毒引起的血管损害并不一定增加肝硬化和肝癌的发生.     

抗 HER2-hTNF-α新型免疫毒素的制备及功能研究

HER2/neu 基因在肿瘤中的过度表达使其成为许多肿瘤的标志分子 . 为了增加过度表达 HER2/neu 的肿瘤细胞对肿瘤坏死因子 (TNF) 的敏感性和提高 HER2/neu 抗体的肿瘤杀伤效应,将抗 HER2/neu 单链抗体 C6.5 与人肿瘤坏死因子 hTNF-α融合,构建了 scFvC6.5-hTNF-α融合蛋白,完成了重组蛋白在大肠杆菌中的表达,产率为 400 μg/L 菌液 . 经过亲和层析和柱复性,融合蛋白的纯度达 95％以上 . ELISA 试验表明, scFvC6.5-hTNF-α能够特异结合 HER2/neu 阳性卵巢癌细胞 SKOV-3 和乳腺癌细胞 MCF-7 ,而不结合 HER2/neu 阴性的黑色素瘤细胞 A375. MTT 试验表明, scFvC6.5-hTNF-α能够选择性地杀伤 SKOV-3 和 MCF-7 细胞,而不影响 A375 细胞的生长 . 这种肿瘤细胞特异性杀伤作用提示该免疫毒素具有肿瘤靶向治疗的潜在应用价值 .     

用体内叶绿素a荧光诱导动力学鉴定番茄的抗冷性

研究了冷害温度对具有不同抗冷性品种的番茄叶片的体内叶绿素a荧光诱导动力曲线的影响。实验结果指出,在低温处理(8℃,5℃,2℃下,暗中24小时)后,番茄叶片的体内叶绿素a荧光诱导动力学曲线有了明显的改变,Fv／Fo值、Rfd值降低了,光系统II原初光能转换效率和潜在的光合活力均受到抑制。我们在苗期和开花期得到的实验结果均表明,在番茄叶片的叶绿素a荧光诱导动力学曲线和这些荧光参数改变的程度与该品种的已知抗冷性之间呈现较好的相关性。我们认为,体内叶绿素a荧光诱导动力学方法是鉴定番茄抗冷性的一个快速、灵敏和可靠的方法,并可用于其他绿色植物的抗冷性鉴定中。     

野生和栽培马蹄金抗旱性比较及其抗旱机制初探

 为了鉴别野生和栽培马蹄金（Dichondra repens）的抗旱性,探讨其抗旱适应性的生理机制,对野生和栽培马蹄金进行了土壤水分胁迫处理,系统测定了野生和栽培马蹄金叶片内超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化物酶（POD）、硝酸还原酶的活性和游离脯氨酸、可溶性糖、可溶性蛋白、NO₂^- /NO₃^-含量以及总DNA片断化程度。结果表明野生和栽培马蹄金在抗旱适应性上存在显著差异。随水分胁迫强度的增加,野生马蹄金叶片内抗氧化酶活性及其升高幅度,渗透调节物质的积累量及积累速度均高于栽培马蹄金,而叶片含水量下降的程度、DNA片断化程度低于栽培马蹄金,其中野生和栽培马蹄金叶片内NO₂^- /NO₃^-含量,硝酸还原酶的活性变化差异尤其显著,野生马蹄金叶片内的NO₂^- /NO₃^-含量、硝酸还原酶的活性明显高于栽培马蹄金,二者最大含量分别相差10和2.2倍。研究结果说明了野生马蹄金对干旱环境的适应性强于栽培品种;在干旱逆境下马蹄金叶片内的NO₂^－ /NO₃^－含量的变化在一定程度上可能反映了内源NO的变化,内源NO浓度的高低可能是野生和栽培马蹄金不同抗性的真正原因。     

植物酶系统对UV-B辐射的响应机制

紫外辐射作为一种自然界存在的环境因子,影响着植物的生长发育。在植物从太阳辐射中获得光照和热量的同时,不可避免地要受到UV-B辐射的胁迫。植物在长期对环境的适应中,在体内形成了防御系统,以保护自身的安全,酶系统是其中之一。植物酶系统在实施防护的同时也受到了UV-B辐射的影响,信号分子对调节酶响应UV-B胁迫起了关键作用。本文重点论述了UV-B辐射增强下,植物酶系统的变化、植物酶系统的响应机制以及酶系统与信号物质的关系,并对该领域未来的研究方向提出了展望。     

白桦BpERF98基因的遗传转化及非生物胁迫应答反应

非生物胁迫严重影响植物的生长发育,植物通过内部的分子调控机制抵御这种伤害,其中转录因子发挥了至关重要的作用。从野生型白桦（Betula platyphylla）叶片克隆BpERF98基因,通过农杆菌介导法获得过表达BpERF98的转基因白桦植株。测量转基因白桦和野生型白桦在低温、冻害和盐胁迫下的生理指标并进行差异性分析。通过分析发现,在非生物胁迫下转基因白桦的丙二醛含量及相对电导率均低于野生型株系,且转基因株系SOD和POD活性的增长明显高于野生型株系。结果表明,过表达BpERF98基因可以提高白桦对非生物胁迫的抵御能力,这为研究白桦在非生物胁迫下形成的分子机制及白桦抗性分子育种提供了依据。     

小菜蛾溶菌酶Pxlys的基因克隆及其重组蛋白的抗菌活性分析

[目的]本研究旨在通过研究小菜蛾Plutella xylostella溶菌酶的功能,进一步认识小菜蛾的免疫防御机理,为小菜蛾的生物防治提供新的思路.[方法]利用RACE技术克隆小菜蛾溶菌酶基因.构建原核表达载体pET-29a-Pxlys,利用原核表达系统表达并用镍柱亲和层析纯化重组蛋白Pxlys.利用牛津杯法检测重组蛋...