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991.
癌细胞逆转过程中N-cadherin与间隙连接蛋白Cx43功能表达的关系 总被引:1,自引:0,他引:1
钙粘合蛋白 (N cadherin ,N cad)在人肺癌细胞的表达明显低于正常人肺细胞 .肺癌细胞的间隙连接通讯功能缺陷 ,连接蛋白Cx43表达抑制 .Cx43cDNA转染肺癌细胞的 4个阳性克隆其Cx43蛋白表达升高水平相近 ,但通讯功能有差别 ,与各克隆N cad的表达水平有正相关性 .N cad表达高的克隆Cx43在膜间隙连接的分布和通讯功能最明显 ,细胞分化改善 ,在裸鼠体内生长抑制 (抑制率 75 % )有显著性 .反之N cad表达低的克隆Cx43在膜间隙连接不明显 ,细胞通讯功能弱 ,恶性表型无逆转 .提示N cad与Cx43转录后表达过程的调节密切相关 ,两者介导的粘合和通讯功能有协同促进肺癌细胞逆转的作用 . 相似文献
992.
细胞凋亡过程中bcl-2基因的甲基化 总被引:6,自引:0,他引:6
为探讨凋亡过程中,bcl-2基因下调与该基因甲基化状态的关系,用5-氟尿嘧啶(5-Fu)诱导小鼠成纤维细胞NC3H10,TC3H10及人乳腺癌细胞MCF-7的凋亡,分别检测了这三种细胞凋亡过程中bcl-2的表达变化,与其调控区及编码区的甲基化状况.我们曾观察到5-Fu作用24~48h出现细胞存活率下降,DNA梯状断裂及细胞周期凋亡峰显现等典型凋亡现象.Northern杂交显示,在5-Fu作用12h时bcl-2mRNA水平已明显降低.由此,我们用小鼠bcl-2(mbcl-2)及人bcl-2(hbcl-2)基因调控区PCR扩增片段及bcl-2编码区(cDNA)片段作为探针,与5-Fu作用12h的细胞DNA的MspⅠ/HpaⅡ酶切产物进行Southern杂交,以未作用的细胞DNA同样酶切杂交为对照.通过杂交带谱的变化,分析bcl-2基因的甲基化状况.结果显示:mbcl-2及hbcl-2在5-Fu作用12h后调控区甲基化水平增高,但其编码区甲基化状态皆未出现可检出的变化.上述结果提示:bcl-2基因调控区甲基化水平升高可能与该基因下调有关 相似文献
993.
小鼠成纤维细胞凋亡过程中P53与bcl-2表达的时序性 总被引:11,自引:0,他引:11
为探讨细胞凋亡过程中,bcl-2与P53,这两种凋亡关键性基因的相互关系,用5-氟尿嘧啶(5-Fu)诱导小鼠正常与恶性转化的成纤维细胞的凋亡,观察了这两种基因在凋亡过程中表达变化的时序.经流式细胞计检测,这两种细胞在5-Fu作用24h均出现了凋亡峰,细胞存活率随之下降,DNA电泳显现梯状断裂.Northern杂交结果显示,在5-Fu作用6h后两种细胞P53mRNA水平已明显增高,而bcl-2mRNA水平则在作用12h方明显降低.P53上调与bcl-2下调的明显时序性,说明P53具备作为bcl-2基因负调控转录因子的条件.由此,为进一步了解凋亡过程的bcl-2基因下调机理提供了线索 相似文献
994.
维甲酸对鼻咽癌细胞生长、表型和瘤基因表达的作用 总被引:1,自引:0,他引:1
研究了维甲酸(RA)对鼻咽癌细胞生长、表型和癌基因表达的作用.用RA诱导鼻咽癌细胞,绘制诱导前后的细胞曲线,观察细胞形态,并用Northern杂交和DNaseⅠ超敏感区分析法检测基因表达和调控.结果表明,RA能显著抑制鼻咽癌细胞的生长,前5d下降约50%.RA处理后的细胞从典型的多边形形态变成扁平、细长,类似纤维细胞状的形态.RA诱导前c-myc基因和c-Ha-ras基因HNE2细胞中高表达,而诱导后c-myc基因表达水平急剧下降,c-Ha-ras基因无明显改变.在实验中还发现RA诱导前后的c-myc基因和c-Ha-ras基因中一些重要的超敏感位点和它们的功能.由实验结果可得到如下结论:RA能促进鼻咽癌细胞分化,通过对染色体上调控位点的作用来抑制c-myc基因的表达,DNaseⅠ超敏感位点与细胞的分化程度、细胞的组织特异性和基因表达状态有关,c-myc基因可通过不同的调控方式而失活. 相似文献
995.
为了探讨不同种属血管细胞中iNOS基因诱导表达的差异及其分子机制,采用North-ern印迹、电泳迁移率改变分析(EMSA)和细胞转染实验对iNOS基因在人、牛、大鼠血管内皮细胞(EC)和兔、大鼠平滑肌细胞(VSMC)中的诱导表达和转录调控机制进行了研究.结果显示,IL-1β可诱导人、大鼠的EC和大鼠的VSMC表达iNOS,但对兔VSMC和牛EC无诱导作用.在IL-1β+TNF-α+LPS作用下,人和大鼠血管细胞iNOS的表达活性显著高于牛和兔,同一种属动物的VSMC比EC更易被诱导活化.用含有大鼠iNOS基因上游-1037~-438片段的报告基因转染这些细胞,经细胞因子和LPS处理后,被转染细胞的CAT活性变化与细胞的iNOS表达活性相一致.上述结果表明,iNOS表达调节具有种属特异性和细胞特异性.EMSA证实在不同种属的EC和VSMC中,与iNOS基因表达调控区(-1037~-787)相互作用的蛋白因子是不均一的.提示不同种属血管细胞内特异转录因子的种类及浓度不同和(或)反式因子与顺式元件相互作用的方式不同可能是这种差异的分子基础. 相似文献
996.
寡聚脱氧核苷酸的结构与抗降解特性的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
合成了4段具有不同高级结构或不同修饰的寡聚脱氧核苷酸,检查它们在20%血清中的稳定性.发现:(1)寡核苷酸主要被血清中的3′外切核酸酶降解,未经修饰的线性寡核苷酸降解严重;(2)末端部分硫代修饰的寡核苷酸稳定性明显提高;(3)自身互补形成的配对结构可有效保护3′末端.具有4个以上(含4个)GC对的3′端发夹结构寡核苷酸,其抗核酸酶的能力几乎与硫代修饰的寡核苷酸相当. 相似文献
997.
Ca^2+与细胞凋亡 总被引:2,自引:0,他引:2
Ca^2+在某些因素诱导的细胞凋亡中起着重要信使作用。细胞内Ca^2+浓度上升可来源于胞外Ca^2+内汉、内库钙动员或者二者兼之。 相似文献
998.
应用定量X-射线微区分析技术结合细胞化学技术,分析测定用单纯冷冻法保存离体猫肾脏过程中肾脏细胞的胞浆、线粒体、内质网、细胞核等细胞器内的Ca2+浓度变化,并探索钙通道阻滞剂对这种变化的影响。保存36小时及72小时后,线粒体与胞浆中Ca2+的峰背比极显著地提高,内质网、细胞核中钙颗粒减少。添加Verapamil后,保存过程中细胞器内Ca2+无显著变化。线粒体中的Ca2+峰背比与胞浆中的呈强的正相关,r=0990。实验结果显示:保存过程中,Ca2+由钙库(内质网等)进入胞浆中,线粒体在胞浆Ca2+浓度高时摄取Ca2+,而钙通道阻滞剂可抑制该过程。 相似文献
999.
为了减少rIL-2工程菌高密度培养时乙酸的积累,在诱导阶段对该工程菌进行细胞再循环培养的研究,比较了细胞再循环补料液、pH、细胞循环培养时间段对工程菌的生长及rIL-2表达的影响。结果表明在菌密度D_(600)为50时,细胞再循环补料液中酵母抽提物与胰蛋白胨浓度为发酵培养基的5倍就能满足rIL-2表达的需求,同时选择诱导后4~6h之间的细胞再循环培养能有效地防止乙酸的过高积累并减少营养物质的损失,有利于rIL-2的表达。根据以上研究结果得到了rIL-2工程菌诱导阶段细胞再循环培养方法,使得在诱导前菌密度D_(600)为50左右时rIL-2的表达水平约为40%。 相似文献
1000.
低能离子束对微生物细胞的刻蚀与损伤研究 总被引:23,自引:0,他引:23
以耐辐射异常微球菌和大肠杆菌为试材,用显微扫描电镜(SEM)和电子自旋共振(ESR)波谱仪研究了20keV的N^+离子注入对其细胞的作用。结果表明,N^+离子注入对两种微生物既存在着直接作用的刻蚀损伤又存在着能量沉积所产生自由基的间接作用;对细胞的直接刻蚀作用是导致DNA损伤和生物诱变的主要原因,而自由基所引起的主要是DNA以外生物大分子的损伤和细胞的膜脂过氧化。随着注入剂量增大,两种微生物细胞受 相似文献