pH对灵芝液态发酵代谢物及抗氧化活性的影响

已有研究报道灵芝栽培生长的最适pH在中性偏酸环境,在碱性范围的生长及代谢情况鲜见报道。本研究主要探究广泛pH对灵芝液态发酵代谢物及其抗氧化活性的影响。采用摇瓶液态培养后分析代谢物中灵芝三萜、胞内外多糖、菌丝体蛋白及抗氧化活性等指标,系统比较灵芝菌丝体在pH值2-11的生长和代谢情况。研究结果表明,灵芝菌丝体生长、合成灵芝三萜、胞内多糖、30E胞外多糖、菌丝体蛋白和菌丝体水解氨基酸的最适pH值分别为10、3、2、7、2和2。对应结果分别为17.13 g/L、33.86 mg/g、72.73 mg/g、7.86 g/L、71.42 mg/g和107.10 mg/g。比对照分别提高28.5%、77.3%、22.4%、96.5%、97.1%和70.8%。胞内多糖组分1和组分2最高分子量均在初始pH 4,分别为1.016×10⁸ g/mol和9.280×10⁴ g/mol,胞外多糖组分1最高分子量在初始pH 10,为4.946×10⁶ g/mol;对菌丝体的总抗氧化能力、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2- picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除能力、羟自由基清除能力分析结果表明最佳的初始pH分别为3、7、9。本研究为液态发酵方式下灵芝生长及其代谢物定向调控发酵的工艺优化提供参考依据,同时发现灵芝菌丝体中优质蛋白及抗氧化活性可在功能性食品和化妆品领域推广应用。     

小牛类表皮生长因子活性肽（c－EGF）的分离纯化及性质

本文报道小牛颌下腺通过酸抽提、ＣＭ５２、ＤＥ５２柱层析、ＳｅｐｈａｄｅｘＧ７５凝胶过滤及ＨＰＬＣ等步,分离纯化到一个分子量为６ｋＤ,等电点为４．６的小肽。该小肽类似人重组表皮生长因子（ｒｈ—ＥＧＦ）的生物活性,具有刺激ＮＲＫ细胞的增殖及刺激新生小鼠的睁眼、萌牙,并具有增加Ａ４３１细胞膜蛋白质磷酸化的功能。氨基酸组成缺少苯丙氨酸及苏氨酸残基。我们命名它为小牛类ＥＧＦ样活性肽（ｃａｌｆＥＧＦ－ｌｉｋｅａｃｔｉｖｅｐｅｐｔｉｄｅ,简称ｃ－ＥＧＦ）。     

噬菌体短肽库的构建及其随机短肽的多样性

噬菌体短肽库是将随机合成的寡核苷酸序列通过与单链噬菌体外壳蛋白基因融合,从而将随机短短肽表达于噬菌体的表面,将体外随机化学合成的寡聚核苷酸序列重组到单价噬菌体表达载体,构建了噬菌体短肽库,证明其库容为２×１０＾７集落形成单位,重组率为９３％。     

炎症介质在内毒素引起大鼠肠系膜血管床降钙素基因相关肽释放中的作用

本研究在离体大鼠肠系膜血管床灌流模型上,采用特异放免法测定灌流液中的降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）,观察几种常见炎症介质在内毒素引起ＣＧＲＰ释放中的作用。结果显示：前列腺素合成酶抑制剂地塞米松、布洛芬与消炎痛,缓激肽受体Ｂ２拮抗剂ＨＯＥ１４０,血小板激活因子拮抗剂ＷＥＢ２０８６,组胺Ｈ１受体拮抗剂苯海拉明以及和组胺Ｈ２受体拮抗剂西咪替丁,均能明显抑剂制内毒素引起的ＣＧＲＰ释放,５羟色胺受体拮抗剂ＩＣＳ２０５９３０却无明显作用。从而提示：内毒素引起ＣＧＲＰ释放是通过炎症介质前列腺素、缓激肽、血小板激活因子和组胺介导的,阻断或减少炎症介质的产生可望减轻内毒素血症时ＣＧＲＰ的过量释放。     

人卵泡促性腺激素释放肽（hF－GRP）的STM研究

人卵泡促性腺激素释放肽（ｈＦ－ＧＲＰ）为一只含１４个氨基酸的多肽类激素,我们已经用２Ｄ－ＮＭＲ技术测定了它的溶液构象,本文又用ＳＴＭ技术观察了ｈＦ－ＧＲＰ单层铺展时的分子图象,测得其分子大小约为２．４ｎｍ,并用２Ｄ－ＮＭＲ结果较好地解释了所得的图象。     

蜘蛛杀虫肽在大肠杆菌中的表达及其活性分析

以Ｔ７为启动子构建了蜘蛛杀虫肽基因的表达质粒ｐＴＨＩ１９,转化大肠杆菌ＢＡＬ３１,在其对数生长期加入１ｍｍｏｌ／Ｌ ＩＰＴＧ能诱导杀虫肽的产生,表达产物占菌体总蛋白的１３．７５％,并且表达的杀虫肽具有功能活性。     

豚鼠胸腺含P物质、降钙素基因相关肽和神经肽Y神经的定位研究

为研究神经肽调节胸腺生理功能的作用途径,作者采用免疫组织化学ＡＢＣ法结合ＧＤＮ增强技术,以３０μｍ厚恒冷箱切片光镜下观察了豚鼠胸腺内含ＳＰ、ＣＧＲＰ和ＮＰＹ神经纤维的定位与分布。结果发现,ＳＰ和ＣＧＲＰ免疫反应神经纤维在胸腺内分布广泛,呈线状或串珠状,可见于血管周围,小叶间结缔组织和胸腺实质。实质中以皮髓质交界区和髓质区纤维分布较密集,而走行于皮质淋巴组织的神经纤维相对稀疏,胸腺小体附近亦可见含ＣＧＲＰ神经分布。含ＮＰＹ神经纤维主要分布于血管周围、小叶间隔和皮髓质交界区,仅少数分支穿行于皮质胸腺细胞之间。胸腺被膜中有上述３种肽能神经纤维分布。本研究结果表明,胸腺内有丰富的肽能神经分布,这可能是神经肽调节胸腺生理功能的重要方式之一。     

先天性巨结肠病NOS阳性神经和VIP能神经的异常改变──酶组织化学与免疫组织化学联合法的研究

本文应用还原型辅酶Ⅱ（ＮＡＤＰＨ－Ｏ）－黄递酶组织化学和血管活性肠肽（ＶＩＰ）的免疫组织化学联合染色法,对１０例先天性巨结肠病扩张段和狭窄段结肠及４例“正常对照”结肠进行观察,结果发现：（１）狭窄段结肠壁丛内均缺失含一氧化氮合酶（ＮＯＳ）和ＶＩＰ神经元胞体。（２）狭窄段结肠肌层内ＮＯＳ和ＶＩＰ阳性纤维比“正常”结肠明显减少,酶活性或免疫反应性弱。结果表明,二种神经在病变肠段痉挛狭窄的神经病理机制诸因素中起重要作用。     

人类免疫缺陷病毒1／2型抗体检测酶联免疫试剂盒的研制

采用二聚体合成肽（ＨＩＶ－１ｇｐ４１、ｇｐ１２０、ｐ２４和ＨＩＶ－２ｇｐ３６）包被酶标板条制备成固相抗原,与鼠抗人ＩｇＧ单克隆抗体酶标记物、底物ＴＭＢ及阴阳性参考血清配套制备成ＨＩＶ抗体ＥＩＡ试剂盒,专供检测人血清或血浆ＨＩＶ１／２抗体之用。以荷兰、韩国及万泰试剂作为对照,用该试剂盒对检定所的Ｐａｎｅｌ标准及献血员１５５５０例（其中ＨＣＶ抗体阳性１２８例,ＨＢｓＡｇ阳性４６例）进行检测,四种试剂对检定所Ｐａｎｅｌ标准的１３份阳性血清均呈阳性反应,２８份阴性血清均为阴性;献血员１５５５０例,四种试剂对其中１份血清均呈阳性反应,经Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ试验证实为阴性,四种试剂的阴性检出率均为９９．９９％。连续制备三批试剂经中国药品生物制品检定所检定,所检项目全部合格;同时委托检定所进行临床考核,４７份阳性血清全部呈阳性反应,１５０份阴性血清全部为阴性。说明该试剂盒具有很好的敏感性和特异性。     

GPX－abzyme对受XO／HX系统损伤的心肌线粒体的保护作用

探讨了研制的具有谷胱甘肽过氧化物酶活力的含硒抗体酶（ＧＰＸ－ａｂｚｙｍｅ）对于受损心肌线粒体的保护作用,利用牛的心肌线粒体为实验材料,通过线粒体的膨胀度、脂质过氧化物含量、ＣＣＯ活力变化及电镜观察等几个方面证明ＧＰＸ－ａｂｚｙｍｅ能抵抗ＸＯ／ＨＸ系统产生的自由基的损伤作用,ＥＳＲ研究也表明ＧＰＸ－ａｂｚｙｍｅ能明显降低ＸＯ／ＨＸ损伤系统中的自由基含量。